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フィブロネクチンの自己会合ドメインを利用した新機能細胞外超構造の構築

利用纤连蛋白自组装结构域构建新型功能性细胞外超结构

基本信息

批准号：
09217254
负责人：
関口清俊
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

フィブロネクチンの自己会合ドメインと細胞増殖因子をキメラ化することにより、細胞外マトリックスへの自己組織化能を有する活性持続型の細胞増殖因子を作成し、その有用性の検証を行った。細胞増殖因子としては、EGFファミリーに属するTGFαを用いた。キメラ蛋白質の作成は、ミニフィブロネクチン発現ベクターpMTX1のNotl部位にTGFαのcDNAをフレームが合うように挿入し、これをヒトがん細胞HT1080細胞に強制発現させて行った。培地に分泌されたキメラ蛋白質はゼラチンカラムを用いて精製した。得られたミニフィブロネクチン-TGFαキメラ蛋白質は、フィブロネクチン同様、細胞外マトリックスへの自己組織化能を有する一方、TGFαとほぼ同じ比活性の細胞増殖促進活性、細胞形質転換活性を示した。また、インタクトなTGFαと比べて、より低濃度で活性を発現し、一旦細胞とインキュベートした後は細胞を洗浄してもその活性は保持された。次に、このマトリックス組み込み型細胞増殖因子の有用性を創傷治癒モデルを用いて検討した。兎耳の皮膚欠損モデルを用い、インタクトTGFαとキメラ型TGFαの治癒促進効果を比較したところ、マトリックス組み込み型TGFαの方がインタクトTGFαに比べて治癒促進活性が強いことが組織化学的に示された。しかし、兎ごとの治癒速度のばらつきが大きいため、定量的な有意差を示すには至らなかった。一方、兎角膜の創傷治癒モデルを用いて両者の活性の違いを比較したところ、皮膚の創傷治癒モデルに比べてより顕著な治癒促進活性がマトリックス組み込み型TGFαに認められた。この活性の差は、統計的に有意であることが確認された。以上の結果は、今回作成したマトリックス組み込み型増殖因子が創傷の治癒促進に有用であることを示している。

You can learn how to do it by yourself. You can make it by yourself, and you can use it by yourself. The cellular colonization factors, such as EGF and TGF α, belong to the genus "cytopathic". In this case, you can see that the pMTX1 Notl is TGF α, cDNA, cDNA, TGF, HT1080, HT1080, cell, protein, protein and protein. Pei Di secreted the protein and used the essence. The results showed that there was one side of TGF α protein, one side of extracellular protein, one side of TGF α, the same activity of cell proliferation, the activity of cytoskeleton and cell shape. The activity of TGF α is higher than that of the control, and the activity of the cell is low. Once the cell is washed, the activity of the cell is maintained. In the second place, we should use the cell colonization factor, the useful factor, the treatment factor, the cell proliferation factor, the cell proliferation factor, the cell proliferation The therapeutic effect of TGF α was stronger than that of histological chemistry in the treatment of TGF α. The speed of treatment is very high, and the quantity of intentional difference is not enough. On the one hand, the cornea was used to treat the disease. The active drug was used to compare the activity of the cornea. The skin was used to promote the activity of TGF α. The activity is poor and the statistics are intended to confirm the activity. According to the results of the above results, this time, we have made a positive response to the prevention and treatment of human reproductive factors in order to promote the development of useful drugs.