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ヒストンmRNAの新規な核外輸送機構の研究

组蛋白mRNA新型核输出机制的研究

基本信息

批准号：
08J06248
负责人：
鈴木達也
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J06248/
关键词：
RNA 核内構造体核外輸送

项目摘要

本研究員は現在までに、哺乳培養細胞においてUsnRNA輸送因子PHAXはUsnRNAのみならず核小体小RNA(snoRNA)や複製依存的ヒストンmRNAとも結合していることを見出していた。またヒストンmRNAのPHAXとの結合はmRNAの3'端のプロセッシングに依存的であることを明らかにしていた。さらにPHAXがヒストンmRNAに対しどのように機能しているのかを調べるために、さまざまな阻害剤を用いて核外輸送効果を調べることができるアフリカツメガエルの卵母細胞への微量注入実験を行った。カエル卵母細胞を用いて、UsnRNAの核外輸送にドミナントネガティブに働くリコンビナントPHAX変異タンパク質を同時注入すると、UsnRNA・3'プロセッシングされたヒストンmRNAの核外輸送が阻害された。核外輸送が阻害されたこれらのRNAは、核内の核内構造体の成分に蓄積した。次にPHAXが核内でどのようにこれらのRNAと結合し、核外輸送へと導いているかを調べるために、カエル卵母細胞の核内において、RNAの局在を可視化する実験系を構築した。核内におけるRNAの可視化の実験系を用いて、PHAXと結合するUsnRNAやヒストンmRNAは、核内の構造体のひとつであるCajal Bodyという領域に一時的に局在することを見出した。そしてPHAXのさまざまな変異体による解析により、PHAXはRNAをCajal Bodyへと一時的にリクルートさせてから核質へと脱出させるという、従来知られていた核外輸送機能以外の新たな役割を持っていることを明らかにした。

We have shown that the UsnRNA transporter PHAX binds to UsnRNA, snoRNA and replication-dependent RNA in cultured mammalian cells. The expression of Phax mRNA in the 3 '-terminal region of the mRNA is dependent on the expression of Phax mRNA in the 3'-terminal region. Phax mRNA is used to regulate the function of the gene in vitro and to inhibit the effect of extracellular transport in vitro. UsnRNA is used in oocytes to inhibit the extra-nuclear transport of UsnRNA mRNA. The accumulation of RNA in the nucleus and the components of the nuclear structure is also a result of the inhibition of extracellular transport. In addition, PHAX can be used for RNA binding in the nucleus, and RNA binding in the nucleus. In the nuclear RNA visualization system, PHAX and binding, UsnRNA and mRNA, in the nuclear structure, Cajal Body and in the field of time, in the field, in the field of time, in the field. PHAX is a new type of RNA that can be used to detect and detect DNA in the Cajal Body.