カルシウム依存的な神経細胞生存維持に関わる遺伝子群の検索とその発現制御系の解析

寻找参与维持钙依赖性神经元存活的基因组并分析其表达控制系统

• 批准号: 09280222
• 负责人: 津田 正明
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09280222/
• 关键词: アポトーシス; カルシウム; ニューロン; BDNF; セクレトグラニンII; レドックス

本年度は、マウス小脳顆粒細胞ニューロンの初代培養系を用いて、カルシウム依存的な細胞死抑制について遺伝子発現、及び、細胞内酸化還元との関連で検討を加えた。1.神経細胞活性化因子の検索: Differential display法によって、電位依存性カルシウムチャネル(VDCC)からのCa^<2+>流入で発現変化を示す遺伝子群(カルシウム応答遺伝子群)のスクリーニングを行った。その結果、セクレトグラニン-II(Sg-II)遺伝子が単離された。現在、そのプロセッシング産物であるセクレトニューリンを合成し、細胞死抑制に与える影響を検討中である。2.カルシウム応答遺伝子群の発現制御系の解析: 脳由来神経栄養因子(BDNF)やSg-II遺伝子はカルシウムシグナルでup-regulationを,NT-3遺伝子はdown-regulationを受ける。この発現制御には、最適な細胞内Ca^<2+>濃度が必要であることが明らかとなった。また、BDNF,Sg-II遺伝子発現はVDCCからのCa^<2+>流入に依存していたが、c-fos遺伝子の発現にはNMDAレセプターからのCa^<2+>流入も効果的であった。3.細胞内酸化還元と細胞死: 小脳顆粒細胞は非脱分極状態にするとアポトーシスを起こす。この際、細胞内グルタチオン濃度の減少とともに、鉄-硫黄酵素であるアコニターゼ活性及びミトコンドリア代謝活性の低下が認められた。しかし、再脱分極による細胞死抑制時にはこれら減少は抑制された。現在、この細胞死抑制に関わるカルシウムシグナルと細胞死シグナルとの関係について検討中である。

This year, we will continue to investigate the relationship between cell death inhibition and intracellular acidification in primary culture lines of granular cells. 1. The study of activation factors in neurons: Differential display method, potential-dependent cell cycle (VDCC), Ca^<2+> influx, activation, and activation. The results of this study are as follows: 1. The results of this study are as follows: 1. Now, we are discussing the effects of cell death inhibition on the synthesis of cell death products. 2. The analysis of the mechanism of the development of NT-3 gene: NT-3 gene is influenced by up-regulation of NT-3 gene and BDNF gene. The optimal intracellular Ca^<2+> concentration is necessary for the development of the disease. The occurrence of BDNF,Sg-II gene is dependent on Ca^<2+> influx from VDCC, and the occurrence of c-fos gene is dependent on Ca^<2+> influx from NMDA. 3. Intracellular acidification and cell death: small granular cells are not depolarized. At this time, the decrease of intracellular concentration of iron and sulfur enzymes and the decrease of metabolic activity of iron and sulfur enzymes are recognized. When cell death is inhibited, it is reduced and inhibited. Now, this cell death inhibition is related to cell death inhibition.

项目成果

Ogawa,W.: "Isolation and characterization of an Esherichia coli mutant kacking the mojor serine transporter and cloning of a serine transporter" J.Biochem.122. 1241-1246 (1997)

小川，W.：“攻击主要丝氨酸转运蛋白的大肠杆菌突变体的分离和表征以及丝氨酸转运蛋白的克隆”J.Biochem.122。

Inaba,K.: "Na+(Li+)/H+ antiporter in Pseudomonas Aeruginosa and effect of Li+ on cell growth" Biol.Pharm.Bull.20. 621-624 (1997)

Inaba,K.：“铜绿假单胞菌中的 Na (Li )/H 逆向转运蛋白以及 Li 对细胞生长的影响”Biol.Pharm.Bull.20。

Imaoka,T.: "In vivo gene transfer into the adult mammalian central nervous system by continuous injection of plasmid DNA-cationic liposome complex" Brain Res.780. 119-128 (1998)

Imaoka,T.：“通过连续注射质粒 DNA-阳离子脂质体复合物将基因转移到成年哺乳动物中枢神经系统中”Brain Res.780。

津田正明: "神経活動と遺伝子発現" 蛋白質核酸酵素. 42. 102-112 (1997)

Masaaki Tsuda：“神经活动和基因表达”蛋白质核酸酶。42. 102-112 (1997)

Ichikawa,D.: "Attenuation of cell death mediated by membrane depolarization different from that by exogenous BDNF in cultured mouse cerebellar qranule cells" Mol.Brain Res.(印刷中). (1998)

Ichikawa, D.：“培养的小鼠小脑 Qranule 细胞中膜去极化介导的细胞死亡减弱与外源 BDNF 介导的减弱”（Mol.Brain Res）（1998 年出版）。