ジーンターゲティング法を用いたIL-6シグナル伝達分子の解析

使用基因打靶方法分析IL-6信号分子

• 批准号: 06670368
• 负责人: 吉田 進昭
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670368/
• 关键词: ジーンターゲティング; 相同的組換え; 転写因子; NF-IL6; マクロファージ; サイトカイン; リステリア; 細胞内寄生細菌

NF-IL6は、急性炎症において活性化される多くのサイトカインや急性期蛋白遺伝子の転写、マクロファージの分化や活性化に関与している。ジーンターゲティングにより作製されたNF-IL6欠損マウスは易感染性を示し、わずか500cfuという少量のリステリアを腹腔内に投与しただけで全例5日以内に死亡した。これは同じ細胞内寄生細菌であるサルモネラに対しても同様である。リステリアの最終的排除はマクロファージによりなされるため、このマウスにおけるマクロファージ機能を解析した。遊走性、貪食能には異常がなく、活性化の示標として調べられた細胞表面のMac-1、Fc_γR、MHCクラスII、LFA-1等の誘導にも異常が認められなかった。多くの炎症性サイトカイン(IL-1、IL-6、TNF_α等)も正常に産生されていたが、G-CSFはマクロファージと線維芽細胞においてのみ誘導が弱く、NF-IL6が組織特異的にG-CSF遺伝子の転写を制御している可能性が示唆された。これまでの研究で、リステリア感染に重要とされるIFN_γやTNF_αは正常に産生されており、エフェクター分子として重要だと思われる一酸化窒素(NO)の産生にも障害はみられなかった。NO合成酵素阻害剤であるNMMGを用いた実験から、IRF-1を介するIFN_γによるNO産生系も、リステリア排除に重要ではあるが、NF-IL6を介する別の遺伝子発現も重要なことが明らかとなった。一方マクロファージに貪食されたリステリアは、電顕で観察したところ対照と異なり多くがファゴゾームから細胞質内へ脱出、増殖していることが判明した。従って、このマウスのマクロファージはリステリアを貪食した後ファゴゾーム内に幽閉しておくことに障害があることも明らかとなった。今後はマクロファージの他の機能を解析するとともに、NF-IL6が制御する下位遺伝子のクローニングも試みる。

NF - IL6 は, acute inflammation に お い て activeness さ れ る more く の サ イ ト カ イ ン や traces of acute phase proteins 伝 son の planning write, マ ク ロ フ ァ ー ジ の differentiation や activeness に masato and し て い る. ジ ー ン タ ー ゲ テ ィ ン グ に よ り cropping さ れ た NF - IL6 owe loss マ ウ ス は easy infectious を し, わ ず か 500 cfu と い う small の リ ス テ リ ア を intra-abdominal に cast with し た だ け で all cases within 5 days に death し た. The <s:1> れ れ is the same as the じ intracellular parasitic bacteria であるサ モネラに モネラに are the same as those of the <s:1> て モネラに である. リ ス テ リ ア の final rule out は マ ク ロ フ ァ ー ジ に よ り な さ れ る た め, こ の マ ウ ス に お け る マ ク ロ フ ァ ー ジ function analytical し を た. Can the wandering, gluttony に は abnormal が な く, active の beacon と し て adjustable べ ら れ た cell surface の, Fc_ gamma R and Mac - 1 MHC ク ラ ス II, LFA - 1 の induced に も abnormal が recognize め ら れ な か っ た. More く の inflammatory サ イ ト カ イ ン (IL - 1, IL - 6, TNF_ alpha, etc.) も normal に さ れ て い た が, g-csf は マ ク ロ フ ァ ー ジ と line d bud cells に お い て の み induced が weak く, NF IL6 が tissue specific に g-csf heritage 伝 son の planning write を suppression し て い が る possibility in stopping さ れ た. こ れ ま で の research で, リ ス テ リ ア infection に important と さ れ る IFN_ gamma や TNF_ alpha は normal に さ れ て お り, エ フ ェ ク タ ー molecular と し て important だ と think わ れ る a acidification smothering element (NO) の produce に も handicap of は み ら れ な か っ た. NO synthetic enzyme inhibitor against tonic で あ る NMMG を with い た be 験 か ら を interfaces, IRF - 1 す る IFN_ gamma に よ る NO produce も, リ ス テ リ ア exclude に important で は あ る が, NF IL6 を interface す る don't の heritage 伝 son 発 も now important な こ と が Ming ら か と な っ た. Party マ ク ロ フ ァ ー ジ に gluttony さ れ た リ ス テ リ ア は, electricity 顕 で 観 examine し た と こ ろ polices according to と different な り more く が フ ァ ゴ ゾ ー ム か ら cytoplasm へ emergence, raised colonization し て い る こ と が.at し た. 従 っ て, こ の マ ウ ス の マ ク ロ フ ァ ー ジ は リ ス テ リ ア を gluttony し た after フ ァ ゴ ゾ ー ム within に claustrophobic し て お く こ と に handicap of が あ る こ と も Ming ら か と な っ た. Future は マ ク ロ フ ァ ー ジ の he の function analytical す を る と と も に, NF IL6 が suppression す る under a posthumous son 伝 の ク ロ ー ニ ン グ も try み る.

项目成果

Tanaka T.: "Targeted disruption of the NF-IL6 gene discloses its essential role in bacteria killing and tumor cytotoxicity by macrophages." Cell. 80. 353-361 (1995)

Tanaka T.：“NF-IL6 基因的靶向破坏揭示了其在巨噬细胞杀死细菌和肿瘤细胞毒性中的重要作用。”