分子シャペロンAPG-1とAPG-2の生体における機能の解析

分子伴侣APG-1和APG-2体内功能分析

• 批准号: 11153211
• 负责人: 藤田 潤
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11153211/
• 关键词: シャペロン; 熱ショック蛋白質; HSP110; ノックアウトマウス; 精子形成

マウスでは、HSP110ファミリーはAPG-1、APG-2、HSP110/105の3種からなる。これら分子シャペロンの生体内における機能は不明である。そこでAPG-1遺伝子ノックアウトマウスにおける異常、特に生殖機能、神経機能、ストレス応答を解析する。また、APG-2に対する抗体がin vitroでマウス卵の受精を阻害することを見出したので、卵又は精子でAPG-2に結合し受精に必須であるシャペロン基質を同定する。さらにAPG-2遺伝子をノックアウトしたマウスを作製し機能を明らかにすることを目的とした。その結果1.マウスAPG-2に結合する蛋白のcDNAを精巣から酵母2ハイブリッド法によりクローニングした。10種がマウス細胞中でも結合することがわかり、解析中である。2.ヒトでもマウス同様に、HSP110ファミリーがAPG-1、APG-2、HSP110/105の3種からなることを明らかにした。3.APG-1遺伝子ノックアウトマウスは表現型に異常がなく、生殖機能、脱水ストレス応答も正常であった。APG-1同様に精子形成細胞で発現していて、その遺伝子欠損によって表現型の異常が出なかったHsc70tノックアウトマウスを入手して両方の遺伝子欠損による影響を見る予定である。4.APG-2ノックアウトマウスは作成中である。

Youdaoplaceholder0 ウスで ウスで, HSP110ファ ファ リ リ ファ ファ らなる ファ APG-1, APG-2, hsp110/105 <s:1> three kinds らなる らなる. The における function of the シャペロ molecule in the body of the <s:1> organism is である unknown である. Son そ こ で APG - 1 heritage 伝 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス に お け る abnormalities, に reproductive function and god 経 function, ス ト レ ス 応 answer を parsing す る. ま た, APG - 2 に す seaborne が る antibody in vitro で マ ウ の ス eggs fertilized を resistance against す る こ と を shows し た の で, eggs and は sperm で APG - 2 に combining し fertilization に must で あ る シ ャ ペ ロ を ン matrix with fixed す る. Son さ ら に APG - 2 heritage 伝 を ノ ッ ク ア ウ ト し た マ ウ ス を cropping し function を Ming ら か に す る こ と を purpose と し た. そ の results 1. マ ウ ス APG - 2 に combining す る protein の cDNA を fine 巣 か ら yeast 2 ハ イ ブ リ ッ ド method に よ り ク ロ ー ニ ン グ し た. In 10 types of が and ウス cells, で で is bound to する, である, とがわ, and である are being analyzed. 2. ヒ ト で も マ ウ ス with others に, HSP110 フ ァ ミ リ ー が APG - 1, 2, HSP110 / APG - 105 の three か ら な る こ と を Ming ら か に し た. 3. APG - 1 heritage 伝 son ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス に abnormal phenotypes は が な く, reproductive function, dehydration ス ト レ ス 応 answer も normal で あ っ た. APG - 1 with others に sperm cells で 発 now し て い て, そ の heritage 伝 son owe loss に よ っ て phenotype の abnormal が な か っ た Hsc70t ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス を of し て struck party の heritage 伝 son owe loss に よ る influence を see る designated で あ る. 4. The composition of APG-2ノッ アウト アウト ウス ノッ である.

项目成果

Nonoguchi, K.: "Cloning of human cDNAs for Apg-1 and Apg-2, members of the Hspllo family and chromosomal assignment of their genes"Gene. 237. 21-28 (1999)

Nonoguchi, K.：“Hspllo 家族成员 Apg-1 和 Apg-2 的人类 cDNA 克隆及其基因的染色体分配”基因。

Tsuji,T: "Retroviral vector-mediated gene expression in human CD^<34+> CD^<38-> cells expanded in vitro"Human Gene Therapy. 11. 271-284 (2000)

Tsuji，T：“体外扩增的人 CD^<34> CD^<38-> 细胞中逆转录病毒载体介导的基因表达”人类基因治疗。

Danno,S: "Efficient gene transfer by hybrid retroviral vectors to murine spermatogenic cells"Human Gene Therapy. 10. 1819-1831 (1999)

Danno，S：“通过杂交逆转录病毒载体将基因有效转移至小鼠生精细胞”人类基因疗法。

Xue, J. -H.: "Effects of ischemig and H_2O_2 on the cold stress protein cirp expression in rat neuronal cells"Free Radical Biology Medicine. 27. 1238-1244 (1999)

薛建华：“缺血和H_2O_2对大鼠神经元细胞冷应激蛋白cirp表达的影响”自由基生物医学。

Higashitsuji, H.: "Reduud stability of retinoblastona protein by gankyrin, an oncogenic ankyrin-repeat protein over expressed in hepatomas"Nature Medicine. 6. 96-99 (2000)

Higashitsuji, H.：“gankyrin 降低视网膜母细胞蛋白的稳定性，gankyrin 是一种在肝癌中过度表达的致癌锚蛋白重复蛋白”《自然医学》。