ヒト染色体DNA切断とその修復機構

人类染色体DNA断裂及其修复机制

• 批准号: 20055017
• 负责人: 足立 典隆
• 金额: $ 2.88万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20055017/
• 关键词: トポイソメラーゼ; 遺伝子ノックアウト; ジーンターゲティング; Nalm-6

染色体DNA鎖切断の修復には多種多様な経路が関わっているため,さまざまなタイプのDNA鎖切断に対しての修復における各経路の役割や制御機構についてはよくわかっていない.本研究では,我々が最近開発したヒトNalm-6細胞を使った逆遺伝学的解析システムを利用して,染色体DNA鎖切断修復に関わる遺伝子のノックアウト細胞を系統的に作製し,得られた変異細胞の表現型を解析することにより,DNA鎖切断の生成機構やこれに対する応答・修復機構をヒト細胞で解析することを目的として研究を行った.本年度は,昨年度に引き続き,DNA鎖切断修復に関わる遺伝子を系統的にノックアウトしホモ変異細胞の取得を行った.得られたホモ変異細胞の解析から,相同組換え経路と非相同末端連結(NHEJ)経路との相対的役割に関するいくつかの知見を得ることができた.また,新規抗がん剤である化合物NK314や鉄キレート剤Dp44mTの細胞内ターゲットがトポイソメラーゼIIαであることを示すとともに,こうした薬剤や放射線類似作用物質が細胞内での非相同組換えに及ぼす影響を詳細に解析した.一方,NHEJ経路で働くと考えられているエンドヌクレアーゼArtemisがNHEJ非依存性の機能をもつ可能性が示唆されたため,他遺伝子との二重変異株の作製を通じた遺伝学的解析にも着手した.

Chromosome DNA lock cut の repair に は many many others な 経 road が masato わ っ て い る た め, さ ま ざ ま な タ イ プ の DNA lock cut に し seaborne て の repair に お け る 経 road cut や の service system of imperial institutions に つ い て は よ く わ か っ て い な い. This study で は, I 々 が recently opened 発 し た ヒ ト を Nalm - 6 cells make っ た inverse but 伝 learn analytical シ ス テ ム を using し て, chromosome DNA lock to cut off the repair に masato わ る posthumous son 伝 の ノ ッ ク ア ウ ト cells を し the に cropping system, have to ら れ た - idioblasts の phenotype を parsing す る こ と に よ り, DNA lock cut の production mechanism や こ れ に す seaborne る 応 answer, repair agency を ヒ ト cells で parsing す る こ と を purpose と し を line っ て research た. は this year, yesterday's annual に き 続 き, lock cut DNA repair に masato わ る posthumous son 伝 を system に ノ ッ ク ア ウ ト し ホ モ を row - different cell の っ た. Have ら れ た ホ モ - idioblasts の parsing か ら, in the same group え 経 と the same end link (NHEJ) と 経 road cut に の phase of seaborne service masato す る い く つ か の knowledge を must る こ と が で き た. ま た, new rules anti が ん tonic で あ る compound NK314 や iron objects キ レ ー ト tonic Dp44mT の intracellular タ ー ゲ ッ ト が ト ポ イ ソ メ ラ ー ゼ II Alpha で あ る こ と を shown す と と も に, こ う し た 薬 tonic や radiation effects similar material が intracellular で の in the same group え に and ぼ す effect を に detailed resolution し た. Road side, NHEJ 経 で 働 く と exam え ら れ て い る エ ン ド ヌ ク レ ア ー ゼ Artemis が NHEJ the dependence function of の を も が つ possibility in stopping さ れ た た め, he survived 伝 と の double - を through the different strains の cropping じ た heritage 伝 learn analytical に も to し た.

项目成果

The iron chelator Dp44mT causes DNA damage and selective inhibition of topoisomerase-II a in breast cancer cells

铁螯合剂 Dp44mT 在乳腺癌细胞中引起 DNA 损伤并选择性抑制拓扑异构酶-II a

• 发表时间: 2009
• 期刊: Cancer Res 69
• 作者: Rao;et.al.
• 通讯作者: et.al.

Topoisomerase II a inhibition following DNA transfection greatly enhances random integration in a human pre-B lymphocyte cell line

DNA 转染后的拓扑异构酶 II a 抑制大大增强了人前 B 淋巴细胞系中的随机整合

• 发表时间: 2009
• 期刊: Biochem. Biophys. Res. Commun (in press)(未定)
• 作者: Toyoda;et.al.
• 通讯作者: et.al.

FFN1 functions in long patch base excision repair under conditions of oxidative stress in vertebrate cells.

FFN1 在脊椎动物细胞氧化应激条件下的长补片碱基切除修复中发挥作用。

• 发表时间: 2010
• 期刊: Mol.Cancer Res. 8
• 作者: Adachi;N.;et al.
• 通讯作者: et al.

NK314, a topoisomerase II inhibitor that specifically targets the a isoform

NK314，一种拓扑异构酶 II 抑制剂，专门针对 a 亚型

• 发表时间: 2008
• 期刊: J. Biol. Chem 283
• 作者: Toyoda;et.al.
• 通讯作者: et.al.