蛋白抗原のT細胞エピトープを同定する為の新しい方法

鉴定蛋白质抗原T细胞表位的新方法

基本信息

  • 批准号:
    07557228
  • 负责人:
  • 金额:
    --
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
  • 财政年份:
    1995
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1995 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

抗原分子のT細胞エピトープ同定はワクチンの開発や自己免疫疾患の病因解明に避けて通れない重要な課題である.T細胞エピトープ同定の為に既に2,3の方法が使われているが満足のいくものはない.特に抗原が未知の場合、全く方法が無いのが現状である。我々は最近使われ始めたランダムペプチドファージライブラリーに独創的な改良を加え、ランダムペプチドをMHC分子と共にファージ表面に発現させ,T細胞レセプターとの結合するランダムペプチドを直接スクリーニングすることでこれを克服することを計画した。MHCクラスII分子を一本鎖蛋白としてファージ上に発現させるために、先ずMHC分子と同じスーパーイムノグロブリンファミリーである抗体で試験的に実験を行い、抗体の可変領域であるVH鎖とVL鎖の遺伝子をPCR法にて増幅した後、リンカー(DDAKK)^4をコードする遺伝子(作成法は報告済み)を挟んで一本鎖にして、ファージのマイナ-コートプロテインをコードする遺伝子に連結した。そして、抗体活性があることを確認した(Mol. Biol. Reports, in press)。これをMHCクラスII分子に応用し、α鎖及びβ鎖の細胞外ドメインの遺伝子をPCR法にて増幅した後、同じリンカー(DDAKK)^4をコードする遺伝子を挟んで一本鎖にして、ファージのマイナ-コートプロテインをコードする遺伝子に連結した。本来の立体構造を持っているかどうかは現在抗クラスII抗体等を用い確認中である。一方、12アミノ酸からなるランダムな配列のペプチドをコードするDNAはすでに作成しており、組換えMHCクラスII分子が作成され次第スクリーニングを行うことができる。
The development of antigen molecules in T cells and the etiological explanation of immune disorders are important issues. Special antigen unknown situation, complete method unknown situation. We have recently developed a program to overcome this problem by adding original, improved, MHC molecules and common surface proteins to T cell selection and binding. MHC II molecule is a key protein in the protein chain. It is a key protein in the protein chain.(Make a report) The antibody activity was confirmed by Mol. Biol. Reports, in press)。These MHC II molecules are used in the amplification of extracellular proteins of α-and β-locks by PCR, and the same gene (DDAKK)^4 is used in the amplification of extracellular proteins of MHC II molecules, and the same gene is used in the amplification of extracellular proteins of MHC II molecules. The original three-dimensional structure was confirmed by the use of anti-CRIS II antibodies. The DNA of the first, 12-year-old and the second, 12-year-old are made of MHC II molecules, and the DNA of the first, 12-year-old and the second, 12-year-old are made of MHC II molecules.

项目成果

期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Komagata Y., Masuko K., Tashiro F., Kato T., Ikuta K., Nishioka K., Miyazaki J., Yamamoto K.: "Clonal Prevalence of T cells infiltraing into the pancreas of prediabetic NOD mice" Int. immunol. (in press).
Komagata Y.、Masuko K.、Tashiro F.、Kato T.、Ikuta K.、Nishioka K.、Miyazaki J.、Yamamoto K.:“T 细胞浸润到糖尿病前期 NOD 小鼠胰腺的克隆流行率”Int。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yamamoto K., Masuko K., Takahashi S., Ikeda Y., Kato T., Mizushima Y., Hayashi K., Nishioka K.: "Accumulation of distinct T cell clonotypes in human solid tumors." J. Immunol.154. 1804-1809 (1995)
Yamamoto K.、Masuko K.、Takahashi S.、Ikeda Y.、Kato T.、Mizushima Y.、Hayashi K.、Nishioka K.:“人类实体瘤中不同 T 细胞克隆型的积累。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
加藤 智啓: "分子レベルの自己免疫疾患" 山本一彦, 15 (1995)
加藤智博:“分子水平的自身免疫性疾病”山本和彦,15(1995)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Tomohiro Kato, Y. Ikeda, Z-P Zong, H. Sasakawa, M. Kurokawa, K. Masuko, R. Igarashi, Y. Nizushima, K. Nishioka, K. Yamamoto: "Charactrerization of T cell receptor β chains of accumulating T cells in skin allografts in mice" Transplantation. (in press).
Tomohiro Kato、Y. Ikeda、Z-P Zong、H. Sasakawa、M. Kurokawa、K. Masuko、R. Igarashi、Y. Nizushima、K. Nishioka、K. Yamamoto:“积累 T 细胞的 T 细胞受体 β 链的表征在小鼠皮肤同种异体移植中“移植。(正在出版)。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
加藤 智啓: "疾患別最新処方" 矢崎義雄, 2 (1995)
加藤智宏:“每种疾病的最新处方” Yoshio Yazaki,2 (1995)
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  • 发表时间:
  • 期刊:
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    0
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  • 资助金额:
    --
  • 项目类别:
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知道了