分子シャペロン、ストレス蛋白質の抗原処理、提示機構における役割り

分子伴侣和应激蛋白在抗原加工和呈递机制中的作用

• 批准号: 08282231
• 负责人: 佐藤 昇志
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08282231/
• 关键词: hsp; 抗原ペプチド; TAP; MHC class I; ER; DSG

1)hsc70とTAP分子の会合T1細胞を可溶化し、抗TAP抗体(Dr.Crosswellより供与)で免疫沈殿物を作製、SDS-PAGE後ウェスタンブロットし、抗hsc70抗体(3a3抗体)で会合の有無を決定した。その結果、抗TAP抗体免疫沈殿物の分子量70kDa付近に3a3で検出されるバンドが明らかに認められた。つまり、TAP分子はhsc70と複合体を形成していることが判明した。解離されることも判明した。さらにこの会合はhsc70と選択的に反応する薬剤として知られているmethyl deoxyspergualin (meDSG)により完全に阻害された。従って、hsc70とTAP分子の結合はmeDSGがhsc70に結合する部分を介しての会合と推測することができる。2)hsc70による抗原ペプチドのERへの移入増強tyrosinase抗原ペプチドTyr-Met-Asn-Gly-Thr-Met-Ser-Gln-ValはTyrで^<125>Iラベルを行った。このペプチドがERに移入されたことの指標はAsn-Gly-ThrのモチーフがER内でglycosylationされることを利用し、ConAのaffinity columnを利用しglycosylated peptideとして精製し、^<125>I-Tyrの放射活性で定量化した。ERのソースとしてはラビットのreticulocyte microsome fractionを使用した。その結果、hsc70添加によりtyrosinase抗原ペプチドのERへの移入がBSAに比し、2倍近く明らかに増強した。このことはhsc70が自身の基質結合部に結合する抗原ペプチドをTAP分子を介しERに効率的に移入する機能をもつことを示している。

1) the fusion of hsc70-TAP molecules into T1 cells was soluble, anti-TAP antibodies (Dr.Crosswell antibodies) were used as immune precipitants, anti-hsc70 antibodies (3a3 antibodies) and anti-hsc70 antibodies (3a3 antibodies) were detected after SDS-PAGE. The results showed that the molecular weight of 70kDa immunized with anti-TAP antibody was close to that of 3a3. The complex of TAP molecule "hsc70" was formed and was identified by molecular identification. Please tell me if you want to know what's wrong with you. Please join the hsc70 selection in the reverse direction. Do not know that the methyl deoxyspergualin (meDSG) is completely blocked. The molecular combination of meDSG and HSC70 tap molecules and the combination of HSC70TAP molecules and HSC70TAP molecules will meet each other in order to make sure that they are not safe. 2) hsc70 antigens and ER antigens were transferred into tyrosinase antigens, Tyr-Met-Asn-Gly-Thr-Met-Ser-Gln-Val antigens, Tyr, ^ & lt;125>I antigens. This means that the radioactivity is quantified by the use of glycosylation in ER, the utilization of ER in ER, the use of glycosylated peptide in affinity column, and the quantification of radioactivity in ^ & lt;125>I-Tyr. ER. Please use the reticulocyte microsome fraction. The results showed that the addition of antigens of tyrosinase to hsc70 showed that the ER was transferred into the BSA ratio, and twice as much as that of the control group. The transfer of hsc70 gene binding site to antigen TAP molecular mediated ER infection rate was detected by means of molecular weight analysis.

项目成果

Chiba,T.,Takahashi,S.,Sato,N.,Ishii,S.and Kikuchi,K.: "Fas-mediated apoptosisi is modulated by intracellular glutathione in human T cells" Eur.J.Immunol.26. 1164-1169 (1996)

Chiba,T.、Takahashi,S.、Sato,N.、Ishii,S. 和 Kikuchi,K.：“Fas 介导的细胞凋亡由人 T 细胞中的细胞内谷胱甘肽调节”Eur.J.Immunol.26。

Ikeda,H.,Sato,N.,Matsuura,A.,Sasaki,A.,Takahashi,S.,Kozutsumi,D.,Kobota,T.,Okumura,N.Wada,Y.,Hirata,K.,Sato,N.and Kikuchi,K.: "Clonal dominance of human autologous cytotoxic Tlymphocytes against gastric carcinoma : molecular stability of the CDR-3 structu

池田H.、佐藤N.、松浦A.、佐佐木A.、高桥S.、小津美D.、小保田T.、奥村N.和田Y.、平田K.、佐藤

Takashima,S.,Sato,N.,Kishi,A,Tamura,Y.,Sagae,S.,Kudo,R.,Torigoe,N,Yagihashi,A.,and Kikuchi K.: "Interaction between cell-surface expressed 70kDa heat shock protein-like antigen and CD3^+4^-8^- TCR α/β kller T cells." Art.Organs. 20. 857-861 (1996)

Takashima, S.、Sato, N.、Kishi, A、Tamura, Y.、Sagae, S.、Kudo, R.、Torigoe, N、Yagihashi, A. 和 Kikuchi K.：“细胞表面表达之间的相互作用70kDa 热休克蛋白样抗原和 CD3^+4^-8^- TCR α/β kller T 细胞。”Art.Organs. 20. 857-861 (1996)

田村保明、佐藤昇志: "分子腫瘍学 中外医学社" 非特異的抗腫瘍エフェクター(NK,LAK)の標的細胞認識機構, 19 (1996)

Yasuaki Tamura、Shoji Sato：《分子肿瘤学中外医学社》非特异性抗肿瘤效应物（NK、LAK）的靶细胞识别机制，19（1996）

Sahara,H.,Ishikawa,M.,Takahashi,N.,Ohtani,S.,Sato,N.,Gasa,S.,Akino.T,and Kikuchi,K.: "in vivo antitum of effect of 3-sullono Quinovosyl 1'-monoacyiglyceride,isolated from sea urchin (Strongyloventrotus intermedius) intestines." Brit.J.Cancer. 75. 324-332

Sahara，H.，Ishikawa，M.，Takahashi，N.，Ohtani，S.，Sato，N.，Gasa，S.，Akino.T，和 Kikuchi，K.：“3-sullono 的体内抗癌作用