DNA複製制御におけるサイクリン依存性キナーゼ(cdk)の役割

细胞周期蛋白依赖性激酶 (CDK) 在调节 DNA 复制中的作用

• 批准号: 04256211
• 负责人: 安田 秀世
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04256211/
• 关键词: weel; cdc2キナーゼ; cdk2; サイクリン; フォスファターゼ; cdc25; 細胞周期

分裂酵母のweel変異を相補できるヒトweel遺伝子産物を大腸菌内で発現精製し、その酵素活性を検討した。その結果ヒトweelキナーゼはサイクリンB/cdc2キナーゼのTyr-15を燐酸化しその活性を阻害することを明らかにした。しかしこの酵素はThr-14を燐酸化できなかった。このことはThr-14を燐酸化しp34^<cdc2>キナーゼ活性を阻害する新たなキナーゼが存在することを示唆している。一方、3種のヒトcdc25フォスファターゼを大腸菌内で発現させ、これら酵素の活性も検討した。前記したp34^<cdc2>キナーゼの燐酸化による活性阻害はこのヒトcdc25フォスファーターゼにより回復する。3種存在するヒトcdc25フォスファターゼのうち少なくともcdc25BはこのTyr-15のみならずThr-14の燐酸基も脱燐酸化し、その活性を上昇させる。さらにcdk2の活性制御に関連してこの酸素の燐酸化部位を検討したところTyr-15とThr-160が確認された。このThr-160が燐酸化されるとSDS電気泳動で移動度が速くなり、これは蛋白質、p34^<cdc2>キナーゼを含め、一般に、燐酸化されると移動度が遅くなる現象とは異なる。サイクリンA結合cdk2はこのThr-160の燐酸化体であったことから、サイクリン結合にはこのThr-160の燐酸化が必要であると考えられた。サイクリンA/cdk2のTyr-15の燐酸はヒトCDC25フォスファターゼではサイクリンB/cdc2キナーゼのようには効率よく脱燐酸化されず、この原因がサイクリン蛋白質の違いによるのかどうか、Tyr-15の生理的意味を含めて興味深い。

Mitotic yeast, weel, weel, semen and enzyme activity were detected in the bacteria. The results showed that weel, acid, B/cdc2, acid, acid, bioactivity, toxicity, toxicity and toxicity were not detected. The enzyme, Thr-14, acidifying, acidifying, the enzyme, the acidified enzyme, the acidified enzyme. Acidify p34 ^ & lt;cdc2> Thr-14 acidify p34 ^ & lt;cdc2> active hindrance to prevent the presence of instigation. On the other hand, the activity of enzyme was detected in one side and three kinds of cdc25 bacteria. The previous one, p34 ^ & lt;cdc2>, was used to acidify acid, to prevent active damage, to induce cdc25 damage, and to return to normal. There are three kinds of acid groups that exist in different cdc25 compounds, such as deacidification, acid removal and acidification of Thr-14 acid groups, and chemical reaction on the active phase. The activity of cdk2 is to make sure that the acidified part is acidified, and the acidified part is Tyr-15. Thr-160. The mobility of Thr-160 electrophoretic electrophoresis is similar to that of protein, protein, p34 ^ & lt;cdc2>, and so on. It is necessary to study the acidizing process of the acidified body with the combination of cdk2 and THR-160. the results show that it is necessary to acidify the acid. CDC25

项目成果

M.Kitagawa: "Cdc2-like knase is assocated with the retino-blastoma protein" Oncogene. 7. 1067-1074 (1992)

M.Kitakawa：“Cdc2 样激酶与视网膜母细胞瘤蛋白”Oncogene 相关。

M.Kusubata: "p13^<suc1> supprresses the catalytic function of p34^<cdc2> kinase for intermediate filament proteins." J.Biol.Chem.267. 20937-20942 (1992)

M.Kusubata：“p13^<suc1> 抑制 p34^<cdc2> 激酶对中间丝蛋白的催化功能。”

H.Yasuda: "Cyclin dependent kinase 2(cdk2)in the murine cdc2 kinase ts muatant" Somatic Cell and Mol.Genet.18. 403-408 (1992)

H.Yasuda：“鼠 cdc2 激酶 ts 突变体中的细胞周期蛋白依赖性激酶 2(cdk2)”体细胞和 Mol.Genet.18。

R.Honda: "The cell cycle regulator,human p50^<wee1> is a tyrosine kinase and not a serine/tyrosine kinase." Biochem.Biophys.Res.Commun.186. 1333-1338 (1992)

R.Honda：“细胞周期调节剂，人类 p50^<wee1> 是一种酪氨酸激酶，而不是丝氨酸/酪氨酸激酶。”

M.Yamashita: "M-phase specific histone H1 kinase from fish oocytes;its purification,oomponents and biochemical properties." Eurp.J.Biochem.205. 537-543 (1992)

M.Yamashita：“来自鱼卵母细胞的 M 期特异性组蛋白 H1 激酶；其纯化、成分和生化特性。”