骨髄ストローマ細胞膜表面分子による造血調節の分子機構に関する研究

骨髓基质细胞膜表面分子调控造血的分子机制研究

• 批准号: 06671093
• 负责人: 金倉 譲
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671093/
• 关键词: C-kit; Stem cell factor; チロシンキナーゼ; 活性化変異; 造血幹細胞; フィブロネクチン; インテグリン; アポトーシス

造血幹細胞のストローマ細胞依存性増殖には、c-iktレセプターチロシンキナーゼ(KIT)とstem cell factor(SCF)の相互作用が重要な役割を担っている。我々は、ヒト、ラット、マウス由来の3種の腫瘍性マスト細胞株(HMC-1、RBL-2H3、P-815)ではc-kit遺伝子に活性化点突然変異が存在し、KITが恒常的に活性化されていることを明らかにした(HMC-1のc-kit活性化点突然変異は、Val^<560>→Gly(jaxtamembrane領域)とAsp^<816>→Val(キナーゼ領域);RBL-2H3ではAsp^<817>→Tyr;P-815ではAsp^<814>→Tyr_0尚、ヒトG560とV816はマウスG559とV814、ラットY817はマウスY814に対応する)。これらのマウス変異c-kit遺伝子(c-kit^<G550>とc-kit^<V814>)をマウスIL-3依存性細胞株(Ba/F3とFDC-P1細胞)へ遺伝子導入すると、これらの細胞株はIL-3非依存性細胞を示しヌードマウスに腫瘍を形成した。これらの知見しc-kitの恒常的活性化が造血幹細胞の造血因子非依存性増殖と腫瘍化に関与している可能性を示唆している。一方、細胞外マトリックス分子(フィブロネクチンなど)の造血調節機構についても検討した。GM-CSFやSCF依存性に増殖するM07E細胞をフィブロネクチンで処理すると、M07E細胞の造血因子依存性増殖が抑制された。フィブロネクチンはこれらの造血因子の受容体への結合を阻害することなく、インテグリンVLA5を介してM07E細胞のアポトーシスを誘導し細胞増殖を抑制した。また、各種白血病細胞株においてもVLA4^+VLA5^+細胞株ではアポトーシスや増殖抑制が認められたのに対し、VLA4^+VLA5^-細胞株では上記作用は認められず軽度の増殖刺激作用が認められた。これらの結果は、生体内に広範に存在するフィブロネクチンがVLA5を介して造血幹(前駆)細胞の増殖を負に制御している可能性を示唆している。

The interaction between stem cell growth factor(SCF) and stem cell growth factor(KIT) plays an important role in cell dependent proliferation of hematopoietic stem cells. 3 kinds of selective cell lines (HMC-1, RBL-2H3, P-815) C-kit gene activation point suddenly changed existence, KIT constant activation point (HMC-1 $&gt; c-kit activation point suddenly changed, Val^<560>→Gly(jaxtamembrane domain) Asp^<816>→Val RBL-2H3 &lt;$Asp^<817>→Tyr;P-815 Asp^<814>→Tyr_0 IL<G550><V814>-3-dependent cell lines (Ba/F3 and FDC-P1 cells) were transfected with different c-kit genes, and IL-3-independent cell lines were transfected with different c-kit genes. This knowledge of the constant activation of c-kits has been linked to the possibility of hematopoietic factor-independent proliferation and proliferation of hematopoietic stem cells. One side, extracellular molecules () and hematopoietic regulatory mechanisms GM-CSF and SCF-dependent proliferation of M07E cells were inhibited by treatment and hematopoietic factor-dependent proliferation of M07E cells. M07E cell proliferation is inhibited by the inhibition of the binding of hematopoietic factors to receptors mediated by VLA5. In addition, various leukemia cell lines were identified as VLA4^+VLA5^+ cell lines, and VLA4^+VLA5^-cell lines were also identified as having the effect of stimulating proliferation. These results indicate the possibility of negative control of hematopoietic stem cell proliferation by VLA5 in vivo.

项目成果

Sugahara,H.,et al.: "Induction of programmed cell death in human leukemia cell lines by fibronection via its interaction with very late antigen 5." J.Exp.Med.179. 1757-1766 (1994)

Sugahara, H., et al.：“通过纤维连接与非常晚期抗原 5 的相互作用，在人类白血病细胞系中诱导程序性细胞死亡。”

Tei,H.,et al.: "Characterization of cultured mast cells derived from W^S/W^S mast cell-deficient rats with a small delection at tyrosine kinase domain of c-kit." Blood. 83. 916-925 (1994)

Tei,H.,et al.：“来自 W^S/W^S 肥大细胞缺陷大鼠的培养肥大细胞的表征，c-kit 的酪氨酸激酶结构域存在小缺陷。”

Tsujimura,T.,et al.: "Ligand-independent activation of a c-kit receptor tyrosine kinase in a murine mastocytima cell line P-815 generated by a point mutation." Blood. 83. 2619-2626 (1994)

Tsujimura,T.,et al.：“点突变产生的小鼠肥大细胞系 P-815 中 c-kit 受体酪氨酸激酶的配体独立激活。”

Koshimizu,U.,et al.: "W^nmutation of c-kit receptor affects its post-translational processing and extracellilar experssion." Oncogene. 9. 157-162 (1994)

Koshimizu,U.,et al.：“c-kit 受体的 W^n 突变影响其翻译后加工和细胞外表达。”

Kanakura,Y.,et al.: "Activating mutations of the c-kit proto-oncogene in a human mast cell leukemia cell line." Leukemia. 8. S18-S22 (1994)

Kanakura,Y.,et al.：“激活人类肥大细胞白血病细胞系中 c-kit 原癌基因的突变。”