がん細胞のRas依存的non-apoptoticプログラム細胞死

癌细胞依赖Ras的非凋亡性程序性细胞死亡

• 批准号: 17014009
• 负责人: 北中 千史
• 金额: $ 3.39万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17014009/
• 关键词: Ras; 細胞死; がん

我々はがんで特徴的に見られるRasの異常活性化により惹起されるnon-apoptoticプログラム細胞死の存在を初めて発見し、このような細胞死が実際に生体内で(Rasが異常活性化した)がん細胞の排除機構として機能していることを明らかにした。そこで現在このがん細胞のRas依存的non-apoptoticプログラム細胞死のin vitroモデル実験系を用いてその制御機構の解明を進めており、本年度(本研究課題)では従来から行ってきた細胞内活性分子の刺激薬・阻害薬を用いたスクリーニングの継続ならびにsiRNA発現ライブラリーを用いたゲノム・ワイドスクリーニングという新規方法論による細胞死制御因子の同定を試みた。細胞内活性分子の刺激薬・阻害薬のスクリーニングの過程ではcyclic AMPがRas依存的non-apoptoticプログラム細胞死の制御に関わっている可能性が明らかになってきた。また、Ras依存的non-apoptotic細胞死に対する感受性と細胞内cyclic AMPレベルの関係を調べてみたところ、細胞死感受性と細胞内レベルが相関する傾向が認められた。今後はこれらの所見の確認を進める予定である。またsiRNA発現ライブラリースクリーニングに関してはスクリーニングを実施するための準備(必要なマテリアルの作成や条件設定)を行った。特に本実験では生存細胞を選択的に回収する必要があり、これをflow cytometricに行うため緑色傾向蛋白質(GFP)でラベルしたRas蛋白質(GFP-Ras)を発現する発現ベクターを作成した。GFP-Ras発現ベクターとコントロールGFP発現ベクターを細胞内に導入した後flow cytometric analysisを行い、生存細胞と死細胞を分取するためのパラメータの選択、条件設定を行った。今後これらのマテリアル・条件を用いてスクリーニングを行う予定である。

I 々 は が ん で, 徴 に see ら れ る Ras の abnormal activation に よ り provoked さ れ る non - apoptotic プ ロ グ ラ ム cells die early の exist を め て 発 し, こ の よ う な が cell death be interstate に で gave birth to the body (Ras が abnormal activation し た) が の ん cells eliminate institutional と し て function し て い る こ と を Ming ら か に し た. Youdaoplaceholder0 で で now <s:1> がん がん cells <s:1> Ras dependent non-apoptoticプログラム cells dead <s:1> in Vitro モ デ ル be を 験 department with い て そ の system of the royal institution の interpret を into め て お り, this year (in this research topic) で は 従 to か ら line っ て き た reactive molecules in cells の stimulus 薬, resistance against 薬 を with い た ス ク リ ー ニ ン グ の 継 続 な ら び に siRNA 発 now ラ イ ブ ラ リ ー を with い た ゲ ノ ム · ワ イ ド ス ク リ ー ニ ン グ と い う new The methodological approach of による cell death control factor the same determination を test みた. Reactive molecules in cells の stimulus 薬, resistance against 薬 の ス ク リ ー ニ ン グ の process で は cyclic AMP が Ras dependent non - apoptotic プ ロ グ ラ ム cell death の suppression に masato わ っ て い る possibility が Ming ら か に な っ て き た. ま た, Ras dependent non - apoptotic cell death に す seaborne る susceptibility と intracellular cyclic AMP レ ベ ル の masato is を adjustable べ て み た と こ ろ, cell death susceptibility と intracellular レ ベ ル が phase masato す る tendency が recognize め ら れ た. In the future, what is seen by れら れら を confirms を into める set である. ま た siRNA 発 now ラ イ ブ ラ リ ー ス ク リ ー ニ ン グ に masato し て は ス ク リ ー ニ ン グ を be applied す る た め の preparation (necessary な マ テ リ ア ル の made や conditions set) line を っ た. Hereby に be 験 で は survival cell を sentaku に back 収 す る necessary が あ り, こ れ を flow cytometric に line う た め green tendency protein (GFP) で ラ ベ ル し た Ras protein (GFP - Ras) を 発 now す る 発 now ベ ク タ ー を made し た. GFP - Ras 発 now ベ ク タ ー と コ ン ト ロ ー ル GFP 発 now ベ ク タ ー を intracellular に import し た after flow cytometric analysis を い, living cells と die を divide す る た め の パ ラ メ ー タ の sentaku, conditions set line を っ た. Future こ れ ら の マ テ リ ア を ル · conditions with い て ス ク リ ー ニ ン グ を line う designated で あ る.

项目成果

Non-apoptotic programmed cell deaths: existence and significance of programme cell deaths having morphology and mechanism distinct from apoptosis.

非凋亡程序性细胞死亡：具有与细胞凋亡不同的形态和机制的程序性细胞死亡的存在和意义。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Yamagata Med J 23
• 作者: Kurihara A;Nagoshi H;Yabuki M;Okuyama R;Obinata M;Ikawa S.;Kitanaka C
• 通讯作者: Kitanaka C

オートファジーと細胞死

自噬和细胞死亡

• 发表时间: 2006
• 期刊: 蛋白質核酸酵素 (in press)
• 作者: 立花 研;北中 千史
• 通讯作者: 北中 千史

腫瘍における細胞死の分子機構

肿瘤细胞死亡的分子机制

• 发表时间: 2005
• 期刊: 脳神経外科速報 15
• 作者: 北中千史;立花研
• 通讯作者: 立花研