Apaf1欠損アポトーシス抵抗性細胞における癌化と細胞死の解析

Apaf1缺陷型抗凋亡细胞癌变和细胞死亡分析

• 批准号: 13216078
• 负责人: 吉田 裕樹
• 金额: $ 3.01万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13216078/
• 关键词: Apaf1; ニューロン; アポトーシス; ミトコンドリア

これまで、ミトコンドリア依存性アポトーシス経路におけるアダプター分子Apaf1を欠損する細胞が抗がん剤刺激を含む様々な刺激に対してアポトーシス抵抗性を示すことを報告してきた。本研究では、Apaf1欠損細胞が、1)癌化刺激に対する高感受性を有するか、また2)アポトーシス誘導刺激に対して刺激後期においてどのような変化を示すかを解析した。まず、野生型、およびApaf1を欠損する胎児線維芽細胞を3T3化し、細胞の増殖能などの性質を解析した。野生型、Apaf1欠損細胞とも同程度の増殖能を示し、また接触阻止や足場依存性などの性質も同様に保持していた。このことから、Apaf1欠損、すなわちアポトーシス抵抗性単独では、細胞は癌化せず、遺伝子変異や癌ウイルス遺伝子の発現などの要因が必要と考えられた。現在、化学発癌物質や放射線照射などで、細胞の癌化を試みており、さらに癌化した細胞の性質を解析する予定である。また、株化していないApaf1欠損細胞に抗がん剤刺激を加えた場合、野生型に比べ抵抗性を示すものの、約48時間後には多くの細胞に細胞死が生じることが確認された。この細胞死は核の濃縮や分断化、およびカスパーゼの活性化を伴わずアポトーシスでは無いと考えられた。電子顕微鏡による解析により、刺激後のApaf1欠損細胞においては核の膨化などネクローシスと類似した変化が見られた。また、刺激初期より、ミトコンドリアの機能低下や微細構造の破壊などの像も検出された。これらのことから、Apaf1を欠損しカスパーゼの活性化が生じない細胞にアポトーシス刺激を加えた場合、ミトコンドリアの機能低下に引き続くネクローシス、またはネクローシスに類似した細胞死が生じることが示された。

This is the first time that a cell has been damaged by a stimulus, including a stimulus, and the second time that a cell has been damaged by a stimulus, including a stimulus, and the third time that a cell has been damaged by a stimulus. In this study, Apaf-1 cells were damaged, 1) high sensitivity to carcinogenic stimuli was detected, 2) high sensitivity to carcinogenic stimuli was detected, 3) high sensitivity to carcinogenic stimuli was detected, and 4) high sensitivity to carcinogenic stimuli was detected. Analysis of the properties of 3T3 transformation and cell proliferation in embryonic line cells with defective cell lines, wild-type and apaf1 Wild type and apaf1 deficient cells exhibit the same degree of reproductive activity, and the same nature of contact inhibition and foot field dependence remains. The main reasons for the occurrence of this disease are: 1) the damage of apaf1, 2) the resistance of apaf 1, 3) the differentiation of apaf 1, 4) the differentiation of apaf 1, 5) the differentiation of apaf 1, 6) the differentiation of Apaf1, 7) the differentiation of Apaf1, 8) the differentiation of Apaf1, 7) the differentiation of apaf 1, 7) the differentiation of apaf 1, 8) the differentiation of apaf 1, 9) the differentiation of apaf 1, 7) the differentiation of apaf 1, 9) the differentiation of apaf 1, 7) the differentiation of apaf 1, 8) the differentiation of apaf 1, 9) the differentiation of apaf 1, 7) the differentiation of apaf 1, 9) the differentiation of apaf 1, 7) the differentiation of apaf 1, 7) the differentiation of At present, chemical carcinogens and radiation exposure, cell carcinogenesis test, and now the nature of carcinogenesis analysis of predetermined. In addition, wild-type resistance was shown to be higher than wild-type resistance, and it was confirmed that more cells died after about 48 hours. The cell death is concentrated, fragmented, and activated. The electron microscope analyzes the damage caused by Apaf1 after stimulation, and the nuclear expansion is similar to that of Apaf1. In the early stage of stimulation, the functional degradation of the micro-structure and the image detection of the micro-structure are reduced. In this case, Apaf1 is deficient in the activation of the cell, and in the case of stimulation, it is deficient in the function of the cell, and in the case of death of the cell.

项目成果

Miyazaki K 他: "Caspase-independent cell death and mitochondrial disrupsions observed in the apaf1-deficient cells"J. Biochem (Tokyo). 129・6. 963-969 (2001)

Miyazaki K 等：“在 apaf1 缺陷细胞中观察到的不依赖于半胱天冬酶的细胞死亡和线粒体破坏”J. Biochem（东京）129·6（2001）。

Hara H 他: "The Apoptotic Protease-Activating Factor 1-Mediated Pathway of Apoptosis Is Dispensable for Negative Selection of Thymocytes"J. Immunol.. 168・5. 2288-2295 (2002)

Hara H 等：“凋亡蛋白酶激活因子 1 介导的凋亡途径对于胸腺细胞的负选择来说是可有可无的”J.Immunol.. 168・5（2002）。