酸に安定な保護リン酸化アミノ酸誘導体の調製とリン酸化ペプチド合成への応用

酸稳定的受保护磷酸化氨基酸衍生物的制备及其在磷酸化肽合成中的应用

• 批准号: 05680503
• 负责人: 若宮 建昭
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05680503/
• 关键词: リン酸化タンパク質; リン酸化ペプチド; 固相合成; 4-ニトロベンジル基; シクロヘキシル基; 熱ショックタンパク質; EGF受容体タンパク質; タウプロテインキナーゼI

タンパク質中のチロシン、セリン、スレオニンなどの水酸基がリン酸化を受けることにより、そのタンパク質が活性化されたり、逆に活性が抑えられたりすることは以前から知られていたが、近年このようなタンパク質リン酸化の生化学的な意義をより詳細に解明するために、リン酸化を受けたアミノ酸残基を含むペプチドフラグメントの合成が強く望まれるようになった。われわれはペプチド合成に不慣れな生化学者でも希望するリン酸化ペプチドを合成できるように、固相法によるリン酸化ペプチド合成の一般的な方法の開発を目指した。方法としては、酸性条件でのアミノ保護基の除去を基本とするBocストラテジーが最も適当と考えられる。この方針に沿って、アミノ保護基の除去に用いるトリフルオロ酢酸に安定なリン酸保護基として、4-ニトロベンジル基あるいはシクロヘキシル基を有するホスホアミノ酸誘導体を用いた固相合成法を確立した。続いて、ベンジル基をリン酸保護基として用いれば、より温和な条件で最後の脱保護を行なうことができることも分かった。実際に、本合成法を用いて熱ショック蛋白質、EGF受容体蛋白質、タウプロテインキナーゼIなど、種々の天然リン酸化蛋白質関連リン酸化ペプチド約10種の合成に成功した。これまで、このように天然リン酸化ペプチドが容易に合成された例はなく、本研究の成果はリン酸化蛋白質の機能解明に多大の貢献をするものと期待されている。

タ ン パ ク mass in の チ ロ シ ン, セ リ ン, ス レ オ ニ ン な ど の water acid radical が リ ン acidification を by け る こ と に よ り, そ の タ ン パ ク qualitative が activeness さ れ た り, inverse に activity が え suppression ら れ た り す る こ と は before か ら know ら れ て い た が, recent こ の よ う な タ ン パ ク qualitative リ ン acidification の な significance of biochemical を よ り detailed に interpret す る た め に, リ ン acidification を by け た ア ミ ノ acid residues を む ペ プ チ ド フ ラ グ メ ン ト の looking strong synthetic が く ま れ る よ う に な っ た. わ れ わ れ は ペ プ チ ド synthetic に wonted れ な biochemical scholars で も hope す る リ ン acidification ペ プ チ ド を synthetic で き る よ う に, solid phase method に よ る リ ン acidification ペ プ チ ド synthesis の general な の open 発 を refers し た. Methods と し て は, acidic conditions で の ア ミ ノ protection base の remove を basic と す る bok ス ト ラ テ ジ ー が も most appropriate と exam え ら れ る. こ の policy に along っ て, ア ミ ノ with base の remove に い る ト リ フ ル オ ロ boggy acid に settle な リ ン acid protection base と し て, 4 - ニ ト ロ ベ ン ジ ル base あ る い は シ ク ロ ヘ キ シ ル を has an す る ホ ス ホ ア ミ ノ acid induced body を with い た solid consistency diagnosis を establish し た. 続 い て, ベ ン ジ ル base を リ ン acid protection base と し て in い れ ば, よ り benign conditions な で の protection を off line な last う こ と が で き る こ と も points か っ た. Be interstate に, this synthesis を い て hot シ ョ ッ ク protein, protein, EGF, let body タ ウ プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ I な ど, kind of 々 の natural リ ン acidic protein masato even リ ン acidification ペ プ チ ド about 10 kinds of synthetic に の successful し た. こ れ ま で, こ の よ う に natural リ ン acidification ペ プ チ ド が easy に synthetic さ れ た example は な く, this study の は リ ン acidification function of protein の interpret how に の contribution を す る も の と expect さ れ て い る.

项目成果

稲垣昌樹: "抗体によるリン酸化の検出法" 細胞工学. 12. 909-917 (1993)

稻垣正树：“使用抗体的磷酸化检测方法”《细胞工程》12. 909-917 (1993)。

若宮建昭: "Solid-phase synthesis of phosphopeptides related to small heat shock protein,HSP27" Amino Acids. 5. 127-127 (1993)

Takeaki Wakamiya：“与小热休克蛋白 HSP27 相关的磷酸肽的固相合成”氨基酸。 5. 127-127 (1993)

若宮建昭: "An efficient procedure for synthesis of phosphopeptides through the benzyl phosphate-protection by the Boc mode solid-phase" Chemistry Letters. 1401-1404 (1993)

Takeaki Wakamiya：“通过 Boc 模式固相磷酸苄基保护合成磷酸肽的有效方法”《化学快报》1401-1404 (1993)。

若宮建昭: "Synthetic study of phosphopeptides by solid-phase method" Peptide Chemistry 1993. 17-20 (1994)

Takeaki Wakamiya：“固相法合成磷酸肽的研究” Peptide Chemistry 1993. 17-20 (1994)