分化・増殖の制御におけるプロテインホスファターゼ2Cの機能に関する細胞工学的解析

蛋白磷酸酶2C调节分化和增殖功能的细胞工程分析

• 批准号: 06281204
• 负责人: 田村 眞理
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06281204/
• 关键词: プロテインホスファターゼ; 分子多様性; 選択的スプライシング; 精子形成

我々はこれまでに、ラット及びマウスのPP2CαcDNA、およびマウスPP2Cβの5種類のイソフォーム(PP2Cβ-1,-2,-3,-4および-5)をコードするcDNAを単離し、それらの解析を行ってきた。その結果、PP2CαおよびPP2Cβは異なった遺伝子産物であること、およびPP2Cβの5種類のイソフォームは、単一のpre-mRNAからの選択的スプライシングによって生ずることが判明した。それらのスプライシング部位は同じであり、スプライシングの結果生ずる5種類のイソフォームは、C末端の十数個のアミノ酸配列のみが異なっていた。ノーザン解析の結果、PP2CαおよびPP2Cβ-1のmRNAシグナルは、マウスの諸臓器に普遍的に発現していた。これに対し、PP2Cβ-2は脳と心筋のみに、またPP2Cβ-3,-4および-5は精巣と小腸のみに選択的に発現していた。特異抗体を用いたマウス脳の免疫組織染色の結果、PP2CαおよびPP2Cβ-1はニューロンとグリアの両方に発現しているのに対し、PP2Cβ-2はニューロンにのみ発現していることが明らかとなった。また、マウス胚性幹細胞や胚性始原生殖細胞では、PP2Cβ-1のmRNAシグナルが強いのに対し、PP2Cβ-3,-4および-5のシグナルは極めて低レベルであった。これに対し、精巣では、それらのシグナルの強度が逆転していた。さらに精巣のin situハイブリダイゼーションの結果、PP2Cβ-3,-4および-5のシグナルは、精細管内部の生殖細胞に検出された。以上の結果から、これらのイソフォームは精子形成の制御に関わっている可能性が示唆された。

I am 々はこれまでに、ラット和びマウスのPP2CαcDNA、およびマウスPP2Cβの5 kinds of のイソフォーム(PP2Cβ-1,-2,-3,-4および-5)をコードするcDNAを単利し、それらのANALYSISを行ってきた. The results of その, PP2Cα およびPP2Cβはisoなった缝子products であること, PP2Cβの5 types of のイソフォームは, 単一のpre-mRNAからの选択's スプライシングによって生ずることが明明した.それらのスプライシング PARTは Same as じであり、スプライシングのRESULTS ずる5 Type のイソフォームは, C-terminal のアミノacid sequence のみがisoなっていた. The results of analysis of ノーザン, PP2Cα およびPP2Cβ-1 のmRNA シグナルは, and the マウスのvarious organs are now common.これに対し、PP2Cβ-2は脳と心丝のみに、またPP2Cβ-3,-4および-5は精巣と小 intestineのみに选択的に発成していた. Results of immunohistostaining with specific antibodies, PP2Cα およびPP2Cβ-1 はニューロンとグリアの両方に発成しているのに対し、PP2Cβ-2はニしていることが明らかとなった.また、マウスEmbryonic stem cells and embryonic primordial germ cells では、PP2Cβ-1のmRNAシグナルがStrong いのに対し, PP2Cβ-3,-4および-5のシグナルは extremely めてlow レベルであった.これに対し, 精巣では, それらのシグナルのSTRENGTH が inverse転していた.さらに精巣のin situ ハイブリダイゼーションの results, PP2Cβ-3,-4および-5のシグナルは, germ cells inside the seminiferous tubes に検出された. The above results indicate the possibility of sperm formation and the possibility of sperm formation.