课题基金 / 基金详情

極限酵素触媒の人工構築

極限酵素触媒の人工構築
极酶催化剂的人工构建
批准号：
07242231
负责人：
中村 聡
金额：
$1.41万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1995 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07242231/
关键词：
極限微生物アルカリキシラナーゼ遺伝子クローニングタンパク質工学

项目摘要

项目成果

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極限微生物由来の酵素がどのようにして極限環境に適応しているかについては,ほとんど明らかにされていない.本研究では、アルカリ性条件下で高活性を示す好きアルカリ性バシラス属細菌41M-1株に由来するアルカリキシラナーゼを例にとり,その好アルカリ性機構の分子レベルでの解明を目的として,遺伝子のクローニングとタンパク質工学検討を行った.1.PCRによるアルカリキシラナーゼ遺伝子の増幅既に明らかにしている41M-1株由来アルカリキシラナーゼの部分アミノ酸配列に基づいて,PCR用プライマーDNAを化学合成した.そして41M-1株染色体DNAを鋳型とするPCRを行い,本菌アルカリキシラナーゼ遺伝子の一部の増幅に成功した.2.41M-1株部分染色体ライブラリーの作成41M-1株染色体DNAを種々の制限酵素で切断した後,先に得られたPCR産物をプローブとするDNA断片を調製ゲル電気泳動法にて精製した後,プラスミドベクターに連結,そして大腸菌に形質転換し,部分染色体ライブラリーを作成した.3.アルカリキシラナーゼ遺伝子の染色体からのクローニングキシランを含む平板培地上でのキシラナーゼ活性を指標とする方法により,本菌アルカリキシラナーゼ遺伝子を含むクローンを選抜した.得られたアルカリキシラナーゼ遺伝子についてDNA塩基配列の決定を行い,本酵素の一次構造を明らかにした.4.アルカリキシラナーゼのタンパク質工学検討本酵素にアミノ酸置換を導入した変異型酵素を精製し,野性型酵素との活性比較を行った.その結果,本酵素の触媒活性発現に重要な役割を担うアミノ酸残基を特性することができた.
期刊论文(4)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Satoshi Nakamura: "Purification and characterization of a thermophilic alkaline xylanase from thermoalkaliphilic Bacillus sp.strain TAR-1" J.Mol.Catal.B:Enzymatic. 1. 7-15 (1995)
Satoshi Nakamura：“来自嗜热芽孢杆菌菌株 TAR-1 的嗜热碱性木聚糖酶的纯化和表征”J.Mol.Catal.B：酶学。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Satoshi Nakamura: "Structure-function relationship of the xylanase from alkaliphilic Bacillus SP. strain 41M-1" Nucleic Acids Symp. Ser.34. 98-100 (1995)
Satoshi Nakamura：“嗜碱性芽孢杆菌 SP. 菌株 41M-1 木聚糖酶的结构-功能关系”核酸症状。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
離散化された幾何学的フローの研究
  • 批准号：
    24K16917
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 资助金额：
    $3.08万
  • 财政年份：
    2024
  • 负责人：
    中村 聡
  • 依托单位：
    Tokyo Institute of Technology
ポリマーブラシによるコロイドナノ粒子の形状選択的分離法の開発
  • 批准号：
    24K17574
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 资助金额：
    $2.16万
  • 财政年份：
    2024
  • 负责人：
    中村 聡
  • 依托单位：
    Hokkaido University
膵・胆道癌の早期診断を目指したバイオマーカーの検索と臨床応用
  • 批准号：
    22K20826
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
  • 资助金额：
    $1.83万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    中村 聡
  • 依托单位：
    Kyushu University
標準的ケーラー計量の場の量子化を用いたファノ多様体の幾何構造の研究
海外基金