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ランダムペプチドライブラリーを利用した非RGD型インテグリンの認識ペプチドの検索

使用随机肽库搜索非RGD整合素的识别肽

基本信息

批准号：
07680666
负责人：
関口清俊
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

基底膜への細胞接着を媒介するインテグリンα6β1によって特異的に認識されるペプチド配列をランダムな15アミノ酸残基を表面に提供しているファージライブラリー(以下、ファージ・ディスプレーライブラリー)を用いて検索し、以下の結果を得た。1)インテグリンα6鎖に対する抗ペプチド抗体を兎を用いて作成した。2)この抗体を用いてヒト胎盤の界面活性剤抽出液よりインテグリンα6β1を精製した。3)精製α6β1を用いてファージ・ディスプレーライブラリーを繰り返し選別し、得られたファージ粒子に提示されているペプチドをDNA塩基配列より決定した。その結果、3種類のペプチド(P1,P2,P3)を提示したファージが濃縮されていることが判明した。4)この3種類のペプチドを化学的に合成し、インテグリンα6β1との親和性をラミニンとα6β1との結合阻害活性を指標として解析した。その結果、親和性はP3>P2>P1の順であることが判明した。5)親和性の一番強いP3ペプチドはα6β1に対して特異性を示し、インテグリンα5β1とフィブロネクチンとの結合は阻害しなかった。6)P3ペプチドのアミノ酸の並び方をかえるとα6β1への親和性は著明に低下した。7)P3ペプチドをウシ血清アルブミンに結合させたものを基質上にコートすると、細胞の強い接着と進展が観察された。以上の結果は、P3ペプチドがインテグリンα6β1によって特異的に認識される新規ペプチドであることを示している。

In the basement membrane, the cells of the basement membrane were then assigned to the surface of the base membrane, which was specially designed for the detection of alpha 6 β 1, acid residues, acid residues, acid residues and acid residues. 1) the anti-alpha 6 antibody was used to make the antibody. 2) the antibody was used to detect the interfacial activity of the fetus, and the extract was purified against α 6 β 1. 3) the precision of alpha 6 β 1 should be determined by the determination of the number of particles in the DNA column. According to the results of the test, the results of the three categories (P1, P2, and P3) are prompted to show that you are not aware of the situation. 4) the synthesis, alpha 6 β 1 and sexual antioxidants of the three kinds of chemical compounds were analyzed by the combination of inhibitory activity and inhibitory activity. The results of the tests, the results of the results, and the results of the sexual tests. 5) the combination of P3 and P3, α 6 β 1, α 6 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 6 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1 6) P3, please do not know how to treat α 6 β 1 and sex. 7) P3, serum samples, serum samples, blood samples, and cells. The results of the above results show that the information of P3