骨格筋細胞の分化におけるタンパク質ホスファターゼの機能

蛋白磷酸酶在骨骼肌细胞分化中的作用

• 批准号: 04152011
• 负责人: 田村 眞理
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152011/
• 关键词: プロテインホスファターゼ; cDNAクローニング; タンパク質リン酸化

1.タイプ2C_βプロテインホスファターゼcDNAのクローニング。今回我々は、タイプ2Cプロテインホスファターゼ(PP2C)の2つのサブタイプ(2C_αおよび2C_β)のうち、2C_βの全長をコードするマウスcDNAクローン(pTK-1)を単離した、pTK-1は390個のアミノ酸より成るタンパク質をコードしており、活性なタンパク質の大腸菌での発現にも成功した。またノーザン解折の結果、pTK-1とハイブリダイズする2種類のmPNA(3.5kbおよび3.0kb)がマウスの各種臓器に普通的に観察されたが、比較的、脳、心臓および骨格筋で発現量が多かった。またP19細胞がレチノイン酸処理によって神経細胞に分化する過程で、特に、3.5kbのmRNAの量の増加が観察された。骨格筋の分化過程における、これらのmRNAの量的変動の有無については現在検討中である。2.タイプ2C_αプロテインホスファターゼのリン酸化。酵母細胞をPP2C_αの発現ベクターでトランスフォームし、 ^<32>Piでインオンベートしたところ、発現されたPP2C_αのセリン残基のリン酸化が観察された。一方精製したPP2C_αをカゼインキナーゼIIでリン酸化させたところ、PP2C_α1モルあたり1.5モルのリン酸を取り込みが観察された。リン酸化アミノ酸はセリンであった。さらにリン酸化ペプチドマッピングにより、in vivoおよびin vivitroでのリン酸化部位は同一であることが強く示唆された。以上の結果から、PP2C_αは酵母細胞内でカゼインキナーゼIIによりリン酸化された可能性が示唆された。PP2C_αのリン酸化の生理的意味については現在検討中である。

1.タイプ2C_βプロテインホスファターゼcDNAのクローニング。In this paper, we analyzed the structure of PP2C (PP2C) and its two components (2C_α and 2C_β), and found that the whole length of 2C_β cDNA library (pTK-1) was isolated. pTK-1 was successfully developed with 390 amino acids. As a result of this analysis, pTK-1 and pTK-1 were detected in two types of mPNA(3.5kb and 3.0kb), and the detection of pTK-1, pTK-1 and pTK-2 was compared. An increase in the amount of 3.5 kb mRNA was observed in P19 cells treated with acid and during neuronal differentiation. In the process of differentiation of bone marrow, there is no change in the amount of mRNA. 2. The 2C_α-ray film was produced by acid reaction. PP2C_α gene expression in yeast <32>cells was observed in the presence and absence of PP2C_α residues. A party refined PP2C_αThe acid changes the temperature. In vivo and in vivo, the acid sites are the same. The above results show that PP2C_α can be used as an indicator of the possibility of acidification in yeast cells. PP2C_α is the most important factor in the physiological meaning of acidification.

项目成果

Toru Yamasaki: "Characterization of mucin in the hepatic bile of patients with intrahepatic pigment stones" J.Gastroenterol.Hepatol.7. 36-41 (1992)

Toru Yamasaki：“肝内色素结石患者肝胆汁中粘蛋白的特征”J.Gastroenterol.Hepatol.7。

Takayasu Kobayashi: "Expression of rat type 2ca protein phosphatase in Saccharomyces cerevisiae cells" Adv.Prat.Phosphatases.

Takayasu Kobayashi：“酿酒酵母细胞中大鼠 2ca 型蛋白磷酸酶的表达”Adv.Prat.磷酸酶。

Kazuki Kitamura: "mRNA Levels of Catalytic Subunits of Protein Phosphatases 1,2A,and 2C in Hepatocarcinogenesis." Jpn.J.Cancer Res.83. 66-71 (1992)

Kazuki Kitamura：“肝癌发生中蛋白磷酸酶 1,2A 和 2C 催化亚基的 mRNA 水平。”

Susumu Ohishi: "Enhanced exression of type 2C protein phosphatase gene durinh myogenic differentiotin of C3H10T1/2 cells" Biochem.Internatl.28. 345-351 (1992)

Susumu Ohishi：“C3H10T1/2 细胞生肌分化过程中 2C 型蛋白磷酸酶基因的表达增强”Biochem.Internatl.28。