カドヘリン依存細胞接触による細胞膜ラフリング及び運動の制御機構

钙粘蛋白依赖性细胞接触控制细胞膜波纹和运动的机制

• 批准号: 07F07621
• 负责人: 竹市 雅俊
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07F07621/
• 关键词: Nap1; カドヘリン; カテニン; 細胞運動; 細胞接触; ライブイメージング; Napl; lamellipodia; 接触阻害; アクチン; U251

U251グリア腫細胞株を用いて、細胞接触に依存した細胞運動の停止に関する分子機構の研究を続行した。前年度までに、細胞運動の制御因子Nap1が細胞接触時に、細胞周縁部から消失すること、また、これがN-cadherinおよびその機能を支えるαE-cateninに依存することを明らかにしていた。今年度は、この細胞に、Nap1-GFPを導入して、細胞接着時における勲態をライブイメージングにより観察した。その結果、細胞接触時、Nap1-GFPが速やかに細胞周縁部から消失するだけでなく、細胞質に拡散することを確認した。さらに、αE-cateninを除去した細胞ではこの消失が抑制された。一方、N-cadherinの除去ではNap1-GFPの挙動に対する効果が弱かったので、他のカドヘリンが存在する可能性が示唆された。実際、種々のカドヘリンに結合するβ-cateninが、N-cadherinノックダウン細胞の細胞間境界に観察された。そこで、U251細胞からβ-catenin共沈物を集め質量分析した結果、R-cadherinが含まれていることが分かった。これにより、カドヘリンの、接触依存運動停止における役割について、より精密に解析することが可能になった。本研究終了後は、Nap1が細胞接触領域から消える分子メカニズムについて理解を深めるため、両カドヘリン除去前後におけるNap1結合因子の違いを、質量分析により調べる実験を計画している。

U251 グ リ ア swollen cell lines を with い て, cell contact に dependent し た cell movement の stop に masato す る の molecular mechanisms を 続 line し た. Before the annual ま で に, cell movement の suppression factor Nap1 when contact に が cell, week 6 try か ら disappear す る こ と, ま た, こ れ が N - cadherin お よ び そ の function with を え る alpha E - catenin に dependent す る こ と を Ming ら か に し て い た. Our は, こ の cell に, Nap1 - GFP を import し て, cells were then に お け る 勲 state を ラ イ ブ イ メ ー ジ ン グ に よ り 観 examine し た. そ の results, cell contact, Nap1 - GFP が speed や か week try に cells か ら disappear す る だ け で な く, cytoplasmic に company, scattered す る こ と を confirm し た. Youdaoplaceholder0, αE-cateninを removes <s:1> た cells で で <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> が が が inhibits された. Side, N - cadherin の remove で は Nap1 - GFP の 挙 dynamic に す seaborne る unseen fruit が weak か っ た の で, he の カ ド ヘ リ ン が exist す が る possibility in stopping さ れ た. Be international, a 々 の カ ド ヘ リ ン に combining す る beta catenin が, N - cadherin ノ ッ ク ダ ウ ン boundary between cells の に 観 examine さ れ た. そ こ で, U251 cells か ら beta catenin shen total を set め quality analysis し た results, R - cadherin が containing ま れ て い る こ と が points か っ た. こ れ に よ り, カ ド ヘ リ ン の, contact dependent movement to stop に お け る service cut に つ い て, よ り precision analytical す に る こ と が may に な っ た. は after the end of this study, Nap1 が cell contact areas か ら え elimination る molecular メ カ ニ ズ ム に つ い て understand を deep め る た め, struck カ ド ヘ リ ン before and after removing に お け る Nap1 combination factor の violations い を, quality analysis に よ り adjustable べ る be 験 を project し て い る.

项目成果

Contact-dependent promotion of cell migration by the OL-protoc adherin-Napl interaction

OL-protoc 粘附蛋白-Napl 相互作用对细胞迁移的接触依赖性促进

• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of Cell Biology 182
• 作者: Nakao;S.;Platek;A.;Hirano;S.;Takeichi;M.
• 通讯作者: M.