Bcr-Abl下流のrasGAP結合蛋白質Dok及びDok-2と慢性骨髄性白血病

Bcr-Abl 下游的 rasGAP 结合蛋白 Dok 和 Dok-2 与慢性粒细胞白血病

• 批准号: 12215026
• 负责人: 山梨 裕司
• 金额: $ 3.01万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215026/
• 关键词: 慢性骨髄性白血病; Bcr-Abl; Dok; Dok-2; rasGAP; チロシンキナーゼ

Dokは、チロシンキナーゼ活性を持つ癌遺伝子産物の基質であり、PH、PTBドメインを持つドッキング蛋白質である。また、Dokとその類縁蛋白質Dok-2はヒト慢性骨髄性白血病(CML)の血液幹細胞中で強くチロシンリン酸化される。前年度の研究から、我々はDokがB細胞の増殖とMAPキナーゼに抑制性のシグナル分子であることを発見し、それがCML発症にも抑制的に機能していると予想した。本年度は、CMLのモデル系を適用するために、Dok/Dok-2のノックアウトマウスを樹立するとともに、Srcによるトランスフォーメーションを指標に、Dokによる癌化抑制の機序を検討した。1.Dok-2及びDok/Dok-2二重ノックアウトマウスは、生後6ヶ月までは見かけ上異常なく成長した。両者とも、8週齢での血液細胞の構成にも異常は認められなかったが、6ヶ月齢ノックアウトマウスにはリンパ組織の過形成が多く認められた。現在、この過形成の成因について解析を進めるとともに、CMLのモデルマウスであるbcr-ablトランスジェニックマウスとの交配を進めている。2.DokはSrcによる細胞のトランスフォーメーションを抑制するが、カルボキシ端から364番目までの欠失変異体(Dok-363)はその抑制能を保持していた。しかし、さらに27アミノ酸欠失したDok-336はその抑制能を失った。この27アミノ酸にはrasGAP SH2の標的配列があり、実際、Dok-363はrasGAPと会合し、Dok-336は会合しなかった。また、Srcによるチロシンリン酸化を受けないような点変異体はその抑制能もrasGAPとの会合能も失った。以上の知見から、Dokはチロシンリン酸化されることでrasGAPをリクルートし、Ras/MAPキナーゼを阻害することでトランスフォーメーションを抑制するのではないかと考え、解析を続けている。

Dok は, チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ activity を hold つ heritage cancer 伝 zi chan content の matrix で あ り, PH, PTB ド メ イ ン を hold つ ド ッ キ ン グ protein で あ る. ま た, Dok と そ の class try protein Dok - 2 は ヒ ト chronic bone marrow leukemia (CML) の blood stem cells in the strong で く チ ロ シ ン リ ン acidification さ れ る. Before the annual の research か ら, I 々 は Dok が B cells の raised colonization と MAP キ ナ ー ゼ に inhibitory の シ グ ナ ル molecular で あ る こ と を 発 し, そ れ が CML 発 disease に も inhibit に function し て い る と to think し た. は this year, CML の モ デ ル department を applicable す る た め に, Dok Dok - 2 / の ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を set す る と と も に, Src に よ る ト ラ ン ス フ ォ ー メ ー シ ョ ン を index に, Dok に よ る cancer inhibition の machine sequence を beg し 検 た. Dok - 2 and び Dok Dok - 2 / double ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス は, raw ヶ six months after ま で は see か け on abnormal な く growth し た. Who struck と も, 8 weeks 齢 で の blood cells の に も abnormal は recognize め ら れ な か っ た が, 6 ヶ 齢 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス に は リ ン パ organization have の form が く more know め ら れ た. Now, こ の causes a form の に つ い て parsing を into め る と と も に, CML の モ デ ル マ ウ ス で あ る BCR - abl ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス と の mating を into め て い る. 2. Dok は Src に よ る cells の ト ラ ン ス フ ォ ー メ ー シ ョ ン を inhibit す る が, カ ル ボ キ シ end か ら 364's mesh ま で の owe lost - variants (Dok - 363) は そ の can inhibit を keep し て い た. <s:1> た を, さらに27ア, ア ノ, acid deficiency loss たDok-336 そ そ, <s:1> inhibition energy を loss った. こ の 27 ア ミ ノ acid に は rasGAP SH2 の mark with column が あ り, be interstate, Dok - 363 は rasGAP meet と し, Dok - 336 meet は し な か っ た. ま た, Src に よ る チ ロ シ ン リ ン acidification を by け な い よ う な point - variant は そ の can inhibit も rasGAP と の can meet も lost っ た. Above の knowledge か ら, Dok は チ ロ シ ン リ ン acidification さ れ る こ と で rasGAP を リ ク ル ー ト し, Ras/MAP キ ナ ー ゼ を resistance against す る こ と で ト ラ ン ス フ ォ ー メ ー シ ョ ン を inhibit す る の で は な い か と え test, parse を 続 け て い る.

项目成果

Zhou Songyang: "Domain-dependent function of the rasGAP binding protein p62^<dok> in cell signaling."Journal of Biological Chemistry. (印刷中). (2001)

周松阳：“rasGAP 结合蛋白 p62^<dok> 在细胞信号传导中的结构域依赖性功能。”生物化学杂志（2001 年出版）。

Yuji Yamanashi: "Role of the rasGAP-associated docking protein p62^<dok> in negative regulation of B cell receptor-mediated signaling."Genes & Developments. 14. 11-16 (2000)

Yuji Yamanashi：“rasGAP 相关对接蛋白 p62^<dok> 在 B 细胞受体介导的信号传导负向调节中的作用。”基因