Advanced research on the original drug discovery platform for hereditary intractable Alport syndrome

遗传性难治性阿尔波特综合征原研药平台的深入研究

• 批准号: 22H02810
• 负责人: 甲斐 広文
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22H02810/
• 关键词: Alport症候群; ミスセンス変異; IV型コラーゲン; Alisporivir; モデルマウス; アルポート症候群; Ⅳ型コラーゲン; 創薬; alport; CKD; collagen

ヒトα345 (IV) の三量体評価系と同様にマウスα345(Ⅳ) を発現するsNanoLuc三量体評価系の構築を行った。α3, 5(Ⅳ) の C, N 末端にNanoLuc fragment (LgBit, SmBit) を融合したコンストラクトを作製し, これらをHEK293T細胞に過剰発現させたところ，α345(Ⅳ) 三量体形成条件下のみ発光が認められた。次に, 作製したα5(IV) (C, N-term) にAlport 症候群患者での臨床報告のある30 種類のミスセンス変異を導入し, 変異ごとの細胞内 (三量体形成能), 培養上清中 (三量体分泌能) の発光を測定した。その結果, C-termまたはN-termにおいて, 野生型(WT)のα5(IV)導入群(control)と比較して, ①三量体形成・分泌能が正常な変異体, ②三量体形成・分泌不全を示す変異体にそれぞれ分類することが出来た。各分類において, ヒト評価系において, ①三量体形成・分泌能が正常な変異体(C-term：13個, N-term：6個)のうち, マウス評価系においても同様の三量体形成・分泌能を示した変異体は, C-termでは12個, N-termでは6個であり, その多くがヒト-マウス間で共通していた。また, ヒト評価系において, ②三量体形成・分泌不全を示す変異体(C-term：13個, N-term：18個)のうち, マウス評価系においても同様に三量体形成・分泌不全を示した変異体は, C-termでは1個, N-termでは7個と想定よりも少なく, 変異による三量体形成・分泌不全の程度はヒトとマウスで必ずしも一致しないことが示唆された。しかし一方で, 少ないながらもヒト-マウス間で共通する変異体が存在することが明らかとなり, 新規ミスセンス変異マウス作製における候補変異となり得ることが示唆された。

ヒ ト alpha 345 (IV) three quantity body review 価 の と with others に マ ウ ス alpha 345 (Ⅳ) を 発 now す る sNanoLuc three quantity body line review 価 is の build を っ た. Alpha 3, 5 (Ⅳ) の C, N terminal に NanoLuc fragments (LgBit SmBit) を fusion し た コ ン ス ト ラ ク ト を as し, こ れ ら を に HEK293T cells through turning 発 now さ せ た と こ ろ, Under the condition of the formation of α345(Ⅳ) trisomes, <s:1> み luminescence が recognition められた. に, cropping し た alpha 5 (IV) (C, N - term) に で Alport syndrome patients clinical report の の あ る 30 kinds の ミ ス セ ン ス を import し -, - different ご と の cells (three quantity body can form), in the culture supernatant (three quantity body can secrete) の 発 light を determination し た. そ の results, C - term ま た は N - term に お い て, wild type (WT) の alpha 5 (IV) import group (control) と comparative し て, (1) three quantity body form, can secrete が normal な - variants, (2) the amount of three body formation, secretion is not complete を す - variant に そ れ ぞ れ classification す る こ と が た. Each classification に お い て, ヒ ト review 価 department に お い て, (1) three quantity body form, can secrete が normal な - variants (C - term: 13, N - term: 6) の う ち, マ ウ ス review 価 department に お い て も with others の three quantity body formation, can secrete を し た - は, C - term で は 12, N - term で は six で あ り, そ の more く が ヒ ト - マ ウ ス で overlap among し て い た. ま た, ヒ ト review 価 department に お い て, (2) the amount of three body formation, secretion is not complete を す - variants (C - term: 13, N - term: 18) の う ち, マ ウ ス review 価 department に お い て も with others に three quantity body formation, secretion is not complete を し た - は, C - term で は 1, N - term で は seven と scenarios よ り も less な く, - different に よ る three quantity body formation, secretion insufficiency の degree は ヒ ト と マ ウ ス で will ず し も consistent し な い こ と が in stopping さ れ た. し か し で, one party is less な い な が ら も ヒ ト - マ ウ ス で す common between る - variants exist が す る こ と が Ming ら か と な り, new rules ミ ス セ ン ス - different マ ウ ス cropping に お け る alternate - different と な り have る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

可逆的 Keap1 阻害薬による慢性腎臓病モデルマウスの病態改善効果

可逆性Keap1抑制剂对改善慢性肾病模型小鼠病理的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 堀園 潤;加世田 将大;三宮 裕也;桑水流 淳;小木 彩矢佳;佐々木亮子;砂本 秀利;吹屋 洋彦;西山 勇人;小山 結実; Mary Ann Suico;奈良 太;首藤 剛;大沼 和弘;甲斐 広文
• 通讯作者: 甲斐 広文

Renal protective effect of a novel non-covalent Keap1-Nrf2 inhibitor in chronic kidney disease

新型非共价 Keap1-Nrf2 抑制剂对慢性肾脏病的肾脏保护作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 堀園 潤;加世田 将大;三宮 裕也;桑水流 淳;小木 彩矢佳;佐々木亮子;砂本 秀利;吹屋 洋彦;西山 勇人;小山 結実;Mary Ann Suico;奈良 太;首藤 剛;大沼 和弘;甲斐 広文
• 通讯作者: 甲斐 広文

AKI to CKD transition モデルマウスに対する微弱パルス電流と温熱の同時印加の効果

同时施加弱脉冲电流和热对AKI向CKD转变模型小鼠的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 津波古 遥希;寺本 啓祐;加世田 将大;Piruzyan Mariam;岩上 長巨;荒川 知南;Marry Ann Suico;首藤 剛;甲斐 広文
• 通讯作者: 甲斐 広文

The 2019 and 2021 International Workshops on Alport Syndrome.

• DOI: 10.1038/s41431-022-01075-0
• 发表时间: 2022-05
• 期刊: European journal of human genetics : EJHG
• 作者: Daga S;Ding J;Deltas C;Savige J;Lipska-Ziętkiewicz BS;Hoefele J;Flinter F;Gale DP;Aksenova M;Kai H;Perin L;Barua M;Torra R;Miner JH;Massella L;Ljubanović DG;Lennon R;Weinstock AB;Knebelmann B;Cerkauskaite A;Gear S;Gross O;Turner AN;Baldassarri M;Pinto AM;Renieri A
• 通讯作者: Renieri A

AKI to CKD transitionモデルマウスに対する微弱パルス電流と温熱の同時印加の効果

同时施加弱脉冲电流和热对AKI向CKD转变模型小鼠的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 津波古 遥希;寺本 啓祐;加世田 将大;Piruzyan Mariam;岩上 長巨;荒川 知南;Mary Ann Suico;首藤 剛;甲斐 広文
• 通讯作者: 甲斐 広文