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基底膜による上皮組織の形成および再生の制御機構

基底膜对上皮组织形成与再生的控制机制

基本信息

批准号：
14034231
负责人：
関口清俊
金额：
$ 4.35万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

上皮細胞の細胞間接着部位に局在するインテグリンα3β1-CD151複合体の生理機能を解明するため、green fluorescent protein(以下GFP)を付加したCD151をヒトA431細胞に過剰発現させ、細胞間接着への影響をカルシウムスウィッチ法を用いて解析した。その結果、CD151を過剰発現させた細胞では、対照の細胞と比べて、カルシウム再添加後の細胞接着形成が有意に亢進していることがわかった。特に、E型カドヘリンのpuncta形成が有意に促進されていた。また、カルシウム再添加後のE型カドヘリンのpuncta形成はプロテインキナーゼCの阻害剤で強く阻害され、一方で同キナーゼを活性化するフォルボールエステルで促進された。以上の結果は、CD151が関与する細胞間接着形成にプロテインキナーゼCが関与していることを強く示唆している。実際、CD151の過剰発現によるE型カドヘリンのpuncta形成の亢進に伴って、プロテインキナーゼCのアイソフォームの一つが強く細胞間接着部位に集積することが観察された。次に、CD151による細胞間接着の制御の分子機構を明らかにするため、CD151から細胞内に伝達されるシグナルについて解析した。具体的には、基質に固相化したCD151抗体を用いて細胞表面のCD151を捕捉したところ、細胞内蛋白質(特にsrc family kinase)のチロシンリン酸化が強く誘導されることを見いだした。この結果は、CD151による細胞間接着の制御にsrc family kinaseが関与していることを強く示唆している。

The physiological function of α3β1-CD151 complex in epithelial cells was studied by the method of green fluorescent protein(GFP) and the effect of CD151 protein on the development of epithelial cells. As a result, CD151 was detected in cells, and the cells were then added to form cells that were intentionally stimulated. Special, E-type structure and puncta formation are intentionally promoted. In addition, the puncta formation of the E-type button after the addition of the kalashime can strongly inhibit the damage of the inhibitor, and promote the activation of the same inhibitor. These results indicate that CD151 is involved in the formation of intercellular interactions. In fact, the excessive occurrence of CD151 was accompanied by the increased formation of E-type puncta, which was observed to accumulate at a strong intercellular junction of the PROTEINKINANA-C. CD151 and CD152 are the molecular mechanisms for the regulation of cellular adhesion. Specific CD151 antibodies are used to capture CD151 on cell surfaces and to induce intracellular protein (especially src family kinase) acidification. The result is that CD151 is involved in the control of intercellular adhesion and src family kinase is involved in the control of intercellular adhesion.