ジーンターゲティング法を用いたIL-6シグナル伝達分子の解析

使用基因打靶方法分析IL-6信号分子

• 批准号: 06670368
• 负责人: 吉田 進昭
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Research Institute, Osaka Medical Center for Maternal and Child Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670368/
• 关键词: ジーンターゲティング; 相同的組換え; 転写因子; NF-IL6; マクロファージ; サイトカイン; リステリア; 細胞内寄生細菌

NF-IL6は、急性炎症において活性化される多くのサイトカインや急性期蛋白遺伝子の転写、マクロファージの分化や活性化に関与している。ジーンターゲティングにより作製されたNF-IL6欠損マウスは易感染性を示し、わずか500cfuという少量のリステリアを腹腔内に投与しただけで全例5日以内に死亡した。これは同じ細胞内寄生細菌であるサルモネラに対しても同様である。リステリアの最終的排除はマクロファージによりなされるため、このマウスにおけるマクロファージ機能を解析した。遊走性、貪食能には異常がなく、活性化の示標として調べられた細胞表面のMac-1、Fc_γR、MHCクラスII、LFA-1等の誘導にも異常が認められなかった。多くの炎症性サイトカイン(IL-1、IL-6、TNF_α等)も正常に産生されていたが、G-CSFはマクロファージと線維芽細胞においてのみ誘導が弱く、NF-IL6が組織特異的にG-CSF遺伝子の転写を制御している可能性が示唆された。これまでの研究で、リステリア感染に重要とされるIFN_γやTNF_αは正常に産生されており、エフェクター分子として重要だと思われる一酸化窒素(NO)の産生にも障害はみられなかった。NO合成酵素阻害剤であるNMMGを用いた実験から、IRF-1を介するIFN_γによるNO産生系も、リステリア排除に重要ではあるが、NF-IL6を介する別の遺伝子発現も重要なことが明らかとなった。一方マクロファージに貪食されたリステリアは、電顕で観察したところ対照と異なり多くがファゴゾームから細胞質内へ脱出、増殖していることが判明した。従って、このマウスのマクロファージはリステリアを貪食した後ファゴゾーム内に幽閉しておくことに障害があることも明らかとなった。今後はマクロファージの他の機能を解析するとともに、NF-IL6が制御する下位遺伝子のクローニングも試みる。

NF-IL6 is involved in the activation of multiple proteins in acute inflammation and in the differentiation and activation of proteins in acute inflammation. NF-IL6 was found to be less infectious than 500cfu. The same intracellular parasitic bacteria are present in the cells. The final elimination of the game is the analysis of the game's function. The abnormal induction of Mac-1, Fc_γR, MHC receptor II and LFA-1 on the cell surface was detected by the abnormal induction of migration, gluttony and activation. Many inflammatory cytokines (IL-1, IL-6, TNF_α, etc.) are normally produced, G-CSF is weakly induced, and NF-IL-6 is tissue-specific, and G-CSF gene expression may be inhibited. This study shows that IFN_γ and TNF_α are important for infection, but they are not normally produced. NO synthase inhibitors are important for the production of NO through the use of NMMG, IFN-gamma through IRF-1, and for the development of other enzymes through NF-IL6. A party of gluttony, electricity, light, light従って、このマウスのマクロファージはリステリアを贪食した后ファゴゾーム内に幽闭しておくことに障害があることも明らかとなった。In the future, the analysis of other functions of NF-IL6 will be carried out.

项目成果

Tanaka T.: "Targeted disruption of the NF-IL6 gene discloses its essential role in bacteria killing and tumor cytotoxicity by macrophages." Cell. 80. 353-361 (1995)

Tanaka T.：“NF-IL6 基因的靶向破坏揭示了其在巨噬细胞杀死细菌和肿瘤细胞毒性中的重要作用。”