生存シグナル伝達を阻害する新規物質の探索

寻找抑制生存信号传导的新物质

• 批准号: 15025217
• 负责人: 藤田 直也
• 金额: $ 10.37万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15025217/
• 关键词: Akt; PDK1; WEE1Hu; MEK; MAPK; 抗癌剤; 生存シグナル; 抗がん剤; p27Kip1; 14-3-3蛋白質

ヒトAkt・PDK1タンパク質と相互作用する分子のスクリーニングを行ない、Aktに結合する基質分子としてWEE1Hu(Wee1Aとも呼ばれる)を、PDK1に結合する基質分子としてMEK(MAPK/Erk kinase)を同定した。WEE1Huは642番目のセリン残基がリン酸化され、機能発揮の場である核から細胞質へと核外移行した。WEE1Huに結合する分子の探索をさらに行なった結果、14-3-3thetaタンパク質がWEE1Huに結合すること、さらにその結合には642番目のセリン残基のリン酸化が必須であることを見いだした。WEE1Huの核外移行はAktまたは14-3-3theta遺伝子発現により促進され、それに符合するようにWEE1HuによるG2/M期停止活性が減弱した。よって、AktはWEE1Huをリン酸化することによりWEE1Huの核外移行を誘導し、がん細胞の異常な細胞周期進行を引き起こしていることが示唆された。PDK1は、MEK1の222番目およびMEK2の226番目のセリン残基をリン酸化することを見いだした。PDK1に対するsiRNAをデザインし,siRNAを細胞内に導入することによりPDK1発現を減少させると、MEKのリン酸化レベルが減少し、MEKの下流であるMAPKの活性抑制、MAPKの細胞内基質の活性減少,さらには細胞増殖の抑制が観察された。よって、PDK1はAkt経路およびMAPK経路を制御するキナーゼであることが明らかとなり、PDK1は抗がん剤開発の際の分子標的として有望であることが示唆された。

ヒ ト Akt, PDK1 タ ン パ ク qualitative と interaction す る molecular の ス ク リ ー ニ ン グ を line な い, Akt に combining す る matrix molecules と し て WEE1Hu (Wee1A と も shout ば れ る) を, PDK1 に combining す る matrix molecules と し て MEK (MAPK/Erk kinase) with fixed し を た. WEE1Hu は 642's mesh の セ リ ン residues が リ ン acidification さ れ, functional 発 の field で あ る nuclear か ら cytoplasm へ と nucleus transitional し た. WEE1Hu に combining す る molecular の explore を さ ら に line な っ た results, the 14-3-3 theta タ ン パ ク qualitative が WEE1Hu に combining す る こ と, さ ら に そ の combining に は 642's mesh の セ リ ン residues の リ ン acidification が must で あ る こ と を see い だ し た. WEE1Hu の nucleus transitional は Akt ま た は traces of the 14-3-3 theta 伝 son 発 now に よ り promote さ れ, そ れ に conform to す る よ う に WEE1Hu に よ る G2 / M phase stop activity weakened が し た. よ っ て, Akt は WEE1Hu を リ ン acidification す る こ と に よ り WEE1Hu の nucleus induced transitional を し, が ん の abnormal な き with を cell cycle up こ し て い る こ と が in stopping さ れ た. PDK1 は, MEK1 の 222's mesh お よ び MEK2 の 226's mesh の セ リ ン residues を リ ン acidification す る こ と を see い だ し た. PDK1 に す seaborne る siRNA を デ ザ イ ン し, siRNA を intracellular に import す る こ と に よ り PDK1 発 を now reduce さ せ る と, MEK の リ ン acidification レ ベ ル が reducing し, MEK の obscene で あ る MAPK の active suppression, MAPK matrix の の cell activity decreased, さ ら に は の inhibit cell raised colonization が 観 examine さ れ Youdaoplaceholder0. よ っ て, PDK1 は Akt 経 road お よ び MAPK 経 road を suppression す る キ ナ ー ゼ で あ る こ と が Ming ら か と な り, PDK1 は resistance が ん tonic open 発 の interstate の molecular mark と し て could で あ る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

Aggrus: a diagnostic marker that distinguishes seminoma from embryonal carcinoma in testicular germ cell tumors

• DOI: 10.1038/sj.onc.1207869
• 发表时间: 2004-11-04
• 期刊: ONCOGENE
• 影响因子: 8
• 作者: Kato, Y;Sasagawa, I;Tsuruo, T
• 通讯作者: Tsuruo, T

Human intestinal epithelial cell survival and anoikis -: Differentiation state-distinct regulation and roles of protein kinase B/Akt isoforms

• DOI: 10.1074/jbc.m405323200
• 发表时间: 2004-10-15
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Dufour, G;Demers, MJ;Vachon, PH
• 通讯作者: Vachon, PH

Reconstitution of caspase-3 confers low glucose-enhanced tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand cytotoxicity and akt cleavage

• DOI: 10.1158/1078-0432.ccr-03-0136
• 发表时间: 2004-03-15
• 期刊: CLINICAL CANCER RESEARCH
• 影响因子: 11.5
• 作者: Lee, YJ;Froelich, CJ;Kim, JH
• 通讯作者: Kim, JH

Naoya Fujita: "Phosphorylation of p27^<Kip1> at threonine 198 by p90 ribosomal protein S6 kinases promotes binding to 14-3-3 and cytoplasmic localization."J.Biol.Chem.. 278. 49254-49260 (2003)

Naoya Fujita：“p90 核糖体蛋白 S6 激酶对苏氨酸 198 位点的 p27^<Kip1> 进行磷酸化可促进与 14-3-3 的结合和细胞质定位。”J.Biol.Chem.. 278. 49254-49260 (2003)

Naomi Haga: "Mitochondrial aggregation precedes cytochrome c release from mitochondria during apoptosis."Oncogene. 22. 5579-5585 (2003)

Naomi Haga：“细胞凋亡期间，线粒体聚集先于线粒体释放细胞色素 c。”癌基因。