慢性関節リウマチ病変局所におけるシグナル伝達機構の解析:Jak-Stat系の関与

类风湿关节炎局部病灶信号转导机制分析：Jak-Stat系统的参与

• 批准号: 08877081
• 负责人: 宮坂 信之
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877081/
• 关键词: 慢性関節リウマチ; 細胞内シグナル伝達機構; サイトカイン

慢性関節リウマチ(RA)ではTNF、IL-1をはじめとする種々のサイトカインが過剰に産生され、これらが滑膜増殖、組織傷害に関与していると考えられている。サイトカインレセプターからのシグナル伝達にはスフィンゴミエリン-セラミド系やJAK-STAT系をはじめとする多くの経路が知られており特にセラミドは、TNFレセプター、IL-1レセプターのsecond messengerのひとつでありRAに深く関与していると考えられる。本研究では滑膜細胞におけるこれらのシグナル伝達経路の役割を解析した。細胞透過性セラミド(N-アセチルスフィンゴシン)は、PDGF添加無血清培地では10μM、5%FCS培地では50μM以上でRA患者由来培養滑膜細胞のDNA合成を阻害し、球状の形態変化を誘導した。この形態変化はセラミド添加4時間後より認められ、24時間後まではセラミド除去により可逆性であった。しかし、48時間後の時点では、Hoechst33258を用いた蛍光染色でクロマチンの凝縮、断片化を認め、フローサイトメトリー法(PI染色)ではDNA含量の減少が観察された。DNA電気泳動ではアポトーシスに特徴的なラダー形成が認められた。一方、TNFやIL-1でみられるようなDNA合成の促進効果は、セラミドには認められなかった。以上より、滑膜細胞においてセラミドはアポトーシスを誘導するメディエーターであり、TNFやIL-1による滑膜細胞増殖にはスフィンゴミエリン-セラミド系以外の経路が重要であることが示唆された。今後JAK-STAT系等の役割を解析していく予定である。

Chronic masato section リ ウ マ チ (RA) で は TNF, IL - 1 を は じ め と す る kind 々 の サ イ ト カ イ ン が before turning に produce さ れ, こ れ ら が synovial rights reside, damage に masato and し て い る と exam え ら れ て い る. サ イ ト カ イ ン レ セ プ タ ー か ら の シ グ ナ ル 伝 da に は ス フ ィ ン ゴ ミ エ リ ン - セ ラ ミ ド department や JAK - STAT を は じ め と す る more く の 経 road が know ら れ て お り, に セ ラ ミ ド は, TNF レ セ プ タ ー, IL - 1 レ セ プ タ ー の second messenger ひと ひと であ であ えられる RAに is deeply related to く and <s:1> て ると ると ると えられる to えられる. In this study, で における synovial cells における <s:1> れら れら <s:1> シグナ 伝 伝 伝 were collected by da jing lu を and analyzed by を た. Cell permeability セ ラ ミ ド (N - ア セ チ ル ス フ ィ ン ゴ シ ン) は, PDGF add serum-free culture で は 10 microns, 5% FCS petty で は で RA patients over 50 microns origin を resistance against し の culturing synovial cell DNA synthesis, globular の form - induced し を た. こ の morphology variations は セ ラ ミ ド add four time after よ り recognize め ら れ, 24 time after ま で は セ ラ ミ ド remove に よ り reversible で あ っ た. し か し, 48 after の point で は, Hoechst33258 を with い た 蛍 light staining で ク ロ マ チ ン の condensation, fragment を recognize め, フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー method (PI staining) で は の DNA content reduce が 観 examine さ れ た. The electrical activity of DNA で で アポト シスに シスに シスに シスに シスに characteristics forms が recognition められた. One side, TNFやIL-1でみられるようなDNA synthesis <s:1> promoting effect, セラ ドに ドに recognition められな った った った. Above よ り, synovial cell に お い て セ ラ ミ ド は ア ポ ト ー シ ス を induced す る メ デ ィ エ ー タ ー で あ り, TNF や IL - 1 に よ る synovial cells raised colonization に は ス フ ィ ン ゴ ミ エ リ ン - セ ラ ミ ド department outside の 経 road が important で あ る こ と が in stopping さ れ た. In the future, the JAK-STAT system will be used for を analysis, て, て, く and である.

项目成果

Nakamura N.Chin H.et al.: "An epidermal growth factor receptor/Jak2 kinase domain induces tyrosine phosphorylation of stat5 and transduces a sigrol in hematopoietic cells" J.Biol.Chem.271. 19483-19488 (1996)

Nakamura N.Chin H.等人：“表皮生长因子受体/Jak2 激酶结构域诱导 stat5 酪氨酸磷酸化并在造血细胞中转导 sigrol”J.Biol.Chem.271。

Mizushima N.Koike R.et al.: "Ceramide induced apoptosis via CPP32 activation." FEBS Letters. 395. 267-271 (1996)

Mizushima N.Koike R.et al.：“神经酰胺通过 CPP32 激活诱导细胞凋亡。”