3'末端特異的cDNAライブラリを用いた免疫組織特異的分子の探索

使用 3 末端特异性 cDNA 文库搜索免疫组织特异性分子

• 批准号: 08770237
• 负责人: 田中 稔之
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770237/
• 关键词: CD4^+T細胞; 組織特異的遺伝子; リンパ節; 3'末端特異的cDNAライブラリ; EST; cDNAクローニング; 組織形成; 遺伝子発現

免疫応答の調節やリンパ組織の形成に関わる分子群を同定することを目的とし、以下の方法を用いてマウスリンパ節CD4^+T細胞における遺伝子発現プロフィルの解析を行った。【1】3'末端特異的cDNAライブラリの作製と塩基配列の決定腸管膜リンパ節CD4^+T細胞からmRNAを調整し、Okuboらの方法に準じて3'末端特異的cDNAライブラリを作製した。ここから1186クロンの塩基配列を無作為に決定し、塩基配列の相互比較から、90%以上の相同性を持つクロンを同一と見なし、その出現頻度を解析した。その結果、配列を決定した1186クロンは458種類の遺伝子に分類され、全体の約74%に相当する881クロンは2回以上出現する153の遺伝子に由来し、残りの305クロンは1回の出現のみであることが示された。【2】CD4^+T細胞における遺伝子発現プロフィルの解析データベース検索の結果、458の遺伝子は、148の既知遺伝子と310の新規遺伝子であることが明らかになった。また、今回同定した既知遺伝子のなかには、T細胞抗原受容体(TCR)、細胞接着分子およびレセプター型チロシンキナーゼなどの機能分子が認められた。得られた遺伝子発現プロフィルと肝臓、腎臓などを含む22の他組織の解析結果を比較し、CD4^+T細胞ライブラリにのみ発現が検出されたものをリストアップした。このうち、今回の解析過程で2回以上出現する遺伝子は28種類認められ、そのうち6種類はTCRや造血系に特異的なチロシンフォスファターゼなどの既知遺伝子であり、他の22種類は新規遺伝子であった。現在、新規分子の発現を精査するとともに、その構造の決定を試みている。

The molecular groups involved in the formation of immune response regulatory tissues are identified for this purpose. The following methods are used to analyze the expression of CD4 +T cells [1] 3'-terminal-specific cDNA transcription and gene alignment determine the regulation of CD4^+T cell mRNA in intestinal membrane. Okubo's method accurately regulates the 3'-terminal-specific cDNA transcription. The base alignment of the 1186 samples is determined by no action, and the base alignment is compared with each other. More than 90% of the samples are identical. The frequency of occurrence is analyzed. As a result, the distribution of genes in 458 species was determined, and about 74% of all genes were classified, corresponding to 881 genes that appeared more than 2 times, 153 genes that appeared more than 1 time, and 305 genes that appeared more than 1 time. [2] CD4^+T cell gene discovery, analysis, test results, 458 genes, 148 known genes and 310 new genes. The functional molecules of T cell antigen receptor (TCR), cell adhesion molecule (CAM) and cell adhesion molecule (CAM) are recognized. The results of analysis of CD4 +T cells in liver, kidney and other tissues were compared. The analysis process of this paper has more than 2 times. The genetic code is 28 kinds of recognition, 6 kinds of TCR and hematopoietic system. The specific genetic code is 22 kinds of new genetic code. Now, the new molecular development of the fine investigation, the structure of the decision to try

项目成果

S.Ehl et al.: "A comparison of efficacy and specificity of three NK depleteing antibodies" J.Immunol.Methods. (in press).

S.Ehl 等人：“三种 NK 消耗抗体的功效和特异性的比较”J.Immunol.Methods。

P.Chastagner et al.: "Lack of intermediate-affinity interleukin-2 receptor in mice leads to dependence on interleukin-2 receptor α,β,γ chain expression for T cell growth" Eur.J.Immunol.26. 201-206 (1996)

P.Chastagner 等人：“小鼠中缺乏中等亲和力的白细胞介素 2 受体导致 T 细胞生长依赖于白细胞介素 2 受体 α、β、γ 链表达”Eur.J.Immunol.201-206。 (1996)

Y.Miyakawa et al: "Establishment of human granulocyte-macrophage colony stimulating factor producing transgenic SCID mice" Br.J.Haematol.95. 437-442 (1996)

Y.Miyakawa 等人：“产生人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的转基因 SCID 小鼠的建立”Br.J.Haematol.95。

S.Yano et al.: "Novel metastatic model of human lung cancer in NK-cell depleted SCID mice" Int.J.Cancer. 67. 211-217 (1996)

S.Yano 等人：“NK 细胞耗尽 SCID 小鼠中人类肺癌的新型转移模型”Int.J.Cancer。