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極限微生物に由来する多糖分解酵素の構造-活性相関と糖鎖認識機構

極限微生物に由来する多糖分解酵素の構造-活性相関と糖鎖認識機構
极端微生物多糖降解酶的构效关系及碳水化合物识别机制
批准号：
10134212
负责人：
中村 聡
金额：
$1.09万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1998 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10134212/
关键词：
キシラナーゼタンパク質工学糖鎖認識触媒ドメインキシラン結合ドメイン

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项目成果

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好アルカリ性バシラス属細菌41M-1株が生産するキシラナーゼは,反応の至適をアルカリ性領域(pH9.0)に有する「好アルカリ性」の酵素である.本酵素の触媒ドメインはN末端側に位置しており,そのC末端側にはキシラン結合ドメインが連結している.本特定領域研究では,41M-1株キシラナーゼのアルカリ性条件における基質認識ならびに触媒反応機構を分子レベルで解明することを目的とする.平成10年度は,好アルカリ性に関与するアミノ酸残基の特定,ならびにキシラン結合ドメインのファージディスプレイを行った.41M-1株キシラナーゼの好アルカリ性に関与するアミノ酸残基を特定する目的で,その触媒ドメインにアミノ酸置換を施した変異型酵素を種々調製し,野生型酵素と比較した.その結果,Asp20をAsnに,あるいはTrp144をPheに置換した変異型酵素については,反応至適pHの中性域(pH6.0)へのシフトが観察された.すなわち,これら2つのアミノ酸残基の好アルカリ性への関与,ならびにアミノ酸置換による反応至適pHの人工制御の可能性が示唆された.41Nl-1株キシラナーゼのキシラン結合ドメインをコードするDNA断片をファージディスプレイ用ベクターに連結し,ファージディスプレイを試みた.抗41M-1株キシラナーゼ抗体を用いることにより,キシラン結合ドメインがファージディスプレイされたことが確認された.しかしながら,ファージ表面上にディスプレイされたキシラン結合ドメインの不溶性キシランへの結合能は低く,ディスプレイ効率が低いこと,あるいはディスプレイされたキシラン結合ドメインの高次構造が不適切であるなどの理由が考えられた.
期刊论文(0)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
中村 聡: "極限条件下で機能する多糖分解酵素" 化学と生物. 36. 632-638 (1998)
Satoshi Nakamura：“在极端条件下发挥作用的多糖降解酶”化学与生物学 36. 632-638 (1998)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Ryousuke Mizui: "Amino Acid Substitutions at the Subunit Interface Cause Thermal Stabilization in IPMDH of Bacillus coagulans" Nucleic Acids Symposium Series. 39. 203-204 (1998)
Ryousuke Mizui：“亚基界面的氨基酸取代导致凝结芽孢杆菌 IPMDH 的热稳定性”核酸研讨会系列。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Hidenori Tamanoi: "Role of Acidic Amino Acids in the Alkaline pH Optimum of Xylanase J from Alkaliphilic Bacillus sp.Strain 41M-1" Nucleic Acids Symposium Series. 39. 205-206 (1998)
Hidenori Tamanoi：“酸性氨基酸在嗜碱性芽孢杆菌属 sp.Strain 41M-1 木聚糖酶 J 的碱性 pH 最佳值中的作用”核酸研讨会系列。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Akiko Sugio: "Separation and Characterization of Functional Domains of Xylanase J from Alkaliphilic Bacillus sp.Strain 41M-1" Genetics,Biochemistry and Ecology of Cellulose Degradation. (印刷中). (1999)
Akiko Sugio：“嗜碱性芽孢杆菌菌株 41M-1 中木聚糖酶 J 功能域的分离和表征”《纤维素降解的遗传学、生物化学和生态学》（出版中）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 6 条
    離散化された幾何学的フローの研究
    • 批准号：
      24K16917
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
    • 资助金额：
      $3.08万
    • 财政年份：
      2024
    • 负责人：
      中村 聡
    • 依托单位：
      Tokyo Institute of Technology
    ポリマーブラシによるコロイドナノ粒子の形状選択的分離法の開発
    • 批准号：
      24K17574
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
    • 资助金额：
      $2.16万
    • 财政年份：
      2024
    • 负责人：
      中村 聡
    • 依托单位：
      Hokkaido University
    膵・胆道癌の早期診断を目指したバイオマーカーの検索と臨床応用
    • 批准号：
      22K20826
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
    • 资助金额：
      $1.83万
    • 财政年份：
      2022
    • 负责人：
      中村 聡
    • 依托单位：
      Kyushu University
    標準的ケーラー計量の場の量子化を用いたファノ多様体の幾何構造の研究
    海外基金