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蛋白リン酸化酵素の核内輸送機構と新しい核膜孔複合体の探求

蛋白リン酸化酵素の核内輸送機構と新しい核膜孔複合体の探求
探索蛋白激酶的核转运机制和新型核孔复合物
批准号：
07282208
负责人：
萩原 正敏
金额：
$1.15万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1995 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07282208/
关键词：
カルモジュリンCaMキナーゼ核内局在

项目摘要

项目成果

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我々はカルシウム/カルモジュリン依存性蛋白リン酸化酵素(CaMキナーゼIV)の核内局在化機構を調べた。培養細胞COS7に遺伝子導入してCaMキナーゼIV特異的抗体を用いて、細胞内局在をしらべたところ、CaMキナーゼIIが細胞質に局在したのとは対照的に核への局在が認められた。しかしながら、200kDのCaMキナーゼIVとLacZの結合蛋白は細胞質に局在した。このことから、CaMキナーゼIVは拡散によって核へ移行していることが示唆された。一方、CaMキナーゼIV遺伝子の部分産物でありCaMキナーゼIVのカルボキシル末端169アミノ酸と相同性のあるカルスペルミンの細胞内局在を調べたところ、強い核内局在が認められた。このことは、CaMキナーゼIVのカルボキシル末端がCaMキナーゼIVの核内局在に関与していること示唆するが、カルボキシル末端の欠失変異体についても核内局在が認められた。そこで我々はCaMキナーゼIVのアミノ末端も核内局在に関与しているのではないかと仮設を立て、CaMキナーゼIIとCaMキナーゼIVそれぞれに関してAssociationドメインを欠失したミュータントを作成しCOS7に遺伝子導入してエピトープタッギング法によって細胞内局在を調べたところ、CaMキナーゼIIに関しては細胞内全体に局在したのに対して、CaMキナーゼIVに関してやはり核に局在する細胞がみられた。さらにCaMキナーゼIVのアミノ末端欠失変異体を作成し細胞内局在を調べたところ、アミノ末端から132番目のアミノ酸までを欠失させると核への局在は完全に消失した。これらの結果より、CaMキナーゼIVのカルボキシル末端はカルスペルミンの核内局在に必要であり、CaMキナーゼIVの核内局在にはアミノ末端も必要であると考えられる。
期刊论文(10)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Ohki,K.et al.: "Nitric Oxide induces c-fos gene expression via cyclic AMP respose element binding protein (CREB) phosphorylation in rat retinal pigment epithelium." Brain Research. 696. 140-144 (1995)
Ohki,K. 等人：“一氧化氮通过大鼠视网膜色素上皮细胞中的环 AMP 应答元件结合蛋白 (CREB) 磷酸化诱导 c-fos 基因表达。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Kano,T.et al.: "Cocaine-induced CREB phosphorylation and c-fos expression were suppressed in parkinsonism model mice." NeuroReport. 6. 2197-2200 (1995)
Kano,T.等人：“帕金森病模型小鼠中可卡因诱导的 CREB ​​磷酸化和 c-fos 表达受到抑制。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Yasunami,M,et al.: "Molecular cloning and characterization of a cDNA encoding a novel basic helix-loop-helix protein structurally related to Neuro/BHF1." Biochem Biophys Res Commun. (in press).
Yasunami,M,et al.：“编码与 Neuro/BHF1 结构相关的新型基本螺旋-环-螺旋蛋白的 cDNA 的分子克隆和表征。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Harada,H.et al.: "Phosphorylation of CREB in rat retinal cells after focal retinal injury." Ex.Eye.Res.(in press).
Harada, H.等人：“局灶性视网膜损伤后大鼠视网膜细胞中 CREB ​​的磷酸化。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 6 条
    Synthetic investigation of pathological phase separation of RNA-binding proteins
    • 批准号：
      21H05042
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
    • 资助金额：
      $121.14万
    • 财政年份：
      2021
    • 负责人：
      萩原 正敏
    • 依托单位：
      Kyoto University
    トランスクリプトームの人為的操作による遺伝病の治療
    • 批准号：
      15H02505
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
    • 资助金额：
      $12.65万
    • 财政年份：
      2015
    • 负责人：
      萩原 正敏
    • 依托单位：
      Kyoto University
    ヘルペスウイルスRNAの核外輸送制御機構の解明
    • 批准号：
      19041027
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $4.8万
    • 财政年份：
      2007
    • 负责人：
      萩原 正敏
    • 依托单位：
      Tokyo Medical and Dental University
    ケミカルジェネティクスによる生体機能の解明
    • 批准号：
      18631008
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
    • 资助金额：
      $2.18万
    • 财政年份：
      2006
    • 负责人：
      萩原 正敏
    • 依托单位：
      Tokyo Medical and Dental University
    海外基金