B細胞初期分化増殖におけるC-Fosがん遺伝子の機能解析

C-Fos癌基因在B细胞早期分化和增殖中的功能分析

• 批准号: 07670363
• 负责人: 徳久 剛史
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670363/
• 关键词: 幼若B細胞; c-fos; アポトーシス; 細胞周期; TUNEL法

本研究は、過剰のc-FosによるB細胞初期分化抑制とアポトーシス誘導の機序を明らかにすることを目的として誘導型c-fos遺伝子をもつMx-c-fosマウス由来の胎仔肝細胞をPA6ストローマ細胞とIL-7を用いたInvitroの系で培養してB細胞を分化させる。B細胞のいろいろな分化段階(A-Eステージ)に発現誘導剤を加えて外因性c-Fosの発現を誘導する。その時に見られる幼若B細胞でのアポトーシス誘導をTUNEL法で解析した。その結果、一部の幼若B細胞がTUNEL反応を示した。このアポトーシスに陥った幼若B細胞の分化段階を、幼若B細胞の各分化段階に表現される細胞表面抗原に対する蛍光モノクロナール抗体を用いてFACSにより解析したところ、このB細胞はCD43陽性のpro-B細胞であった。そこでつぎに幼若B細胞の増殖過程におけるc-Fosの抑制効果を細胞周期のレベルで検討した。すなわち、c-Fosの過剰発現を誘導することにより増殖の停止した幼若B細胞の細胞周期をFACSにより解析した。その結果、c-fosの発現誘導から48時間後にはG2/M期の細胞数が増加したことから、この期での細胞周期のブロックが明らかになった。さらに、c-Fosの標的遺伝子を解析する目的で幼若B細胞を分化させた後に、c-Fosの過剰発現を誘導することにより増殖の停止した幼若B細胞中のアポトーシスを誘導するFasやBax、細胞死を阻害するBcl-2やBcl-Xの発現を解析した。しかし、これらの遺伝子の発現の異常は見られなかった。ところがIg遺伝子の遺伝子組み換えを活性化するRag-1やRag-2遺伝子の発現が抑制されていたことから、pro-B細胞はその細胞内でのIg遺伝子の組み換えが異常となることにより死滅することが示唆された。

は, turning this study の c - Fos に よ る early B cell differentiation inhibiting と ア ポ ト ー シ ス induced の machine sequence を Ming ら か に す る こ と を purpose と し て induction type c - traces of Fos 伝 son を も つ Mx - c - Fos マ ウ ス origin の tire tsai hepatocellular を PA6 ス ト ロ ー マ cells と IL - を "7" い た Invitro の で foster し て B Cells を differentiate させる. B cells の い ろ い ろ Duan Jie な differentiation (A - E ス テ ー ジ) に 発 now induced tonic を え て external c - Fos の 発 now を induced す る. そ の に see ら れ る young if B cells で の ア ポ ト ー シ ス induced を TUNEL method で し た. Youdaoplaceholder0 そ results, a <s:1> juvenile B cell がTUNEL antithesis 応を shows た た. こ の ア ポ ト ー シ ス に 陥 っ た young if B cells の Duan Jie を, young if B cells の each differentiation Duan Jie に performance さ れ る cell surface antigen に す seaborne る 蛍 light モ ノ ク ロ ナ ー を ル antibody with い て both FACS に よ り parsing し た と こ ろ, こ の B cells は CD43 positive の pro - B cells で あ っ た. Youdaoplaceholder0 レベ で で ぎに ぎに ぎに in the process of B cell <s:1> proliferation における the inhibitory effect of c-Fos を on the cell cycle を レベ で検 で検 on the た of the た cell cycle. す な わ ち, c Fos の before turning 発 now を induced す る こ と に よ り raised colonization の stop し た young if B の を cell cycle both FACS に よ り parsing し た. そ の results, c - fos の 発 now induced か ら after 48 time に は G2 / M phase の cell number が raised plus し た こ と か ら, こ の period で の cell cycle の ブ ロ ッ ク が Ming ら か に な っ た. さ ら に, c Fos の mark heritage 伝 son を parsing す る purpose で young if B cells を さ せ た に, c - Fos の before turning 発 now を induced す る こ と に よ り raised colonization の stop し た young if B cells の ア ポ ト ー シ ス を induced す る Fas や Bax, cells die を resistance against す る Bcl - 2 や Bcl - X の 発 now を parsing し た. An abnormal <s:1> is found in られな った った. と こ ろ が Ig posthumous son 伝 の heritage 伝 subgroups み in え を activeness す る Rag - 1 や Rag - 2 heritage 伝 son の 発 now が inhibit さ れ て い た こ と か ら, pro - B cell は そ の intracellular で の Ig heritage 伝 son み の group in え が abnormal と な る こ と に よ り die out す る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

Imoto,S: "A regulatory role of c-Fos in the development of precursor of precursor B lymphocytes mediated by interleukin-7." Cell. Immunol.(1996)

Imoto,S：“c-Fos 在 IL-7 介导的前体 B 淋巴细胞前体发育中的调节作用。”

Hu Lina: "P53 controls proliferation of early B lineage cells by a P21(WAF1/CP1)-independent pathway." Biochem. Biophys. Res. Commun.206. 948-954 (1995)

Hu Lina：“P53 通过 P21（WAF1/CP1）独立途径控制早期 B 谱系细胞的增殖。”

Yamamoto,H: "Two forms of Hox 11,a T cell leukemia Oncogene,are expressed in fetal spleen but not in primary lymphocytes" Mol. Immunol.(1996)

Yamamoto,H：“Hox 11（一种 T 细胞白血病癌基因）的两种形式在胎儿脾脏中表达，但在原代淋巴细胞中不表达”Mol。

Fukuda,T: "The murine BCL6 gene is induced in activated lymphocytes as an immediate early gene." Oncogene.11. 1657-1663 (1995)

Fukuda,T：“小鼠 BCL6 基因作为立即早期基因在活化的淋巴细胞中被诱导。”

Phucha-reon,J: "Deregulated c-Fos/AP-1 modulates expression of the cyclin and the cdk gene in splenic B cells stimulated with lipopolysaccharide." Cancer letters.92. 203-208 (1995)

Phucha-reon,J：“失调的 c-Fos/AP-1 可调节脂多糖刺激的脾 B 细胞中细胞周期蛋白和 cdk 基因的表达。”