T細胞ハイブリド-マを用いた慢性関節リウマチにおける免疫制御機構の解析

利用T细胞杂交瘤分析类风湿性关节炎的免疫控制机制

• 批准号: 01570371
• 负责人: 宮坂 信之
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570371/
• 关键词: 慢性関節リウマチ; 滑膜増殖; インタ-ロイキン; ハイブリド-マ

慢性関節リウマチ(RA)の炎症の主座は関節滑膜である。病理組織学的にはTリンパ球(特にCD4+細胞)の血管周囲性浸潤が著明にみられるが、その機能は不明な点が多い。そこで我々は、RA関節滑膜組織由来Tリンパ球の果たす役割について解析する目的で、T細胞ハイブリド-マを樹立し、産生されるサイトカインについて検討を加えた。〔方法〕ヒトT細胞白血病株CCRF-CEMを限界希釈法によりクロ-ニングしたemetin-actinomycin D感受性クロ-ンと、インタ-ロイキンIで刺激したRA関節滑膜由来単核球を用いて細胞融合を行った。滑膜細胞増殖誘導活性の測定には、RA関節滑膜よりペトリ皿付着法を用いて得られた滑膜細胞を用いた。IL-1,IL-6の測定には既報のバイオアッセイを用いた。〔結果〕上記方法により、培養開始6週目より10%胎児子牛血清存在下で自律性に増殖する細胞株約30種を得た。これに対して、親株あるいはfiller細胞のみの培養では全く細胞株を得ることはできなかった。これらの細胞株はいずれもCD3抗原を表出しており、CD4抗原あるいはCD8抗原のいずれかをも発現していた。また染色体数は親株に比較して約10本増加していることが確認された。得られたT細胞ハイブリド-マの中に、弱いながらIL-6を産生するものがみられたが、IL-2産生株はみられなかった。また、滑膜細胞増殖誘導因子を産生するものを数種認め、この活性はIL-1、IL-6によるものではないことが確認されたが、現在、その他の既知のサイトカインとの異同について検討中である。

Chronic joint inflammation (RA) Pathological histology of T lymphocytes (especially CD4 + cells) and perivascular infiltration showed that the function of T lymphocytes was unknown. The synovial tissue of RA joint is derived from T cells, and the results of T cells are analyzed. T cells are established and produced. [Methods] T-cell leukemia CCRF-CEM was used to determine the sensitivity of emetin-actin D to RA synovial origin and cell fusion. Synovial cell proliferation induction activity was measured using the synovial cell culture method. IL-1,IL-6 assays are reported to be useful. [Results] About 30 kinds of cell lines were obtained in the presence of 10% fetal bovine serum at the beginning of 6 weeks of culture. The cell culture of the parent strain was completed. These cell lines contain CD3 antigen and CD4 antigen. The number of chromosomes was increased by about 10 in comparison with the parent plant. T cells are produced in the middle and lower levels of IL-6 and IL-2. There are several kinds of recognition and activity of IL-1 and IL-6 in synovial cell proliferation induction factors.

项目成果

宮坂信之,立石睦人,山本興太郎: "SLEにおけるEBVの関与" 厚生省特定疾患自己免疫疾患調査研究班昭和63年度研究業績. 49-50 (1989)

Nobuyuki Miyasaka、Mutsuto Tateishi、Kotaro Yamamoto：“EBV 在 SLE 中的参与”卫生福利部指定疾病自身免疫性疾病研究小组 1986 财年研究结果 49-50 (1989)。

N.Miyasaka,K.Sato,K.Yamamoto,M.Goto,K.Nishioka: "Immunological and immunohistochemical analysis of rheumatoid rodules" Annals of the Rheumatic Diseases. 48. 220-226 (1989)

N.Miyasaka，K.Sato，K.Yamamoto，M.Goto，K.Nishioka：“类风湿结节的免疫学和免疫组织化学分析”风湿病年鉴。

宮坂信之,山岡國士,Anders Rosen,小安重夫: "A VARIANT OF INTERLEUKIN(IL-1)IS PRODUCED BY A HUMAN B LYMPHOBLASTOID CELL LINE" 厚生省特定疾患自己免疫疾患調査研究班昭和63年度研究業績. 72-74 (1989)

Nobuyuki Miyasaka、Kunio Yamaoka、Anders Rosen、Shigeo Koyasu：“A VARIANT OF INTERLEUKIN (IL-1) IS PRODUCED BY A HUMAN B Lymphoblastoid Cell Line”卫生福利部指定疾病自身免疫性疾病调查研究组 1985 财年研究成果。 - 74 (1989)

N.Miyasaka,K.Yamaoka,M.Tateishi,K.Nishioka,K.Yamamoto: "Possible involvement of Epstein-Barr Virus(EBV)in polyclonal B cell activation in Sjogren's Syndrome" J.Autoimmunity. 2. 427-432 (1989)

N.Miyasaka、K.Yamaoka、M.Tateishi、K.Nishioka、K.Yamamoto：“EB 病毒 (EBV) 可能参与干燥综合征的多克隆 B 细胞激活”J.自身免疫。

宮坂信之,井上裕子,山本一彦,山本興太郎: "T細胞ハイブリド-マを用いた慢性関節リウマチの免疫制御機構の解析" 厚生省特定疾患自己免疫疾患調査研究班昭和63年度研究業績. 90-92 (1989)

Nobuyuki Miyasaka、Yuko Inoue、Kazuhiko Yamamoto、Kotaro Yamamoto：“使用T细胞杂交瘤分析类风湿性关节炎的免疫控制机制”厚生省特定疾病自身免疫疾病调查研究小组1985年90-92年研究结果。 ）