レトロウイルスの膵β細胞特異的発現に基づくI型糖尿病発症の分子機構とその制御

基于逆转录病毒胰腺β细胞特异性表达的I型糖尿病发病分子机制及其调控

• 批准号: 08282222
• 负责人: 花房 俊昭
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08282222/
• 关键词: インスリン依存型糖尿病; レトロウイルス; クローニング; 膵臓; RT-PCR; gag遺伝子; エイズ; 転写活性

本研究は、インスリン依存型糖尿病(IDDM)の成因としてウイルスが関与しているか否かを明らかにするため、モデル動物NODマウスを用い、(1)膵β細胞に発現しているレトロウイルスのクローニング、および、(2)同ウイルスによる糖尿病発症機序の解明、を行った。まず、NODマウス脾より、mRNAおよびゲノムDNAを得た。タイプCレトロウイスルのうち既知のウイルスのgag領域の相同性の高い配列をプライマーとして用い、RT-PCR法によるホモロジークローニングを行った。その結果、NODマウスのみに発現し、これまで報告のないレトロウイルス配列を得た。さらに、NODマウスゲノムより、PCRクローニングにて本レトロウイルス(NODV)ゲノム全構造を明らかにした。NODVの全長は4.8kpbで、gag遺伝子領域は比較的保存されているものの、pol領域は短縮され、env領域は痕跡程度であった。この構造はマウスエイズウイルス(MAIDS)と非常に類似しており、replication defective virusと考えられた。NODマウスにおけるNODVmRNAの組織分布をみると、膵のみに発現していた。NODVのLTR領域は、ルシフェラーゼアッセイにより、膵内分泌細胞において転写活性を有していることが明らかになった。NODVmRNAのNODマウス膵における経時的発現をみると、膵島炎の開始する4週令において最も高発現で、6週、10週と発現が低下していた。以上、IDDMモデル動物NODマウスにおいて、膵に特異的に発現しているレトロウイルス(NODV)のクローニングに成功した。NODVの発現パターンより、本ウイルスがNODマウスの糖尿病発症に関与していることが示唆された。

This study explores the causes of dependence-dependent diabetes mellitus (IDDM)スが关与している不かを明らかにするため、モデルAnimal NODマウスを Use い, (1) 膵β-cell に発appears しているレトロウイルスのクローニング, および, (2) Same as the ウイルスによるdiabetes disease mechanism sequence の明、を行った.まず、NODマウス spleen より、mRNAおよびゲノムDNAを得た.タイプCレトロウイスルのうちKnown のウイルスのgag domain のsimilarity の高い配arrayをプライマーとしてい, RT-PCR method によるホモロジークローニングを行った.そのRESULT, NODマウスのみに発appearし, これまでreportのないレトロウイルス配arrayをgetた.さらに、NODマウスゲノムより、PCRクローニングにてThis レトロウイルス (NODV) ゲノムfull structure を明らかにした. The full length of NODV is 4.8kpb, the gag legacy subfield is relatively preserved, the pol field is shortened, and the env field is traced.このstructural はマウスエイズウイルス(MAIDS)と is very similar to しており, replication defective virus と考えられた. NODマウスにおけるNODVmRNAのorganism distributionをみると、赵のみに発appearsしていた. NODV's LTR field, ルシフェラーゼアッセイにより, inside The secretory cells are active and active. NODVmRNAのNODマウス膵における経时発 appearをみると、赵岛 inflammationのAt the beginning, the 4th week will be the highest, the 6th week, and the 10th week will be the lowest. Above, IDDM animals NOD animals, and special animals Now it's the success of the new しているレトロウイルス (NODV). NODV's パターンより, this ウイルスがNOD's にウスのdiabetes disease にSeki and していることが Show 膆された.

项目成果

Imagawa,A.,et al.: "High prevalence of antibodies to glutamic acid decarboxylase in comparison to ICA in patients with long-standing IDDM." Ras Commun Mol Pathol Pharmacol. 92,1. 43-52 (1996)

Imakawa,A.,et al.：“在长期患有 IDDM 的患者中，与 ICA 相比，谷氨酸脱羧酶抗体的患病率较高。”

Mashima,H.,et al.: "Betacellulin and activin A coordinately convert amylase-secreting AR42J cells into insulin-secreting cells." J Clin Invest. 97,7. 1647-1654 (1996)

Mashima, H. 等人：“Betacellulin 和激活素 A 协同将淀粉酶分泌 AR42J 细胞转化为胰岛素分泌细胞。”

Imagawa,A.,et al.: "Islet infiltrating T-lymphocytes in insulin-dependent diabetic patients express CD80(B7-1)and CD86(B7-2)." J Autoimmun. 9. 391-396 (1996)

Imakawa, A. 等人：“胰岛素依赖型糖尿病患者的胰岛浸润 T 淋巴细胞表达 CD80 (B7-1) 和 CD86 (B7-2)。”

Yamagata,K.,et al.: "Dominant TCR a-chain clonotypes and interferon-g are expressed in the pancreas of patients with recent-onset IDDM." Diab Res Clin Prac. 34. 37-46 (1996)

Yamagata,K.,et al.：“显性 TCR a 链克隆型和干扰素-g 在新发 IDDM 患者的胰腺中表达。”

Iwahashi,H.,et al.: "Cytokine-induced apoptotic cell death in a mouse pancreatic beta cell line:inhibition by Bc1-2." Diabetologia. 39,5. 530-536 (1996)

Iwahashi, H., et al.：“小鼠胰腺 β 细胞系中细胞因子诱导的细胞凋亡：Bc1-2 的抑制。”