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増殖型トリレトロウイルスベクターを用いた遺伝子導入法による神経細胞死機構の解析

増殖型トリレトロウイルスベクターを用いた遺伝子導入法による神経細胞死機構の解析
使用繁殖型禽逆转录病毒载体通过基因转移方法分析神经细胞死亡机制
批准号：
11770006
负责人：
佐藤 昇
金额：
$1.41万
依托单位：
Fukushima Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1999 至 2000
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770006/
关键词：
ニワトリ胚遺伝子導入レトロウイルスベクター細胞死運動ニューロンBcl-2レトロウイルスRCASBP神経

项目摘要

项目成果

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本年度は前年度の研究成果を踏まえて、Bcl-2遺伝子を増殖型トリレトロウイルスベクター(RCASBP)を用いて鶏胚脊髄運動ニューロンへ導入して細胞死への影響を検討した。1)鶏胚(E4.5;stage24)の頚髄前角においてはpyknosisの形態像を伴った細胞死(アポトーシス)が多く認められるが、RCASBP(B)bcl-2を感染させた鶏胚では、頚髄の前角においてpyknosisの形態像が著明に減少していた。またアポトーシスに特徴的なDNAの断片化をTUNEL反応によって調べると、野生型やRCASBP(B)EGFPを感染させた鶏胚ではTUNEL陽性細胞が頚髄前角に多く認められたが、RCASBP(B)bcl-2を感染させた鶏胚においてはTUNEL陽性細胞は著明に減少していた。2)頚髄運動ニューロンの細胞死が始まる直前(E4;stage23)の運動ニューロン数を運動ニューロン特異的なマーカーであるislet-1/2に対する免疫染色によって検討したところ、野生型の胚、RCASBP(B)EGFPを感染させた胚、RCASBP(B)Bcl-2を感染させた胚の間でislet-1/2陽性細胞数に差は認められなかった。3)頚髄運動ニューロンの細胞死が終了した後(E5;stage26)の運動ニューロン数を同様に比較したところ、RCASBP(B)Bcl-2を感染させた胚では他に比べて明らかにislet-1/2陽性細胞が増加していた。4)以上から鶏胚(E4.5)における頚髄運動ニューロン死はBcl-2分子を導入することによって抑制されることが明らかになった。本研究によって頚髄運動ニューロン死に関与する分子の一つが初めて明らかにされ、また増殖型トリレトロウイルスベクターが鶏胚の発生研究において有用な手法であることが確認された。
期刊论文(6)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Gotow,T.,M.Shibata,S.Kanamori,O.Tokuno,Y.Ohsawa,N.Sato,K.Isahara,Y.Yayoi,T.Watanabe,J.F.Leterrier,M.Linden,E.Kominami,Y.Uchiyama.: "Selective localization of Bcl-2 to the inner mitochondrial and smooth endoplasmic reticulum membranes in mammalian cells"Ce
Gotow,T.,M.Shibata,S.Kanamori,O.Tokuno,Y.Ohsawa,N.Sato,K.Isahara,Y.Yayoi,T.Watanabe,J.F.Leterrier,M.Linden,E.Kominami,Y.
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Isahara,K.,Y.Ohsawa,S.Kanamori,M.Shibata,S.Waguri,N.Sato,T.Gotow,T.Watanabe,T.Momoi,K.Urase,E.Kominami,Y.Uchiyama.: "Regulation of a novel pathway for cell death by lysosomal aspartic and cysteine proteinases"Neuroscience. 91・1. 233-249 (1999)
谏原、K.、Y. Ohsawa、S. Kanamori、M. Shibata、S. Waguri、N. Sato、T. Gotow、T. Watanabe、T. Momoi、K. Urase、E. Kominami、Y. Uchiyama。： “溶酶体天冬氨酸和半胱氨酸蛋白酶调节细胞死亡的新途径”神经科学91・1。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Chung,K.C.,J.H.Park,C.H.Kim,H.W.Lee,N.Sato,Y.Uchiyama,Y.S.Ahn.: "Novel biphasic effect of pyrrolidine dithiocarbamate on neuronal cell viability is mediated by the differential regulation of intracellular zinc and copper ion levels, NF-kappaB, and MAP kin
Chung,K.C.,J.H.Park,C.H.Kim,H.W.Lee,N.Sato,Y.Uchiyama,Y.S.Ahn.：“吡咯烷二硫代氨基甲酸盐对神经元细胞活力的新型双相作用是通过细胞内锌和铜离子水平的差异调节介导的，
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
末梢標的とその支配神経形成についての定説の再考
  • 批准号：
    22K06807
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $2.75万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    佐藤 昇
  • 依托单位：
    Niigata University
Public Speaking and Literate Culture in Classical Athens
  • 批准号：
    21K00940
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 资助金额：
    $2.75万
  • 财政年份：
    2021
  • 负责人：
    佐藤 昇
  • 依托单位：
    Kobe University
Comparative Studies on Rhetoric Strategies in Democratic Athens
  • 批准号：
    19KK0296
  • 项目类别：
    Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (A))
  • 资助金额：
    $6.32万
  • 财政年份：
    2020
  • 负责人：
    佐藤 昇
  • 依托单位：
    Kobe University
紀元前5世紀末から4世紀のアテーナイにおける民主政と市民参加に関する研究
  • 批准号：
    03J00550
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.34万
  • 财政年份：
    2003
  • 负责人：
    佐藤 昇
  • 依托单位：
    Nagoya University
海外基金