B細胞表面分子RP105についての個体レベル、分子レベルでの機能解析:会合分子の遺伝子単離とRP105ノックアウトマウスの作製

B细胞表面分子RP105在个体和分子水平上的功能分析：相关分子的基因分离和RP105敲除小鼠的产生

• 批准号: 10167216
• 负责人: 三宅 健介
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: 佐賀医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10167216/
• 关键词: B細胞; RP105; ロイシンリッチリピート; ノックアウトマウス; 遺伝子クローニング

RP105はマウスB細胞表面に発現されるLeucine-rich repeat(LRR)タンパクである。抗体によって架橋されると活性化シグナルを伝達し、アポトーシスに対する耐性や著明な増殖を誘導する。この分子に会合するタンパクの遺伝子単離、ノックアウトマウスを用いたシグナル伝達機構の解析、ヒトRP105についての解析を行った。1) RP105に会合する分子MD-1の遺伝子単離。マウスB細胞株M12からRP105に対するモノクローナル抗体を用いて、RP105とともに共沈降される22/25kDの分子を精製し、アミノ酸配列、遺伝子クローニングを行った。この分子は分泌タンパクであるが、RP105と会合することにより、細胞表面にも存在しうる。MD-1はRP105の細胞表面での発現をより安定にする。2) ノックアウトマウスを用いたシグナル伝達経路の解析。RP105の下流に位置するシグナル伝達経路について、種々のノックアウトマウスのB細胞の、RP105に対する反応性を調べることで解析した。RP105のシグナル伝達に関わっている分子は、lyn、btk、Erk-specific MAP kinase、protein kinase C βI/II、c-rel、nfkb1(p105)などであり、複数のシグナル伝達経路の関与が明らかになった。これはオーストラリアGerondakis、ドイツTarakhovsky両博士との共同研究である。3) ヒトRP105について、モノクロナール抗体の作製とそれを用いた機能的解析。ヒトRP105に対するモノクローナル抗体の作製に成功した。ヒトにおいてもRP105はB細胞に発現されており、活性化シグナルを伝達する。現在、佐賀医科大学膠原病内科と共同研究で自己免疫疾患等の患者の抹消血など調べて、RP105の発現と疾患との関わりを調べている。4) RP105のノックアウトマウスの作製に成功し、現在、解析を進めている。

On the surface of RP105 cells, Leucine-rich repeat (LRR) cells were detected. The antibody was activated, and the antibody was activated. The molecular system will help you to make sure that you are not allowed to do so, and that you will be able to use your computer to analyze and RP105 you to analyze the data. 1) RP105 rendezvous molecules MD-1 molecules are quarantined. Cell line M12

项目成果

Miyamoto,A.: "Establishment and characterization of an immortal macrophage-like cell line inducible to differentiate to osteoclasts." Biochem.Biophys.Res.Commu.242. 703-709 (1998)

Miyamoto,A.：“可诱导分化为破骨细胞的永生巨噬细胞样细胞系的建立和表征。”

Chan,V.W.F.: "The molecular mechanism of B cell Aactivation by toll-like receptor protein RP-105." J.Exp.Med.188. 93-101 (1998)

Chan,V.W.F.：“Toll 样受体蛋白 RP-105 激活 B 细胞的分子机制。”

Kosugi,A.: "Physical and functional association between thymic shared antigen-1/stem cell antigen -2 and the T cell receptor complex." J.Biol.Chem.273. 12301-12306 (1998)

Kosugi,A.：“胸腺共享抗原 1/干细胞抗原 -2 与 T 细胞受体复合物之间的物理和功能关联。”

Miyake,K.: "Mouse MD-1,a molecule that is physically associated with RP105 and positively regulates its expression." J.Immunol.161. 1348-1353 (1998)

Miyake,K.：“小鼠 MD-1，一种与 RP105 物理相关并正向调节其表达的分子。”

Grumont,R.J.: "B lymphocytes differentially use the rel and nuclear factor kB1(NFkB1)transcription factors to regulate cell cycle progression and apoptosis in quiescent and mitogen-activated cells." J.Exp.Med.187. 663-674 (1998)

Grumont, R.J.：“B 淋巴细胞不同地使用 rel 和核因子 kB1 (NFkB1) 转录因子来调节静止细胞和有丝分裂原激活细胞的细胞周期进程和细胞凋亡。”