权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

IL-1シグナル伝達におけるIκBαキナーゼ群の役割の解析

IκBα激酶在IL-1信号转导中的作用分析

基本信息

批准号：
08770232
负责人：
久野耕嗣
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770232/
关键词：
NFκB IκB キナーゼ

项目摘要

我々は炎症性サイトカインであるIL-1,TNFやLPS刺激時におけるIL-8遺伝子発現機構を明らかにする目的で、同遺伝子発現に重要なNFκBの活性化機構を調べている。我々はヒト単球系細胞株THP-1の細胞抽出液中にIκBαに会合してリン酸化するIκBα会合キナーゼを同定し,そのリン酸化部位がIκBαのC末端領域酸性ドメインのSer/Thr残基であることを見い出した(Kuno et al.J.Biol.Chem.1995)。その後Barroga C.F.(PRONAS,1995),Lin R.(Mol.Cell.Biol,1996),McElhinny J.A.(Mol.Cell.Biol.,1996)らの複数のグループにより、カゼインキナーゼIIがIκBαのC末端領域の酸性ドメインのSer/Thr残基を構成的にリン酸化すると報告された。一方我々はこれまでTHP-1細胞由来のIκBα会合キナーゼをRedセファロース、DEAEカラム等を用いて部分精製を行ってきたが、今回IκBα会合キナーゼ活性がヘパリンHPLCカラムで2つのピークに分離されることを見い出した。また抗カゼインキナーゼII抗体を用いたウエスタンブロット解析の結果から、ヘパリンカラムの低塩濃度で溶出されるピークはカゼインキナーゼIIであるが、高塩濃度で溶出されるピークはカゼインキナーゼIIとは異なるIκBα会合C末端キナーゼであることがわかった。THP-1細胞粗抽出液におけるIκBα会合キナーゼ活性は、無刺激である程度検出されるものの、LPS刺激時に顕著に増加する。これは構成的な活性を示すカゼインキナーゼIIと、LPS刺激によりその活性が誘導される我々の同定したIκBα会合C末端キナーゼの総和と考えられる。IκBα会合C末端キナーゼについては現在さらに精製を進めており,今後そのcDNAのクローニングとアンチセンス法等による不活性化を行い、NFκBの活性化における役割を調べる予定である。

I am a inflammatory disease, IL-1, TNF, LPS stimulation, IL-8, etc. The mechanism for activating NFκB has the same purpose as the mechanism for activating NFκB. The IκBα concentration of IκBα in the cell extract of the THP-1 cell line was determinedし,そのリンacidification site がIκBαのC-terminal domain acidic ドメインのSer/Thr residue であることを见い出した(Kuno et al. J. Biol. Chem. 1995). Barroga C.F.(PRONAS,1995),Lin R.(Mol.Cell.Biol,1996),McElhinny J.A.(Mol.Cell.Biol.,1996)らのpluralのグループにより、カゼインキナーゼI The C-terminal domain of IκBα is composed of acidic Ser/Thr residues and is a acidic acidification report. Partially purified from IκBα fusion キナーゼをRed セファロース, DEAE カラム, etc., where THP-1 cells originate.を行ってきたが, this time IκBα meets キナーゼActive がヘパリンH PLCカラムで2つのピークにされることを见い出した. Anti-Analysis Anti-Analysis II Antibodies Analyzed by Analysis Anti-Analysis Antibody Result: から、ヘパリンカラムのlow concentration でdissolution されるピークはカゼインキナーゼII solution, high concentration solution solutionゼIIとはisoなるIκBα meets C-terminal キナーゼであることがわかった. THP-1 cell crude extract shows IκBα concentration and activity, no stimulation, no stimulation, no stimulation, and no stimulation with LPS. The activity of これは is composed of すカゼインキナーゼIIと, LPS stimulates the activity of によりそのがinduced される我々の同定したIκBα meets the C-terminal キナーゼの総 and と卡えられる. IκBα meets the C-terminal キナーゼについてはnow the さらにrefined をjinめており, the future そのcDNAのクローニThe ングとアンチセンス method and so on are inactivated and activated, and NFκB's activated and cut and adjusted are determined.