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基底幕による細胞機能制御の分子的基盤の解明

阐明基底帘调节细胞功能的分子基础

基本信息

批准号：
11139233
负责人：
関口清俊
金额：
$ 4.8万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

成体基底膜の主要な接着分子であるα4鎖およびα5鎖を含むラミニンを精製し、その生理活性を細胞接着活性、レセプター結合特異性、およびストレスファイバー・接着斑の形成に着目して解析し、以下の成果を得た。(1)ラミニン-8の精製:38種類のヒト癌細胞株について各ラミニンα鎖の発現をRT-PCRによりスクリーニングし、グリオーマ細胞株T98Gがα4鎖を選択的に発現していることを見いだした。また、ラミニンα4鎖を特異的に認識する単クローン抗体を作成し、T98G細胞が培養上清中にα4鎖を含むラミニンを分泌していることを確認した。これらの知見に基づき、大量培養したT98G細胞の培養上清より、硫安沈澱、ゲルろ過、およびラミニンβ1鎖に対する単クローン抗体を用いたアフィニティークロマトグラフィーにより、α4β1γ1の組成をもつラミニン-8を均一に精製することに成功した。(2)ラミニン-8の生理活性:ラミニン-8はラミニン-5やラミニン-10/11よりも弱く、ラミニン-1とほぼ同程度の細胞接着活性をもつこと、また、ラミニン-8への細胞接着はインテグリンα6β1とα3β1の両方を介しておこることを明らかにした。(3)ラミニン-10/11生理活性:ラミニン-10/11は非常に強い細胞接着活性を有するにもかかわらず、フィブロネクチンで見られるようなストレスファイバーや接着斑の形成をほとんど誘導しないことを見いだした。また、ラミニン-10/11に接着した細胞ではRacが速やかに活性化されることを明らかにした。(4)インテグリンα3β1に結合する30kDa蛋白質の同定:インテグリンα3β1をヒト胎盤から精製する際に、30kDaの蛋白質が一緒に精製されることを見つけ、この30kDa蛋白質が膜4回貫通型蛋白質ファミリーのCD151であることを同定した。

The adult basement membrane is mainly followed by molecules such as alpha 4 and alpha 5, which contains sperm, physiological activity, cellular activity, specific properties, and plaque formation. (1) the cancer cell line T98G α 4 was selected for the detection of cancer cell line T98G α 4. (1) the cancer cell line T98G α 4 was selected for the detection of cancer cell lines of 38 species of cancer. The supernatant of T98G cells was cultured in the supernatant of T98G cells, and the supernatant of T98G cells was secreted. The supernatant of T98G, thiazepam, thiazolidine, thiazolidine, β 1, β 1, β 1, β 1, β 1, β 1, β 1, β 1, β 1, β 1, α 4 β 1 γ 1, α 4 β 1 γ 1, α 4 β 1 γ 1, α 4 β 1 γ 1, α 4 β 1 γ 1, α 4 β 1 γ 1, α 4 β 1 γ 1, α 4 β 1, γ 1, α 4 β 1, γ 1, α 4 β 1, γ 1, α 4 β 1, γ 1, α 4 β 1, γ 1, α 4 β 1, γ 1, α 4 β 1, γ 1, α 4 β 1, γ 1, α 4 β 1, γ 1, α 4 β 1 γ 1. (2) the physiological activity of the virus: the physiological activity of the virus is the same as that of the cell with the same degree of activity, which is followed by the introduction of the formula of α 6 β 1, α 3 β 1 and so on. (3) the physiological activity of pedigree-10 raceme 11 is very strong, and then the cells are very strong. The cells are very active. Make sure that you don't know what to do, and then click the cell, Rac, speed, activate, activate, make sure that you are aware of the situation. (4) the expression of α 3 β 1 protein in combination with 30kDa protein was determined as follows: α 3 β 1 protein in fetus, sperm in fetus, 30kDa protein in sperm, 30kDa protein in the membrane, CD151 protein in the membrane.