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細胞間認識機構とがん特性

细胞间识别机制与癌症特征

基本信息

批准号：
01015043
负责人：
竹市雅俊
金额：
$ 5.5万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

偏平上皮がんで発現されるP型カドヘリンの遺伝子をcDNAをプローとしてクローニングした。その結果、遺伝子上流10Kbpを含む遺伝子全長のクローニングに成功した。次に、P型カドヘリン遺伝子の上流域を翻訳開始点の直前でCAT構造遺伝子に連結し、P型カドヘリンを発現している細胞および発現していない細胞に導入してCAT活性を測定し、この遺伝子のプロモーター活性を調べた。その結果、P型カドヘリンを発現する細胞でのみ活性がみられ、遺伝子上流中に細胞タイプ特異的な発現を支配する領域があるものと考えられた。また、翻訳開始点の270bp上流からCATに連結したときは、非翻訳領域を500bp以上含むにもかかわらず、同様のDNA構築でも全く活性が検出できず、翻訳開始点の近傍は転写に必須のようである。一方、遺伝子上流域のみで一応の特異的発現はみられたが、その発現量は非常に弱く、生体内の状態を反映するには不十分のように思われた。そこで、カドヘリンに特徴的な長いイントロンに着目してエンハンサー活性を調べた。前述のP型カドヘリン遺伝子上流を含むDNAのCAT遺伝子下流に、P型カドヘリン第一イントロンから16Kbpを切り出して6Kbpと10Kbpの2つのDNA断片に分けて、それぞれ順逆両方面に挿入した。その結果、イントロンのそれぞれの断片について、挿入方向と無関係に数倍から数十倍のCAT活性の増強がみられた。すなわちイントロンには、エンハンサーの活性が備えられていると言える。また、3Y1細胞を用い、srcによるトランスフォーメイションによりカドヘリンの発現が低下することなどを見いだした。

The flatness of the epithelium shows that there is no sign of type P, and there is no sign of cDNA. According to the results of the test, the 10Kbp of the upper stream of the baby contains the whole length of the child. The result is successful. In the second and P-type river basin, the starting point of the river basin flip is directly in front of the CAT to make a sub-link, and the P-type engine is used to show that the cell is loaded into the CAT activity test, and the cell activity is measured. The results show that there are significant differences in the activity of the cells in the upper stream of the P type, and that in the upper stream, the distribution of the cells in the upper stream dominates the field of communication. The starting point of 270bp, the upstream CAT link, the non-flip field 500bp, the same DNA port, and the flip start point, the upstream link, the link link, the active link, the starting point, the starting point, the starting point On the one hand, the water level of the river basin is very weak, and the state of the body reflects that it is not very good. Please keep an eye on the activity of the special students. The upstream of the aforementioned P-type device contains the DNA CAT sub-stream, the P-type 10Kbp sub-stream, the P-type 10Kbp sub-stream, the first 6Kbp fragment, the reverse DNA fragment, the 6Kbp fragment and the reverse stream. The results showed that the CAT activity was significantly higher than that of the normal control group (P < 0.01). I don't know what to say, but I don't know what to say. The 3Y1 cell is used, the src cell is used, the cell is low, and the cell is low.