発がんプロモーションのメカニズム解明のための鍵化合物の開発

开发关键化合物以阐明致癌促进机制

• 批准号: 12045241
• 负责人: 入江 一浩
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12045241/
• 关键词: ホルボールエステル; プロテインキナーゼC; 発がんプロモーター; インドラクタム; システインリッチドメイン

発がんプロモーターのターゲットは、細胞内情報伝達の鍵酵素であるプロテインキナーゼC(PKC)と考えられている。しかし、PKCを活性化する化合物がすべて発がんプロモーションを引き起こすわけではなく、PKCの活性化だけでは発がんプロモーションを説明できない。本研究者は、PKCが多くのアイソザイムよりなり、それぞれに複数の発がんプロモーター結合部位(ClA、ClBドメイン)が存在することがその大きな理由と考えている。本研究の目的は、天然発がんプロモーターをリードとして、PKCアイソザイムあるいはあるアイソザイムの特定のClドメイン選択的な薬剤を開発することにある。本研究者らは最近、全PKCアイソザイム(PKCα,β,γ,δ,ε,η,θ)のClAおよびClBを個別に化学合成し、これらのホルボールエステル(PDBu)に対する解離定数を正確に決定することに成功した。そこで、これらのペプチドライブラリーと[^3H]PDBuを用いた結合阻害試験によって、いくつかの天然発がんプロモーターの全PKCアイソザイムClドメインに対する結合定数(K_i)を測定した。その結果、インドールアルカロイド系の発がんプロモーターであるインドラクタムVが、novel PKC(δ,ε,η,θ)のClBドメインに選択的に結合することを見いだした。さらに、インドラクタムVのチオアミド誘導体を合成したところ、2はカルシウム依存性のconventional PKC(α,β,γ)に対して1と同様の結合活性を示したが、novcl PKC(δ,ε,η,θ)に対する結合能は約10倍弱かった。本結果は、novcl PKCがconventional PKCと比べて1のアミドカルボニル基を強く認識していることを示唆している。本知見は、PKCアイソザイム選択的な薬剤開発を行う上で、有用な指針となる。

発 が ん プ ロ モ ー タ ー の タ ー ゲ ッ ト は, intelligence 伝 da の key enzyme in cells で あ る プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ C (PKC) と exam え ら れ て い る. し か し, PKC を activeness す る compound が す べ て 発 が ん プ ロ モ ー シ ョ ン を lead き up こ す わ け で は な く, PKC の activeness だ け で は 発 が ん プ ロ モ ー シ ョ ン を illustrate で き な い. More than the researchers は, PKC が く の ア イ ソ ザ イ ム よ り な り, そ れ ぞ れ に plural の 発 が ん プ ロ モ ー タ ー combining site (ClA, ClB ド メ イ ン) exist が す る こ と が そ の big き な reason と exam え て い る. Purpose this study の は, natural 発 が ん プ ロ モ ー タ ー を リ ー ド と し て, PKC ア イ ソ ザ イ ム あ る い は あ る ア イ ソ ザ イ ム の specific の Cl ド メ イ ン sentaku of な 薬 tonic を open 発 す る こ と に あ る. The researchers ら は recently, PKC ア イ ソ ザ イ ム (PKC alpha, beta, gamma, delta, epsilon, eta, theta) の ClA お よ び ClB を individual に chemical synthetic し, こ れ ら の ホ ル ボ ー ル エ ス テ ル (PDBu) に す seaborne る dissociation constant を に right decision す る こ と に successful し た. そ こ で, こ れ ら の ペ プ チ ド ラ イ ブ ラ リ ー と [^ 3 h] PDBu を with い た combining resistance against test に よ っ て, い く つ か の natural 発 が ん プ ロ モ ー タ ー の full PKC ア イ ソ ザ イ ム Cl ド メ イ ン に す seaborne る し combination with the determination of the limit (K_i) を た. そ の results, イ ン ド ー ル ア ル カ ロ イ ド is の 発 が ん プ ロ モ ー タ ー で あ る イ ン ド ラ ク タ ム V が, will PKC (delta, epsilon, eta, theta) の ClB ド メ イ ン に sentaku に combined す る こ と を see い だ し た. さ ら に, イ ン ド ラ ク タ ム V の チ オ ア ミ ド inductor を synthetic し た と こ ろ, 2 は カ ル シ ウ ム dependency の but PKC (alpha, beta, gamma) に し seaborne て 1 と with others の binding activity を shown し た が, novcl PKC (delta, epsilon, eta, theta) に す seaborne る the は about 10 times the energy of weak か っ た. This results は, novcl PKC が but PKC と than べ て 1 の ア ミ ド カ ル ボ ニ ル strong base を く know し て い る こ と を in stopping し て い る. This knowledge は, PKC ア イ ソ ザ イ ム sentaku of な 薬 tonic open 発 を line う で, useful な pointer と な る.

项目成果

Kazuhiro Irie: "Selective binding of tumor promoters to the novel PKC ClB domains"Peptide Science 2000. (印刷中). (2001)

Kazuhiro Irie：“肿瘤启动子与新型 PKC ClB 结构域的选择性结合”，肽科学 2000 年。（出版中）。

中川優: "発がんプロモーターのnPKC ClBドメインへの選択的結合"バイオサイエンスとインダストリー. 58・8. 570-571 (2000)

中川胜：“致癌启动子与 nPKC ClB 结构域的选择性结合”，生物科学与工业 58・8（2000 年）。

Kazuhiro Irie: "Synthesis and tumor-promoting activities of 12-epi-phorbol-12,13-dibutyrate"Biosci. Biotechnol. Biochem.. 64・11. 2429-2436 (2000)

Kazuhiro Irie：“12-epi-phorbol-12,13-dibutyrate的合成和肿瘤促进活性”Biosci.Biochem.. 2429-2436（2000）。

Yu Nakagawa: "Synthesis and PKC isozyme surrogate binding of indothiolactam-V, a new thioamide analogue of tumor promoting indolactam-V"Bioorg.Med.Chem.Lett.. 10・18. 2087-2090 (2000)

中川佑：“吲哚硫内酰胺-V的合成和PKC同工酶替代物结合，一种促进肿瘤的吲哚内酰胺-V的新硫代酰胺类似物”Bioorg.Med.Chem.Lett.. 10・18 (2000)。