レトロウイルスcDNA発現ライブラリーによる新規サイトカイン遺伝子の単離

使用逆转录病毒 cDNA 表达文库分离新型细胞因子基因

• 批准号: 09250205
• 负责人: 北村 俊雄
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09250205/
• 关键词: 変異; サイトカイン; サイトカインレセプター; レトロウイルス; 発現クローニング

我々が以前に開発したレトロウイルスcDNAライブラリーを利用して、新規サイトカイン遺伝子のスクリーニングを行っている。ストラテジーとしては、まず突然変異原(EMS)で処理したマウスIL‐3依存性プロB細胞株Ba/F3から、各種ストローマ細胞と共培養を行うことによってストローマ細胞依存性の変位Ba/F3株を樹立する(Ba/F3細胞は通常ストローマ細胞依存性増殖は示さない)。この場合変異Ba/F3株は異所性のサイトカインレセプター発現によって、ストローマ細胞由来のサイトカインに対する反応性を獲得したことが考えられる。実際、樹立した変異Ba/F3株のうち多くは、GM‐CSF、SCFなど既知のサイトカインに対するレセプターを発現することによってストローマ依存性を獲得したことが、サイトカイン中和抗体を利用した実験で判明した。次に既知のサイトカイン抗体でそのストローマ依存性が抑制されない変異Ba/F3細胞株の増殖を維持するストローマ細胞のcDNAライブラリーをレトロウイルスベクターpMXを利用して作成した。このライブラリーを変異Ba/F3株の増殖を維持できないストローマ細胞に導入して変異Ba/F3株のストローマ依存性増殖を指標として、ライブラリーをスクリーニングした。得られたcDNAを現在解析中である。

In the past, we need to make full use of the information and new regulations to make full use of the cDNA information. The cell line Ba/F3, the cell line of all kinds of cell culture, the cell site of Ba/F3, the position of cell dependence of Ba/F3 (Ba/F3 cell line), the cell line of cell line B, the cell line of cell line Ba/F3, and the cell line of cell culture of all kinds of cells were cultured in the same way. The sex of the Ba/F3 plant was not affected. The cause of the disease and the origin of the cells were detected. It is known that Ba/F3 strains are highly sensitive, GM-CSF, and SCF strains are known to be highly sensitive, sensitive, stable, sensitive, sensitive, sensitive, It is known that Ba/F3 cell lines can be proliferated and maintained in the presence of specific antibodies. CDNA cells are isolated from the cells of the cell line. The cells are reproduced by the use of pMX cells. This means that the cells of the Ba/F3 plant can be transferred into the cell of the Ba/F3 plant, and the dependent colonization of the plant will be affected. The cDNA is now being parsed.

项目成果

Morikawa,Y.et al: "Indaction of synaptosomal‐associated protein‐23kd(SNAP-23) by Various cytokines" Blood. (in press). (1998)

Morikawa, Y. 等人：“各种细胞因子对突触体相关蛋白 23kd (SNAP-23) 的影响”《血液》（出版中）。

Ito,K.et al: "Development of a novel selective amptifier gene for controllable expansion of transduced kematopoietic cells" Blood. Vol.90. 3884-3892 (1997)

Ito,K.等人：“开发一种新型选择性放大器基因，用于可控扩增转导的造血细胞”血液。

Kawakami,Y.et al: "Braton'S tyrosine kinase(Btk)regulates the JNK/SAPK kinase activity" Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A. Vol.94. 3938-3942 (1997)

Kawakami,Y.et al：“Braton 酪氨酸激酶 (Btk) 调节 JNK/SAPK 激酶活性”Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.

Hata,D.et al: "Invehement of Bruton'S tyrosine kinase in FeeRI‐dependent mast cell degranulation and cytokine production" J.Exp.Med. (in press). (1998)

Hata, D. 等人：“FeRI 依赖性肥大细胞脱颗粒和细胞因子产生中布鲁顿氏酪氨酸激酶的增强”J.Exp.Med（出版中）。

Onishi,M.et al: "Cytokine receptors : Structures and signal transduction" Int.Rev.Immunol. (in press). (1998)

Onishi,M.et al：“细胞因子受体：结构和信号转导”Int.Rev.Immunol。