权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

葉緑体DNA結合タンパク質を介した葉緑体形成シグナル伝達の解析

叶绿体 DNA 结合蛋白介导的叶绿体形成信号转导分析

基本信息

批准号：
08262207
负责人：
佐藤直樹
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tokyo Gakugei University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

私たちは,葉緑体DNA結合タンパク質が,葉緑体形成の細胞核による制御の主要な情報伝達体となっているという立場から研究を進め,プラスチド包膜に存在するDNA結合タンパク質PENDを発見した。本年度の研究においては,このPENDタンパク質をコードするcDNAのクローニングを試み,成功した。一方では,エンドウのプラスチドから,陰イオン交換クロマトグラフィとDNA-ダイナビーズアフィニティー法により,PENDタンパク質を部分精製した。主な不純物は,70kDaのタンパク質だけであった。他方,PENDタンパク質の標的DNA配列をプローブとして,λgt11の発現ライブラリをスクリーニングし,3個のクローンPD1,PD2,PD3を得た。これらの全長cDNAの配列を決定し,それぞれを大腸菌で発現して,タンパク質を得た。この組換タンパク質を抗原として,抗体を得た。このうちで,抗PD2抗体が,上述の精製PENDタンパク質と反応したため,PD2がPENDタンパク質をコードしていると同定した。このほか,同定の根拠としては,標的DNA配列の共通性、組換全長PD2タンパク質と精製PENDタンパク質の電気泳動度の一致,他に抗PD2抗体と反応するタンパク質が検出されないことなどがある。PD2(632アミノ酸残基)は,N末端側から順に,bZIPタイプのDNA結合領域,37アミノ酸残基からなる6回繰り返し領域,2量体形成に関与するコイルドコイル領域,膜貫通領域から構成されていた。今後が,構造の詳しい解析とアンチセンスによる機能解析を目指す。

Private たちは, chloroplast DNA binding タンパク性が, chloroplast formation のcell nucleus によるcontrol の Main information 伝达体となっているという stance から research を advance め, プラスチド envelope に presence するDNA binding タンパクquid quality PEND を発见した. This year's research was carried out, and the PEND material was tested successfully. One side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side, one side -ダイナビーズアフィニティー法により,PENDタンパクqualityをpartially refinedした. The main impurity is 70kDa impurity. Other side, PEND DNA target DNA array をプローブとして, λgt11's appearanceライブラリをスクリーニングし, 3 のクローン PD1, PD2, PD3 are obtained. The alignment of the full-length cDNA is determined, the coliform bacteria are present, and the quality of the cDNA is obtained. The この group is replaced by the タンパクquality をantigen として, and the antibody is obtained. Anti-PD2 antibody, the above-mentioned purified PEND antibodyしたため,PD2がPENDタンパク性をコードしていると同定した.このほか, 同定の根拠としては, the commonality of target DNA arrangement, replacement of full-length PD2 タンパクquality and refined PENDタThe anti-PD2 antibody has the same electrophoretic mobility as the anti-PD2 antibody. PD2 (632 アミノ acid residue), N-terminal side からcisに, bZIP タイプのDNA binding domain, 37 アミノ acid residue The basic からなる6-turn back しし domain, the 2-dimensional body forms the に关 and the するコイルドコイル domain, and the membrane penetrates the domain から constitutes the されていた. From now on, detailed structure analysis and functional analysis will be carried out.