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mRNAに核外輸送系における熱ショック応答の分子機構

mRNA核输出系统热激反应的分子机制

基本信息

批准号：
06261231
负责人：
谷時雄
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

mRNAの核から細胞質への輸送は、真核生物における遺伝子発現の重要な一段階である。我々は、oligo dTをプローブに用いたin situ hybridization 解析により、分裂酵母Schizosaccharomyces pombeにおいて熱ショックストレスがmRNA核外輸送系に及ぼす影響を解析した。その結果、42℃での急激な熱ショックストレスを与えた細胞においては、細胞質のpoly(A)+RNAが減少すると同時に、大量のpoly(A)+RNAが核に蓄積することが明かとなった。このことは、mRNA核外輸送経路が急激な熱ショック処理により阻害されることを示唆している。熱ショック蛋白の発現を誘導する37℃での緩やかな熱処理を、42℃での熱ショック処理の前に行うと、mRNA核外輸送機構の阻害は見られなかった。熱ショックを与えた酵母においては、核小体領域が2〜3個の凝縮した構造体に変化することが観察された。興味深いことに、oligo dTプローブと核小体の蛋白であるフィブリラリンに対する抗体を用いて2重染色を行った結果、poly(A)+RNAは熱ショック処理細胞において、凝縮した核小体領域内に蓄積していることが示された。電子顕微鏡を用いた高解像度のin situ hybridization解析によっても、熱ショック処理細胞においては、核小体領域にpoly(A)+RNAが蓄積していることが証明されたこのことは、酵母の核小体がrRNA合成のみでなく、mRNAの核外輸送系にも関与している可能性を示唆している。今後、急激な熱ショックストレスからのmRNA核外輸送系の保護に関与するhsp遺伝子の同定を行う予定である。

The cytoplasmic transport of mRNA is an important step in eukaryotic gene development. Analysis of the effect of oligo dT on mRNA extracellular transport system in situ hybridization As a result, the acute heat shock at 42℃ caused a decrease in cytoplasmic poly(A)+RNA and a large accumulation of poly (A)+RNA in the nucleus. The mRNA extranuclear transport pathway is stimulated by heat and heat, and the pathway is inhibited by heat and heat. Heat treatment at 37℃ induced protein expression, heat treatment at 42℃ induced protein expression, and inhibition of mRNA extracellular transport mechanism. 2 to 3 condensed structures were observed in the yeast The results showed that poly(A)+RNA was accumulated in the nucleosomal domain of the treated cells. High resolution in situ hybridization analysis using electron microscopy demonstrated the possibility of poly(A)+RNA accumulation in nucleosomal regions of yeast and ribosomal rRNA synthesis and mRNA extranuclear transport systems. In the future, the relationship between the protection of mRNA extranuclear transport system and the synchronization of hsp gene will be determined.