分化・増殖の制御におけるプロテインホスファターゼ2Cの機能に関する細胞工学的解析

蛋白磷酸酶2C调节分化和增殖功能的细胞工程分析

• 批准号: 06281204
• 负责人: 田村 眞理
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06281204/
• 关键词: プロテインホスファターゼ; 分子多様性; 選択的スプライシング; 精子形成

我々はこれまでに、ラット及びマウスのPP2CαcDNA、およびマウスPP2Cβの5種類のイソフォーム(PP2Cβ-1,-2,-3,-4および-5)をコードするcDNAを単離し、それらの解析を行ってきた。その結果、PP2CαおよびPP2Cβは異なった遺伝子産物であること、およびPP2Cβの5種類のイソフォームは、単一のpre-mRNAからの選択的スプライシングによって生ずることが判明した。それらのスプライシング部位は同じであり、スプライシングの結果生ずる5種類のイソフォームは、C末端の十数個のアミノ酸配列のみが異なっていた。ノーザン解析の結果、PP2CαおよびPP2Cβ-1のmRNAシグナルは、マウスの諸臓器に普遍的に発現していた。これに対し、PP2Cβ-2は脳と心筋のみに、またPP2Cβ-3,-4および-5は精巣と小腸のみに選択的に発現していた。特異抗体を用いたマウス脳の免疫組織染色の結果、PP2CαおよびPP2Cβ-1はニューロンとグリアの両方に発現しているのに対し、PP2Cβ-2はニューロンにのみ発現していることが明らかとなった。また、マウス胚性幹細胞や胚性始原生殖細胞では、PP2Cβ-1のmRNAシグナルが強いのに対し、PP2Cβ-3,-4および-5のシグナルは極めて低レベルであった。これに対し、精巣では、それらのシグナルの強度が逆転していた。さらに精巣のin situハイブリダイゼーションの結果、PP2Cβ-3,-4および-5のシグナルは、精細管内部の生殖細胞に検出された。以上の結果から、これらのイソフォームは精子形成の制御に関わっている可能性が示唆された。

I 々 は こ れ ま で に, ラ ッ ト and び マ ウ ス の PP2C alpha cDNA, お よ び マ ウ ス PP2C beta の 5 kinds の イ ソ フ ォ ー ム (PP2C beta 1, 2, 3, 4 お よ び - 5) を コ ー ド す る cDNA を 単 し, そ れ ら の parsing line を っ て き た. そ の results, PP2C alpha お よ び PP2C beta は different な っ た heritage 伝 zi chan content で あ る こ と, お よ び PP2C beta の 5 kinds の イ ソ フ ォ ー ム は, 単 の pre - mRNA か ら の sentaku of ス プ ラ イ シ ン グ に よ っ て raw ず る こ と が.at し た. そ れ ら の ス プ ラ イ シ ン は グ parts with じ で あ り, ス プ ラ イ シ ン グ の result born ず る 5 kinds の イ ソ フ ォ ー ム は, C terminal の dozen a の ア ミ ノ acid with column の み が different な っ て い た. ノ ー ザ ン analytical の results, PP2C alpha お よ び PP2C beta 1 の mRNA シ グ ナ ル は, マ ウ ス の the viscera に common に 発 now し て い た. こ れ に し seaborne, PP2C beta 2 は 脳 と heart muscle の み に, ま た PP2C beta 3, 4 お よ び - 5 は fine 巣 と small intestine の み に sentaku of に 発 now し て い た. Specific antibody を with い た マ ウ ス 脳 の immunohistochemical staining の results, PP2C alpha お よ び PP2C beta 1 は ニ ュ ー ロ ン と グ リ ア の struck party に 発 now し て い る の に し seaborne, PP2C beta 2 は ニ ュ ー ロ ン に の み 発 now し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た, マ ウ ス embryonic stem cells や embryonic primordial germ cells in the beginning で は の, PP2C beta - 1 mRNA シ グ ナ ル が strong い の に し seaborne, PP2C beta 3, 4 お よ び - 5 の シ グ ナ ル は extremely め て low レ ベ ル で あ っ た. <s:1> れに against 転, the nest で で, それら それら シグナ シグナ <s:1>, <s:1> intensity が, reverse 転, て, て, た and た た. さ ら に fine 巣 の in situ ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン の results, PP2C beta 3-4 お よ び - 5 の シ グ ナ ル は, fine tube internal の germ cell に 検 out さ れ た. の above results か ら, こ れ ら の イ ソ フ ォ ー ム は spermatogenesis の suppression に masato わ っ て い が る possibility in stopping さ れ た.