PP2CによるSAPKシグナル伝達路の制御機構

PP2C对SAPK信号通路的控制机制

• 批准号: 12215006
• 负责人: 田村 眞理
• 金额: $ 2.82万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215006/
• 关键词: ストレス応答; SAPKシグナル伝達路; TAK1; プロテインホスファターゼ2C; IL-1

SAPKシグナル伝達路は細胞の分化、アポトーシスやストレス応答に関わる主要なシグナル伝達路である。我々はこれまで、プロテインホスファターゼによるSAPKシステムの制御機構の解明を目的に研究を進め、プロテインホスファターゼ2Cβ(PP2Cβ)がMAPKKKの一種であるTAK1と会合し、これを直接脱リン酸化して不活性化することにより、下流へのシグナルの流れを抑制することを報告した。これを受けて本研究では、PP2CβとTAK1の会合の特異性について検討し、さらに、PP2Cβのドミナントネガティブ型がTAK1シグナル伝達路に与える影響について検討を加えた。まず、PP2Cβがリン酸化型のTAK1にのみ結合するのか否かを検討する為に、TAK1の自己リン酸化部位のセリンを他のアミノ酸に置換した変異体を293細胞で発現させ、PP2Cβとの会合の有無を免疫共沈の手法で調べたところ、変異体TAK1も野生型と同様にPP2Cβと会合することが判明した。次に、PP2CβとTAK1の会合の特異性について検討したところ、PP2Cのもう一方のアイソフォームであるPP2CαはTAK1とは会合せず、また、TAK1以外のSAPKシステムの構成因子(MEKK3、MKK4、MKK6、JNKおよびp38)はPP2Cβと会合しないことが判明した。293細胞のIL-1刺激によりTAK1の活性化を介してAP1およびNFκBの活性化が起こることが報告されている。そこで、PP2CβがIL-1によるAP1およびNFκBの活性化に影響を与えるか否かをレポーター遺伝子を用いて検討したところ、PP2Cβの発現によって、いずれの活性化も部分的に抑制された。さらに、PP2Cβのドミナントネガティブ変異体はIL-1によるAP1の活性化をさらに上昇させることが判明した。

SAPK信号传导道是与细胞分化，凋亡和应激反应有关的主要信号传导。我们先前已经进行了研究，目的是通过蛋白质磷酸酶阐明SAPK系统的机制，并报道蛋白质磷酸酶2Cβ（PP2Cβ）与TAK1，一种MAPKKK的类型相关联，并直接去磷酸化，并直接抑制这一点，从而抑制信号下流的信号流动。为此，这项研究检查了PP2Cβ和TAK1之间关联的特异性，并进一步研究了PP2Cβ的主要负面形式对TAK1信号通路的影响。首先，为了研究PP2Cβ是否仅与TAK1的磷酸化形式结合，一种突变体在该突变体中，在293个细胞中表达了TAK1自体磷酸化位点的丝氨酸在TAK1的自磷酸化位点被替换，并且使用PP2Cβ相关的PP2Cβ的存在或与PP2Cβ相关性，并与PP2Cβ相关联，与PPPβ相同，与PPPβ相关联，并与PPP相关联，与PPβ相关联，并与PP2相关联，并与PP2相关联，并与PP2相关联。 类型。接下来，研究了PP2Cβ和TAK1之间关联的特异性，发现PP2Cα（PP2C的另一种同工型）与TAK1没有关联，并且SAPK系统的构成因素（MEKK3，MKK4，MKK4，MKK4，MKK6，MKK6，JNK和P38）与与PP2C的关联。据报道，通过激活TAK1，IL-1刺激293个细胞会激活AP1和NFκB。因此，当我们研究PP2Cβ是否使用报告基因通过IL-1影响PP2Cβ是否影响AP1和NFκB的激活，这两种激活都被PP2Cβ的表达部分抑制。此外，发现PP2Cβ的主要阴性突变体进一步增加了IL-1的AP1激活。

项目成果

Hanada,M.: "Regulation of the TAK1 signaling pathway by protein phosphatase 2C."J.Biol.Chem.. (In press).

Hanada,M.：“蛋白磷酸酶 2C 对 TAK1 信号通路的调节”。J.Biol.Chem..（正在出版）。