利用纤连蛋白自组装结构域构建新型功能性细胞外超结构-猫眼课题宝

利用纤连蛋白自组装结构域构建新型功能性细胞外超结构

批准号：

09217254

负责人：

関口清俊

金额：

$0.96万

依托单位：

Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

财政年份：

1997

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

1997 至 --

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09217254/

关键词：

フィブロネクチン細胞外マトリックスマトリックス工学細胞増殖因子創傷治癒

项目摘要

项目成果

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フィブロネクチンの自己会合ドメインと細胞増殖因子をキメラ化することにより、細胞外マトリックスへの自己組織化能を有する活性持続型の細胞増殖因子を作成し、その有用性の検証を行った。細胞増殖因子としては、EGFファミリーに属するTGFαを用いた。キメラ蛋白質の作成は、ミニフィブロネクチン発現ベクターpMTX1のNotl部位にTGFαのcDNAをフレームが合うように挿入し、これをヒトがん細胞HT1080細胞に強制発現させて行った。培地に分泌されたキメラ蛋白質はゼラチンカラムを用いて精製した。得られたミニフィブロネクチン-TGFαキメラ蛋白質は、フィブロネクチン同様、細胞外マトリックスへの自己組織化能を有する一方、TGFαとほぼ同じ比活性の細胞増殖促進活性、細胞形質転換活性を示した。また、インタクトなTGFαと比べて、より低濃度で活性を発現し、一旦細胞とインキュベートした後は細胞を洗浄してもその活性は保持された。次に、このマトリックス組み込み型細胞増殖因子の有用性を創傷治癒モデルを用いて検討した。兎耳の皮膚欠損モデルを用い、インタクトTGFαとキメラ型TGFαの治癒促進効果を比較したところ、マトリックス組み込み型TGFαの方がインタクトTGFαに比べて治癒促進活性が強いことが組織化学的に示された。しかし、兎ごとの治癒速度のばらつきが大きいため、定量的な有意差を示すには至らなかった。一方、兎角膜の創傷治癒モデルを用いて両者の活性の違いを比較したところ、皮膚の創傷治癒モデルに比べてより顕著な治癒促進活性がマトリックス組み込み型TGFαに認められた。この活性の差は、統計的に有意であることが確認された。以上の結果は、今回作成したマトリックス組み込み型増殖因子が創傷の治癒促進に有用であることを示している。

期刊论文(6)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

Fukushima,Y.,et al.: "Integrin α3β1-Mediated interaction with laminin-5 stimulates adhesion,migration,and invasion of malignant glioma cells." International Journal of Cancer. 印刷中. (1998)

Fukushima, Y., et al.：“整合素 α3β1 与层粘连蛋白 5 的相互作用刺激恶性神经胶质瘤细胞的粘附、迁移和侵袭。”（国际癌症杂志）。

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

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