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極限酵素触媒の人工構築

極限酵素触媒の人工構築
极酶催化剂的人工构建
批准号：
08232234
负责人：
中村 聡
金额：
$1.41万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1996 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08232234/
关键词：
極限環境微生物アルカリ酵素キシラナーゼ遺伝子クローニングタンパク質工学

项目摘要

项目成果

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極限微生物に由来する酵素がどのようにして極限環境に適応しているかについては,ほとんど明らかにされていない.アルカリ性条件下において高活性を示す好アルカリ性バシラス属細菌41M-1株に由来するキシラナーゼを例にとり,その触媒機構やアルカリ性への適応機構を分子レベルで明らかにすることを目的として,遺伝子クローニングとタンパク質工学検討を行った.(1)キシラナーゼ遺伝子のクローニングと解析41M-1株染色体よりキシラナーゼ遺伝子をクローニングし,塩基配列決定を行った.本遺伝子には27アミノ酸のリーダー配列と327アミノ酸の成熟型酵素がコードされていた.他のキシラナーゼとのアミノ酸配列比較から,本酵素のN末端側2/3の領域は触媒ドメインと考えられた.その下流には,リンカー配列を介して,約100アミノ酸の機能未知領域がC末端側に伸びていた.(2)触媒活性に関与するアミノ酸残基の特定部位特異的変異により触媒ドメインにアミノ酸置換を導入した各種変異型酵素を調製し,野生型酵素との活性比較を行った.その結果,本酵素においては2つのGlu残基が触媒残基として機能していることが推察された.また,いくつかのTrpおよびTyr残基の活性への関与も示された.(3)C末端機能未知領域の解析部位特異的変異の手法を用い,本酵素のC末端側に存在するポリペプチド領域の欠失を行った.C末端欠失型酵素および野生型酵素の性質比較から,C末端領域は本酵素の触媒活性発現に必須ではなく,多糖への結合に関与していることが示唆された.
期刊论文(6)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
S.Nakamura et al.: "Characterization of the Additional C-terminal Domain of Xylanase J from Alkaliphilic Bacillus sp. Strain 41M-1" Nucleic Acids Symp.Ser.35. 221-222 (1996)
S.Nakamura 等人：“来自嗜碱性芽孢杆菌属菌株 41M-1 的木聚糖酶 J 的附加 C 末端结构域的表征”核酸 Symp.Ser.35。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
中村 聡: "微生物に由来する多糖分解酵素のコスメトロジーへの応用" コスメトロジー. 4. 109-117 (1996)
Satoshi Nakamura：“源自微生物的多糖降解酶在美容中的应用”美容学。4. 109-117 (1996)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
S.Nakamura et al.: "Cloning and Sequencing of the Gene Encoding the Cell Surface Glycoprotein of Haloarcula japonica Strain TR-1" Extremophiles. (印刷中). (1997)
S. Nakamura 等人：“Haloarcula japonica 菌株 TR-1 细胞表面糖蛋白的基因克隆和测序”（出版中）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
大倉一郎,北爪智哉,中村聡: "生物工学英語入門" 講談社サイエンティフィク, 142 (1996)
Ichiro Okura、Tomoya Kitazume、Satoshi Nakamura：《生物工程英语导论》讲谈社科学，142（1996）
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
離散化された幾何学的フローの研究
  • 批准号：
    24K16917
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 资助金额：
    $3.08万
  • 财政年份：
    2024
  • 负责人：
    中村 聡
  • 依托单位：
    Tokyo Institute of Technology
ポリマーブラシによるコロイドナノ粒子の形状選択的分離法の開発
  • 批准号：
    24K17574
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
  • 资助金额：
    $2.16万
  • 财政年份：
    2024
  • 负责人：
    中村 聡
  • 依托单位：
    Hokkaido University
膵・胆道癌の早期診断を目指したバイオマーカーの検索と臨床応用
  • 批准号：
    22K20826
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
  • 资助金额：
    $1.83万
  • 财政年份：
    2022
  • 负责人：
    中村 聡
  • 依托单位：
    Kyushu University
標準的ケーラー計量の場の量子化を用いたファノ多様体の幾何構造の研究