2次元電気泳動法による特定遺伝子欠失変異株の遺伝子産物のマッピングと構造決定

使用二维电泳对特定基因缺失突变体的基因产物进行定位和结构测定

• 批准号: 10168223
• 负责人: 中山 建男
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: 宮崎医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10168223/
• 关键词: 枯草菌; 2次元電気泳動; 特定遺伝子欠失変異株; カタボライトレプレッション; 胞子; 発芽

1) 枯草菌蛋白質の発現プロファイルの標準パターンに関する成果は以下の通りである。2次元電気泳動後、メンブレンにブロットしてクマジーで染色し、数100個のポジティブスポットを認めた。アミノ酸配列は、直接、N-末端から決定し、ゲノムデータベースでマッチングを調べた。現在、約180個の同定を終了している。さらに、10数個の表層蛋白質の候補を同定することが出来た。これらのほとんどはN-末端ペプチドが切断されていた。また、スポアを可溶化し、SDS-PAGEで分画し、新たに約10個のスポア蛋白質を同定することが出来た。2) 環境変化に伴って変動する遺伝子(産物)に関する成果は以下の通りである。コントロールおよびグルコース添加の条件下で蛋白質を調製し、2D-PAGE後、エレクトロブロットした。グルコース添加の条件下で消失した約20個のスポットのアミノ酸配列を解析した。これらのほとんどはcre sequenceを有し、グルコースによるカタボライトレプレッション(CR)を受ける蛋白質であることが明らかになった。この中には、既知遺伝子のほかに新たにCRを受ける遺伝子も含まれていた。3) 特定遺伝子を破壊した変異株の解析に関する成果は次の通りである。遺伝子変異修復系の因子であるmfd蛋白質はスポア後期に影響を与える。この欠失変異株のスポアから野生株と比べて容易に抽出出来る数個の蛋白質を同定した。スポア形成T_4からSigK依存的に発現するyabG破壊株はL-Alaに対する発芽応答が低下する。野生株と比べてこの変異株のスポアから約10個のスポアコート蛋白質が容易に可溶化された。したがって、yabGはスポア蛋白質を架橋する酵素かあるいは架橋酵素の基質である可能性がある。

1) the protein of Bacillus subtilis shows that the standard is the following. After the second swimming session, the number of each of the 100 swimming events was confirmed. The acid configuration, the direct, the N-terminal, the determination, the determination. At present, about 180 agreements have been signed. There are more than 10 protein waiting tables in the same period of time. I don't know. I don't know what's going on. About 10 protein proteins were extracted by the same assay, such as soluble protein, soluble protein, SDS-PAGE, and new protein. 2) the environmental protection is accompanied by the following general information on the results of environmental protection activities. The protein was added under the condition that the protein was added. After 2D-PAGE, the egg whites were added. Under the condition of addition, there are about 20 different concentrations of acid and acid in the column. Please tell me that there is something wrong with cre sequence, and that there is something wrong with it. (CR) is not affected by protein. In the middle of the conversation, you already know that the new CR has been picked up, and the child contains the information. 3) the results of a specific tree were analyzed in the first place. In the later stage of the study, mfd protein is the most important factor in the disease. It is easier to extract several proteins from the wild strain than the wild strain from the wild strain of the mutant. To form a SigK-dependent tree that is dependent on TM4, to see that the yabG is broken, that the L-Ala is broken, and that the bud answers "low". The wild strain was easier to dissolve than that of the wild strain in about 10 strains. The possibility is different from that of the enzyme frame, the enzyme frame, the enzyme base, the protein frame, the enzyme frame, the enzyme frame, the protein frame, the protein frame, the enzyme frame, the enzyme frame, the protein frame, the protein frame, the enzyme frame, the enzyme frame, the protein frame, the protein frame, the enzyme frame, the enzyme frame, the protein frame, the protein frame, the enzyme frame, the enzyme frame, the protein frame, the enzyme frame, the enzyme frame, the protein frame, the enzyme frame, the enzyme frame, the protein frame, the enzyme frame, the