Charakterisierung, funktionelle Expression und Mutagenese der Gene bakterieller Molybdän-haltiger Hydroxylasen

Das Vorhaben Befa？t Sich MIT der vergleichenden Charakterisierung der Bakteriellen Mo Mo？nhaltigen Hotxylasen chinolin-2 oxoxoreduktase(QOR)、Isochinolin-1-oxoreduktase(IOR)和Chinaldin-4-Oxx(QOX)。索伦·查克泰里耶特是一位伟大的艺术家。Ein系统ZUR调节，Funktionellen表达的基因bakterieller钼dän-HalTiger羟基亚胺zu wicklen。这句话的意思是：“我不知道你的意思是什么？”他说，“我不知道怎么做。在过去的时间里，运动和特殊的运动和特性是不同的，不同的是，它们是不同的。这是一种新的免疫细胞化学方法。转座子-突变Sollen Mutanten von P.putida 86 erzeugt，Um在Zukünftigen arbeiten die Identifizierung and Charakterisierung akzessorischer gene der Chinolinoh lierung zu ermöglichen中。在Zusammenarbeit麻省理工学院，Hüttermann教授(洪堡)是MoMo dän-und Eisen-Schwefel-Ztren der Mo bamdänhaltigen Higylasen vergleichend charakterisiert；在Zusammenarbeit MIT教授Huber(Marinsry)是Qor Kristallisiert，um Röntgenstrukturanalysen zu ermöglichen。

Das Vorhaben befaßt sich mit der vergleichenden Charakterisierung der bakteriellen Molybdänhaltigen Hydroxylasen chinolin-2oxidoreduktase (Qor), Isochinolin-1-oxidoreduktase (Ior) und Chinaldin-4-oxidase (Qox). Die Gene der Qox sollen charakterisiert werden. Es soll versucht werden, ein System zur regulierten, funktionellen Expression der Gene bakterieller Molybdän-haltiger Hydroxylasen zu entwicklen. Bei erfolgreicher Expressionsklonierung soll ein Glutamatrest der Qor und Ior mit vermuteter katalytischer Bedeutung durch gerichtete ortsspezifsche Mutagenese ausgetauscht werden. Durch kinetische und spektroskopische Charakterisierung der aus Expressionsklonen isolierten Proteinvarianten soll die katalytische Rolle dieses Glutamatrestes untersucht werden. Die zelluläre Lokalisation der Ior, deren Sequenz einen mutmaßlichen Leader-Bereich aufweist, soll immuncytochemisch nachgewiesen werden. Durch Transposon-Mutagenese sollen Mutanten von P. putida 86 erzeugt werden, um in zukünftigen Arbeiten die Identifizierung und Charakterisierung akzessorischer Gene der Chinolinhydroxylierung zu ermöglichen. In Zusammenarbeit mit Prof. Hüttermann (Homburg) werden die Molybdän- und Eisen-Schwefel-Zentren der Molybdänhaltigen Hydroxylasen vergleichend charakterisiert; in Zusammenarbeit mit Prof. Huber (Marinsried) wird die Qor kristallisiert, um Röntgenstrukturanalysen zu ermöglichen.