無酸素下試料処理法の確立とその発がん研究への応用

无氧样品处理方法的建立及其在致癌研究中的应用

基本信息

  • 批准号:
    08670392
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.34万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    1996
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1996 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

活性酸素による生体損傷の中でも、DNA損傷は発がん過程において、重要な役割を演じている。特に、8ヒドロキシデオキシグアノシン(80HdG)は変異を誘発し、発がんとの関連が特に強い、有用な酸化的DNA損傷の1指標と考えられている。しかし、ヒトあるいは動物組織中の80HdG量については、報告間でその値に大きな隔たりが認められ、また同一報告内でも大きな測定誤差が認められる。それ故、生体内及び細胞内の80HdGの絶対量についての正確のデータはない。各報告間での80HdG量の差異は、実際の生体細胞内における差異ではなく、組織あるいは細胞からのDNAの抽出あるいは抽出したDNAの処理過程で人工的に生成した80HdGによる可能性が極めて高い。すなわちこれまでの80HdG測定は酸素が多量に存在する空気中で試料処理を行っていたため、その80HdG値が生体内あるいは生細胞内の値を反映していない可能性が高い。本研究では、無酸素条件下でのDNA抽出及び処理法を確立し、この方法を用い、生体内あるいは生細胞内の酸化的DNA損傷量を正確に把握し、生体内における酸化的DNA損傷誘発機講並びに損傷発生に影響を及ぼす要因を解析した。嫌気性培養装置内で試料処理し、80HdGを測定したところ、多くのヒト白血球サンプルで80HdG値が、デオキシグアノシン10万個当たり0.1-0.2個となり、従来法の1/5-1/10に低下した。このことから、従来法が如何に多くのア-ティファクトを観察していたかが判った。また繰り返し測定において、測定値の再現性が確認された。炎症誘発細胞では80HdGが増加し、その増加が抗酸化酵素や鉄キレータにより装飾されること、またヘリコバクター胃炎での80HdG増加が観察されこと等から本法が活性酸素による発がん研究を行う上で、有用な方法になると考えられた。
Active acids are involved in the process of biological damage, DNA damage is involved in the process, and important service is involved in the process. In particular, the 8-D spectrum of DNA damage (80HdG) is an indicator of DNA damage caused by different induction and development. 80HdG in animal tissues, between reports, between reports. 80HdG in vivo and in cells The difference in 80 HdG between reports is extremely high in the likelihood that it will be artificially generated during DNA extraction from cells and tissues. The 80HdG value is highly likely to be reflected in the intracellular value of the biological sample in the air, in the treatment of the biological sample, and in the measurement of the intracellular value of the biological sample. In this study, DNA extraction and treatment methods were established under acid-free conditions. The application of this method, the correct understanding of the amount of DNA damage caused by acidification in living cells, the induction mechanism of DNA damage caused by acidification in living cells, and the analysis of the important factors affecting the development of DNA damage were discussed. In the culture apparatus, the sample treatment is 80HdG, the white blood cell concentration is 80 HdG, and the white blood cell concentration is 100,000. The concentration is 0.1-0.2, and the concentration is 1/5-1/10. How to find out more about this? The reproducibility of the measurement was confirmed. Inflammation-inducing cells increase in 80HdG, increase in anti-acidification enzymes, increase in 80HdG, increase in anti-acidification enzymes, increase in anti-

项目成果

期刊论文数量(7)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Nakajima,M.,Takeuchi,T.,Takeshita,T.,Morimoto,K.: "8-Hydroxydeoxyguanosine in human leukocyte DNA and daily health practice factors : Effects of individual alcohol sensitivity" Environmental Health Perspectives. 104. 1336-1338 (1996)
Nakajima,M.、Takeuchi,T.、Takeshita,T.、Morimoto,K.:“人类白细胞 DNA 中的 8-羟基脱氧鸟苷和日常健康实践因素:个人酒精敏感性的影响”环境健康观点。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Takeuchi,T.,Nakajima,M.,Morimoto,K.: "Relationship between the intracellular reacfive oxygen species and the induction of oxidative DNA damage in human neutrophol-like cells" Carcinoge nesis. 17. 1543-1548 (1996)
Takeuchi,T.、Nakajima,M.、Morimoto,K.:“细胞内活性氧与人中性粒细胞样细胞氧化性 DNA 损伤诱导之间的关系”致癌作用。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
竹内亨: "医用放射線科学講座1,医療科学(稲本一夫.早川和生編)" 医歯薬出版, 4 (1996)
竹内彻:《医学放射线科学课程1,医学科学(稻本和夫、早川和夫编辑)》石药出版社,4(1996)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Nakajima,M,Takeuchi,T.,Morimoto,K.: "Determination of 8-hydroxydeoxyguanosine in human cells under oxygen-free condition" Carcinogenesis. 17. 787-791 (1996)
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  • 发表时间:
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  • 批准号:
    04152143
  • 财政年份:
    1991
  • 资助金额:
    $ 1.34万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Cancer Research
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知道了