構造変換酵素PPIaseの転写調節反応における遺伝学的・生化学的解析

结构转换酶PPIase转录调控反应的遗传和生化分析

• 批准号: 09878124
• 负责人: 堀越 正美
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09878124/
• 关键词: PPIase; 構造変換; シャペロン; TFIID; two-hybrid法; 分裂酵母; 転写活性化; 転写因子

蛋白質の構成変換を酵素学的に行うペプチジル・プロリル・シス・トランス・イソメラーゼ(PPIase)に着目し、その酵素の意義と機能の解析を核局在性酵素を中心として進めた。1)ペプチジル・プロリル・シス・トランス・イソメラーゼ(PPIase)をコードする遺伝子の分裂酵母からの単離と解析分裂酵母を用いた遺伝学的解析を進めるために、PPIase酵素活性ドメイン領域を用いたPCR法により分裂酵母PPIaseをコードする遺伝子を分裂酵母ゲノムから単離した。この遺伝子をコードするPPIaseとすでに単離されている他種PPIaseとの一次構造比較により、多様なPPIaseの進化的保存性と細胞内局在性との間に相関関係のあることを見出した。単離したPPIaseは核局在性を担うことが予想されたが、実際にその局在性を調べたところ、核に局在していることを確かめられ、このルールの妥当性を支持する結果となった。更に核局在性PPIaseが酵素活性ドメイン領域以外に長い領域を持つことからその一次構造を比較したところ、進化的保存性のある様々なドメイン領域を持つことが明らかとなった。2)ペプチジル・プロリル・シス・トランス・イソメラーゼ(PPIase)による転写活性化能の検出PPIaseがTFIIDのサブユニットと相互作用する因子として単離されているので、PPIaseによる転写活性化能を解析したところ、PPIase自身が転写を活性化する能力を有することが示された。3)ペプチジル・プロリル・シス・トタンス・イソメラーゼ(PPIase)と相互作用する因子群の単離PPIaseの機能解析を進める目的で、PPIaseと相互作用する因子群をtwo-hybrid法より多種単離した。

Protein の composition variations in line を enzymes learn に う ペ プ チ ジ ル · プ ロ リ ル · シ ス · ト ラ ン ス · イ ソ メ ラ ー ゼ (PPIase) に し, そ の meaning と の enzyme function の parsing を nuclear agency in the center of the sexual enzyme を と し て in め た. 1) ペ プ チ ジ ル · プ ロ リ ル · シ ス · ト ラ ン ス · イ ソ メ ラ ー ゼ (PPIase) を コ ー ド す る posthumous son 伝 の split yeast か ら の 単 analytical split from と yeast を with い た heritage 伝 learn analytical を into め る た め に PPIase and enzyme activity ド メ イ を ン field with い た PCR method に よ り split yeast PPIase を コ ー ド Youdaoplaceholder0 offspring 伝 を splitting yeast ゲノム ゲノム ら単 ら単 separating た た. こ の posthumous son 伝 を コ ー ド す る PPIase と す で に 単 from さ れ て い る he PPIase と の a structural comparison に よ り, many others な PPIase の evolution preservation sex と cells inside bureau in sexual と の に phase between masato masato is の あ る こ と を shows し た. 単 from し た PPIase は nuclear agency in the sexual を bear う こ と が to think さ れ た が, be interstate に そ の bureau in the sexual を adjustable べ た と こ ろ, nuclear に bureau in し て い る こ と を か indeed め ら れ, こ の ル ー ル の justice を support す る results と な っ た. More に nuclear agency in the sexual PPIase が enzyme activity ド メ イ ン areas outside に long い を hold つ こ と か ら そ の a tectonic を compare し た と こ ろ, evolutionary save の あ る others 々 な ド メ イ を ン field hold つ こ と が Ming ら か と な っ た. 2) ペ プ チ ジ ル · プ ロ リ ル · シ ス · ト ラ ン ス · イ ソ メ ラ ー ゼ (PPIase) に よ る planning can write activeness の 検 out PPIase が TFIID の サ ブ ユ ニ ッ ト と interaction す る factor と し て 単 from さ れ て い る の で, PPIase に よ る planning can write activeness を parsing し た と こ ろ, PPIase itself Youdaoplaceholder0 write を to activate する ability を there is する とが とが とが to show された. 3) ペ プ チ ジ ル · プ ロ リ ル · シ ス · ト タ ン ス · イ ソ メ ラ ー ゼ interaction (PPIase) と す る factor group の 単 from PPIase の function analytical を into め る purpose で, PPIase と interaction す る factor group を two hybrid method よ り multiple 単 from し た.

项目成果

T.Yamamoto et al.: "Novel substrate specificity of the histone acetyltransferase activity of HIV-1 Tat-interacive protein Tip60" J.Biol.Chem.272. 30595-30598 (1997)

T.Yamamoto 等人：“HIV-1 Tat 相互作用蛋白 Tip60 的组蛋白乙酰转移酶活性的新型底物特异性”J.Biol.Chem.272。

T.Yamamoto,et al.: "Molecular genetic elucidation of the tripartite structure of the Schizosaccharomyces pombe 72 kDa TFIID subunit which contains a WD40 structural motif" Genes Cells. 2. 245-254 (1997)

T.Yamamoto 等人：“含有 WD40 结构基序的粟酒裂殖酵母 72 kDa TFIID 亚基三重结构的分子遗传学阐明”Genes Cells。

J.Nishikawa,et al.: "Drosophila TAF_<II>230 and thetranscriptional activator VP16 bind competitively to the TATA box-binding domain of the TATA box-binding protein" Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.94. 85-90 (1997)

J.Nishikawa等人：“果蝇TAF_<II>230和转录激活剂VP16竞争性地结合到TATA盒结合蛋白的TATA盒结合结构域”Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.94。

T.Umehara et al.: "Restriced expression of a member of the transcription elongation factor S-II family in testicular germ cells during and after meiosis family in testicular germ cells during and after meiosis" J.Biochem.121. 598-603 (1997)

T.Umehara 等人：“转录延伸因子 S-II 家族成员在减数分裂期间和减数分裂后睾丸生殖细胞中的限制表达”J.Biochem.121。

Y.Tao,et al.: "Specific interactions and potential functions of human TAF_<II>100" J.Biol.Chem.272. 6714-6721 (1997)

Y.Tao 等人：“人类 TAF_<II>100 的特定相互作用和潜在功能”J.Biol.Chem.272。