分裂酵母を用いたヘテロクロマチン形成・維持機構の解明

使用裂殖酵母阐明异染色质形成和维持机制

• 批准号: 12206045
• 负责人: 村上 洋太
• 金额: --
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12206045/
• 关键词: ヘテロクロマチン; 分裂酵母; CENP-B; ORC; クロマチン; CAF1

分裂酵母には3つのCENP-Bホモログ遺伝子(abp1,cbh1,2)およびORCについて解析をおこない以下の結果を得た。1)セントロメアではabp1,cbh1が、テロメアにおいてはcbh1が、mat locusではcbh1,2がそれぞれヘテロクロマチンの形成に関与していることを見いだした。特にセントロメア領域で詳細な解析をおこなったところabp1が実際セントロメア外側のotr領域に結合すること、abp1,cbh1それぞれの破壊株ではotrに存在するヘテロクロマチンタンパク質Swi6の量が顕著に減少していること、さらにこれらの破壊株でセントロメア機能が損なわれていることを見いだした(投稿準備中)。2)CENP-Bホモログの機能に関与する因子を検索する目的でAbp1をbaitとするtwo hybrid screeningをおこない、クロマチン再構成因子のサブユニットの一つSNF5ファミリーに属するタンパク質bap1遺伝子を得た。bap1遺伝子変異株を作成しその機能の検討を行ったところBap1は生育に必須でabp1と同じくセントロメア機能に関与することを見いだした。3)ORCのサブユニットの一つorp5の高温変異株のうちmating locusのヘテロクロマチンに影響を与える変異株がabp1と遺伝的相互作用を示すことを見いだした。4)Orp5とchrromatin assembly factor,CAF1のlarge subunit,Fip1が相互作用することをすでに見いだしていたが、さらにOrp5とFip1が遺伝的相互作用すること、fip1遺伝子破壊株ではmating locusのヘテロクロマチン構造が安定に維持されないことを見いだした。

Fission yeastには3つのCENP-Bホモログ伝子(abp1,cbh1,2)およびORCについてanalyticsをおこないThe following resultsをgetた. 1)セントロメアではabp1,cbh1が、テロメアにおいてはcbh1が、mat locusではcbh1,2がそれぞれヘテロクロマチンの成に关与していることを见いだした. Detailed analysis of the special field Side のotr field に combination すること、abp1,cbh1 それぞれのbreak 壊 strains ではotr にExistence In the するヘテロクロマチンタンパクquality Swi6 の顕与にREDuce していること、さらにこでセントロメア Functional damage なわれていることを见いだした (preparing for submission). 2)CENP-Bホモログのfunctionality and するfactorを検SOするpurposeでAbp1をbaitとするtwo hybrid screening screen, クロマチン reconstitution factor のサブユニットの一つSNF5ファミリーに belongs to するタンパクquality bap1 伝子を得た. Bap1 しそのfunctionalityの検questionを行ったところBap1は生The education must be the same as the function of the abbp1 and the function of the function. 3)ORCのサブユニットの一つorp5のHigh temperature 変different strainsのうちmating The interaction between the locus のヘテロクロマチンに and the える変different strain がabp1と伝 is shown by the すことを见いだした. 4)Orp5とchromatin assembly factor,CAF1のlarge subunit, Fip1 が interaction す る こ と を す で に 见 い だ し て い た が 、 さ ら に Orp 5 と Fip 1 が 伝 interaction す る こ と 、 fip 1 伝子波壊组ではmating locusのヘテロクロマチンstructuralが stableにmaintainされないことを见いだした.