课题基金 / 基金详情

ヒト第21染色体の物理的地図作成による家族性アルツハイマ-病遺伝子の追究

ヒト第21染色体の物理的地図作成による家族性アルツハイマ-病遺伝子の追究
通过人类 21 号染色体的物理图谱追踪家族性阿尔茨海默病基因
批准号：
01658513
负责人：
清水 信義
金额：
$1.6万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1989
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1989 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01658513/
关键词：
常染色体優性遺伝家族性アルツハイマ-病遺伝子(AD1)RFLPマ-カ-連鎖解析第21染色体セルソ-タ-パルスフィ-ルド電気泳動PCR法

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
家族性アルツハイマ-病は常染色体優性遺伝形式を示し、その遺伝子(AD1)はRFLPマ-カ-との連鎖解析により第21染色体のq11.2-q21にマップされているが、実体についてはまだ全く不明である。本研究では、現在までにAD1との最も密接な連鎖の報告されているRFLPマ-カ-D21S16周辺の物理的地図を作成し、AD1遺伝子を同定・クロ-ニングし、その機能を解析することを目的としている。そのためにセルソ-タ-を用いて純化したヒト第21染色体DNAをNotI等の低頻度切断制限酵素で処理し、生じた巨大DNA断片をパルスフィ-ルド電気泳動で分離後、目的とする巨大DNA断片に特異的なクロ-ンをPCR法を用いて増幅し、クロ-ニングする方法(ショットガンPCR)を考案し、その実用化を試みた。まずAluPCRを用いてクロ-ニングを行なったが単一コピ-配列のものはほとんど得られなかったので、現在は巨大DNA断片をさらに制限酵素を用いて小断片化し、合成アダプタ-を連結してからPCR法で増幅する方法を試み、得られたクロ-ンの解析を行なっている。この様な方法で得られる多数のクロ-ンを用いれば、AD1遺伝子を含む巨大DNA断片領域をカバ-するクロ-ンのゲノムライブラリ-からのスクリ-ニングを従来のウォ-キング法やジャンピング法に比べて迅速に行なうことができる。今後は、D21S16領域のショットガンPCRで得られたクロ-ンをプロ-ブに用いて周辺の物理的地図を作成すると共にこの領域をカバ-するクロ-ンを第21染色体特異的DNAライブラリ-からスクリ-ニングし、その中から特にHTFアイランドを指標にしてこの領域の遺伝子を同定し、脳における発現などからAD1の候補遺伝子を検索する予定である。
英文摘要
家族性アルツハイマ-病は常染色体優性遺伝形式を示し、その遺伝子(AD1)はRFLPマ-カ-との連鎖解析により第21染色体のq11.2-q21にマップされているが、実体についてはまだ全く不明である。本研究では、現在までにAD1との最も密接な連鎖の報告されているRFLPマ-カ-D21S16周辺の物理的地図を作成し、AD1遺伝子を同定・クロ-ニングし、その機能を解析することを目的としている。そのためにセルソ-タ-を用いて純化したヒト第21染色体DNAをNotI等の低頻度切断制限酵素で処理し、生じた巨大DNA断片をパルスフィ-ルド電気泳動で分離後、目的とする巨大DNA断片に特異的なクロ-ンをPCR法を用いて増幅し、クロ-ニングする方法(ショットガンPCR)を考案し、その実用化を試みた。まずAluPCRを用いてクロ-ニングを行なったが単一コピ-配列のものはほとんど得られなかったので、現在は巨大DNA断片をさらに制限酵素を用いて小断片化し、合成アダプタ-を連結してからPCR法で増幅する方法を試み、得られたクロ-ンの解析を行なっている。この様な方法で得られる多数のクロ-ンを用いれば、AD1遺伝子を含む巨大DNA断片領域をカバ-するクロ-ンのゲノムライブラリ-からのスクリ-ニングを従来のウォ-キング法やジャンピング法に比べて迅速に行なうことができる。今後は、D21S16領域のショットガンPCRで得られたクロ-ンをプロ-ブに用いて周辺の物理的地図を作成すると共にこの領域をカバ-するクロ-ンを第21染色体特異的DNAライブラリ-からスクリ-ニングし、その中から特にHTFアイランドを指標にしてこの領域の遺伝子を同定し、脳における発現などからAD1の候補遺伝子を検索する予定である。
期刊论文(2)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Minoshima,S.: "Isolation of Giant Fragments from Flow-Sorted Human Chromosomes." Cytometry. 11. (1990)
Minoshima,S.：“从流式分选的人类染色体中分离巨大片段。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
ヒトゲノム解析から発見した注目すべき8個の新規遺伝子の機能解析と医療への応用
  • 批准号：
    18018037
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $5.95万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    清水 信義
  • 依托单位：
    Keio University
ヒトゲノム解読から発見した注目すべき8個の新規遺伝子の機能解析と医療への応用
  • 批准号：
    17019061
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $3.84万
  • 财政年份：
    2005
  • 负责人：
    清水 信義
  • 依托单位：
    Keio University
モノクローナル抗体や一本鎖人工抗体を用いた遺伝子導入法による癌の遺伝子治療
  • 批准号：
    07274261
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $1.92万
  • 财政年份：
    1995
  • 负责人：
    清水 信義
  • 依托单位：
    Keio University
脳神経特異的に発現される遺伝子の探索と機能解析
  • 批准号：
    07264238
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $1.02万
  • 财政年份：
    1995
  • 负责人：
    清水 信義
  • 依托单位：
    Keio University