三次元的ヒト血液脳関門モデルの構築:抗アミロイド抗体作用機序の解明

三维人体血脑屏障模型的构建：阐明抗淀粉样蛋白抗体的作用机制

• 批准号: 20659140
• 负责人: 神田 隆
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20659140/
• 关键词: アルツハイマー病; βアミロイド; 血液脳関門; 血管内皮細胞; トランスポーター

平成20年度の成果をふまえ、申請者の教室で確立したヒト脳毛細血管由来内皮細胞株とヒト血管周細胞株、および平成21年度に確立したヒト神経膠細胞不死化細胞株の3者による"Neurovascular Unit"のin vitroでの再構築モデルの確立を第1の目的とした。ゲル化した細胞外マトリックス中に、in vivoと同一の脳毛細血管を再構築しようという世界に類のない試みであり,当初より主技の確立まで相当な時間を要することが予想されたが、2年間の成果として得られたモデルはまだ不十分なものであり、本研究計画の最終目的である血液脳関門を介したβアミロイド排泄機構の基本的なデータ蓄積には至っていない。[方法と結果](1)60mmプラスティック培養皿にラットI型コラーゲンを5mmの厚さでゲル化したものを作成、その上にDiIをとりこんだ脳毛細血管由来内皮細胞を播種した。約5日間の培養継続により、脳毛細血管内皮細胞はvivoでの毛細血管網に類似する連続した管腔構造をゲル内に形成した。この上にDiO標識血管周細胞を播種し、3日間培養した。血管周細胞は脳毛細血管内皮細胞の管腔構造の周囲にはりつくように生着し、一部の血管では管腔構造の大部分を覆うに至った。(2)管腔構造を形成したヒト血液脳関門由来細胞に、アミロイド輸送に関与するトランスポーターであるLRP-1とP-glycoproteinが発現していることを確認した。本研究の意義:ヒト血液脳関門由来細胞を用いてヒト脳微小血管に極めて近似したin vitro血液脳関門モデルを作製し、アミロイドの排泄機構を見ようという世界初の試みである。血液脳関門でのアミロイド排出メカニズム探求の最良のモデルということができ、その意義は極めて大きい。2年間の本研究は、残念ながら第1段階のin vitro血液脳関門モデル作製中途で終わったが、このモデルの必要性は2年前に増して高まっているものと考える。新たな研究プロジェクトのもとで、最終目的であるアミロイド排泄機構の解明まで更なる基礎実験の積み重ねが必要である。

In 2010, the applicant's laboratory was established, and the capillary derived endothelial cell line and the perivascular cell line were established. In 2011, three of the glioma cell immortalized cell lines were established, and the "Neurovascular Unit" was reconstructed in vitro. In vitro, in vivo, the same capillaries are reconstructed in the world. In the first place, the main technology is established. It takes a long time. In the second place, the results are obtained in two years. The ultimate goal of this study is to investigate the mechanisms of blood loss and excretion. [Methods and Results](1)60mm culture dish, type I culture dish, 5 mm thick culture dish, type II culture dish, 5mm thick culture dish, 6 mm thick culture dish, 6 mm thick culture dish, 5mm thick culture dish, 6 mm thick culture dish, 5 mm thick culture dish, 6 mm culture dish, 6 mm culture dish, About 5 days after culture, capillary endothelial cells were formed in vivo and similar to capillary network. Dio logo perivascular cells seeded, 3 day culture The perivascular cells are the vascular endothelial cells, and most of the vascular endothelial cells are the vascular endothelial cells. (2)LRP-1 and P-glycoprotein were identified as the origin of the lumen structure. The significance of this study: blood clots from the use of cells, microvessels, and similar in vitro blood clots from the control, excretion, and mechanisms of the world's first attempt The blood flow rate is the highest in the world, and the blood flow rate is the highest in the world. During the past two years, this study has been carried out in the first stage of vitro blood circulation, and the necessity of blood circulation has been increased since two years ago. The new research aims to clarify the mechanism of excretion and to improve the foundation of accumulation.

项目成果

血管脳関門(BBB)および血管神経関門(BNB)におけるペリサイトの役割.

周细胞在血脑屏障（BBB）和血神经屏障（BNB）中的作用。

• 发表时间: 2008
• 作者: 14H.Bokura;S.Yamaguchi;K.Iijima;A.Nagai;H.Oguro;柏村陽子
• 通讯作者: 柏村陽子

Interferon α投与中に意識障害と構音障害を来した62歳男性例

一名 62 岁男性在接受干扰素 α 治疗时出现意识障碍和构音障碍。

• 发表时间: 2009
• 作者: Wada H;Abe M;Ono K;Morimoto T;Kawamura T;Takaya T;Satoh N;Fujita M;Kita T;Shimatsu A;Hasegawa K.;岡田裕子
• 通讯作者: 岡田裕子

パーキンソン病における両側STN-DBS前後のQOLの検討

帕金森病双侧STN-DBS前后生活质量检查

• 发表时间: 2009
• 作者: Nagao K;Ono K;Horie T;Nishi H;Kinoshita M;Hasegawa K;Kita T;神田隆;清水文崇;柏村陽子;春木明代;田崎彩子;竹下幸男;田崎彩子;神田隆;神田隆;川井元晴;根来清
• 通讯作者: 根来清

多発性硬化症インターフェロンβ長期投与例の再発予防効果の検討

长期接受干扰素β治疗的多发性硬化症患者预防复发效果的检验

• 发表时间: 2009
• 作者: Nagao K;Ono K;Horie T;Nishi H;Kinoshita M;Hasegawa K;Kita T;神田隆;清水文崇;柏村陽子;春木明代;田崎彩子;竹下幸男;田崎彩子;神田隆;神田隆;川井元晴;根来清;川井元晴
• 通讯作者: 川井元晴

末梢神経障害を主症状とした神経サルコイドーシスの4例

以周围神经病变为主要症状的神经结节病四例

• 发表时间: 2009
• 作者: Nagao K;Ono K;Horie T;Nishi H;Kinoshita M;Hasegawa K;Kita T;神田隆;清水文崇;柏村陽子;春木明代;田崎彩子;竹下幸男;田崎彩子;神田隆;神田隆;川井元晴;根来清;川井元晴;古賀道明;小笠原淳一
• 通讯作者: 小笠原淳一