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セントロメア機能における特殊DNA高次構造とCENP-Cの役割

セントロメア機能における特殊DNA高次構造とCENP-Cの役割
特殊DNA构象和CENP-C在着丝粒功能中的作用
批准号：
11143212
负责人：
池村 淑道
金额：
$1.22万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1999 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11143212/
关键词：
セントロメア染色体工学細胞分裂CENP-C染色体分配遺伝子ノックアウトDT-40細胞周期

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
セントロメアは染色体分配に本質的な役割を行うDNA-タンパク質の複合体である。高等脊椎動物のセントロメアの機能を実現している構造の実体については、未知に残された課題が多くある。今年度は進化的に配列が保存されたセントロメアタンパク質であるCENP-Cに注目し、その機能解明を試みた。ニワトリB細胞由来のDT40細胞は、哺乳類細胞に比べて、数十から数百倍の頻度で相同組換えを起こすことが知られている。その特徴を利用しDT40細胞を用いて、CENP-Cの条件ノックアウト株を作製した。またテトラサイクリンのシステムを用いて、CENP-Cの条件的大量発現株も作製した。これらの株の表現型を詳細に解析した結果、CENP-Cは細胞分裂中期から後期の移行に必須であり、染色体凝縮に関与していることが示唆された。また、CENP-Cは機能的セントロメアの形成のために必須であるが、CENP-C単独で容易にセントロメア形成を誘導しないという結果が得られた。さらに、CENP-Cの酵母ホモログであるMif2の温度感受性変異を指標にして、各種変異を導入した変異CENP-CをDT40細胞に導入した。この方法によって、現在まで4種類のCENP-C温度感受性変異細胞株を単離できた。この株の表現型の詳細な解析と、これらの変異を抑圧する遺伝子のスクーリングが進行中である。
英文摘要
セントロメアは染色体分配に本質的な役割を行うDNA-タンパク質の複合体である。高等脊椎動物のセントロメアの機能を実現している構造の実体については、未知に残された課題が多くある。今年度は進化的に配列が保存されたセントロメアタンパク質であるCENP-Cに注目し、その機能解明を試みた。ニワトリB細胞由来のDT40細胞は、哺乳類細胞に比べて、数十から数百倍の頻度で相同組換えを起こすことが知られている。その特徴を利用しDT40細胞を用いて、CENP-Cの条件ノックアウト株を作製した。またテトラサイクリンのシステムを用いて、CENP-Cの条件的大量発現株も作製した。これらの株の表現型を詳細に解析した結果、CENP-Cは細胞分裂中期から後期の移行に必須であり、染色体凝縮に関与していることが示唆された。また、CENP-Cは機能的セントロメアの形成のために必須であるが、CENP-C単独で容易にセントロメア形成を誘導しないという結果が得られた。さらに、CENP-Cの酵母ホモログであるMif2の温度感受性変異を指標にして、各種変異を導入した変異CENP-CをDT40細胞に導入した。この方法によって、現在まで4種類のCENP-C温度感受性変異細胞株を単離できた。この株の表現型の詳細な解析と、これらの変異を抑圧する遺伝子のスクーリングが進行中である。
期刊论文(9)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
安藤麻子: "cDNA cloning, Northern hybridization and mapping analysis of a putative GDS (guanine nucleotide dissociation stimulator of G proteins)-related protein gene at the centromeric ends of the human and mouse MHC regions"Immunogenetics. 49. 354-356 (1999
Asako Ando：“人类和小鼠 MHC 区域着丝粒末端推定的 GDS（G 蛋白鸟嘌呤核苷酸解离刺激物）相关蛋白基因的 cDNA 克隆、Northern 杂交和作图分析”《免疫遗传学》49. 354-356 (1999)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
野上正弘: "Intranuclear arrangement of human chromosome 12 correlates to large-scale replication domains"Chromosoma. (in press). (2000)
Masahiro Nogami：“人类 12 号染色体的核内排列与大规模复制域相关”（正在出版）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
大野みずき: "Non-B DNA structures spatially and sequence-specifically associated with individual centromeres in the human interphase nucleus"Chromosomes Today. 13(in press). (2000)
Mizuki Ohno：“非 B DNA 结构在空间和序列上与人类间期核中的单个着丝粒相关”，《今日染色体》13（出版中）。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
深川竜郎: "The chicken HPRT gene : a counter selectable marker for the DT40 cell line"Nucleic Acids Research. 27. 1966-1969 (1999)
Tatsuro Fukakawa：“鸡 HPRT 基因：DT40 细胞系的反选择标记”《核酸研究》27。1966-1969 (1999)。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 9 条
    全ゲノム情報に基づいた病原微生物と常在菌の多様性と病原遺伝子に関する情報学的研究
    全ゲノム情報に基づいた病原微生物と常在菌の多様性と病原遺伝子に関する情報学的研究
    • 批准号：
      17019018
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $0.83万
    • 财政年份：
      2005
    • 负责人：
      池村 淑道
    • 依托单位：
      The Graduate University for Advanced Studies
    ゲノムに潜むシグナル・モチーフ部品の網羅的探索のための自己組織化地図
    • 批准号：
      16014225
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $2.3万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      池村 淑道
    • 依托单位：
      The Graduate University for Advanced Studies
    ゲノムに潜むシグナル・モチーフ部品の網羅的探索のための自己組織化地図
    • 批准号：
      15014231
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $2.24万
    • 财政年份：
      2003
    • 负责人：
      池村 淑道
    • 依托单位：
      National Institute of Genetics
    海外基金