Lösungsstruktur der Ras-Bindungsdomäne von Nore1 und strukturelle Charakterisierung der Nore1-Ras-Mst1-Interaktion

这个项目需要Nore 1（新Ras效应子）的Ras结合域的结构，Ras的效应子，在Ras结合域中具有凋亡蛋白的作用。在其他的Ras-Effektoren基因组中，Nore 1没有自身的酶活性。Die Minimaldomäne für effektive Bindung an Ras ist mit 161 Aminosäuren deutlich größer als die anderer Rasbindungsdomänen mit bekannter Struktur und läßt daher neue Strukturmotive erwarten. Nore 1的Ras-bindenden域的三维结构可以用多维异核NMR方法检测韦尔登。采用具有韦尔登特征的Ras方法进行相互作用。用蛋白质溶液和同位素韦尔登、13碳组成的内标法测定复合物的结构参数，可以解决高分子复合物的结构问题，使复合物的结构参数更加一致。

Das beantragte Projekt beschäftigt sich mit der Strukturaufklärung der Ras-bindenden Domäne von Nore1 (Novel Ras effector), einem Effektor von Ras, der wahrscheinlich eine wichtige Rolle bei der Ras-abhängigen Steuerung der Apoptose spielt. Im Gegensatz zu anderen Ras-Effektoren scheint Nore1 keine eigene enzymatische Aktivität zu haben. Die Minimaldomäne für effektive Bindung an Ras ist mit 161 Aminosäuren deutlich größer als die anderer Rasbindungsdomänen mit bekannter Struktur und läßt daher neue Strukturmotive erwarten. Die dreidimensionale Struktur der Ras-bindenden Domäne von Nore1 soll mit multidimensionalen heteronuclearen NMR-Methoden am isotopenangereicherten Protein aufgeklärt werden. Anschließend soll die Interaktion mit Ras mit NMR-Methoden charakterisiert werden. Für die darauffolgende Strukturbestimmung im Komplex mit Ras soll das Protein mit der Intein-Methode partiell mit den Isotopen 2H,15N und 13C angereichert werden, um die Zuordnungsproblematik im hochmolekularen Komplex zu erleichtern und die Strukturbestimmung zu beschleunigen.