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ジフテリア毒素をモデルにした蛋白質の細胞内輸送機構の解析

以白喉毒素为模型分析蛋白质细胞内转运机制

基本信息

批准号：
03264219
负责人：
目加田英輔
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Kurume University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-03264219/
关键词：
ジフテリア毒素リセプタ-膜タンパク質 cDNAクロ-ニング

项目摘要

申請者らは、これまでジフテリア毒素リセプタ-に関して次のことを明らかにしてきた。すなわち、(1)サル腎臓由来のVero細胞では、分子量14.5kDのタンパク質(DTR14.5)がジフテリア毒素リセプタ-,あるいは少なくともジフテリア毒素結合分子であること、(2)DTR14.5の完全精製、(3)DTR14.5には27kDの膜タンパク質(DRAP27)がアソシエ-トしていること、(4)DRAP27タンパク質自体はジフテリア毒素に結合性を示さないが、DRAP27タンパク質に対する抗体がジフテリア毒素の細胞への結合を阻害することである。今年、本研究によって、DRAP27タンパク質cDNAのクロ-ニングに成功し、その塩基配列の決定を行った。分離したcDNAをジフテリア毒素リセプタ-を保持する細胞にトランスフェクションしたところジフテリア毒素結合活性の上昇が認められたが、毒素リセプタ-を持たないマウスの細胞ではそのような結合活性の上昇は認められなかった。このことから、DRAP27分子は、ジフテリア毒素結合分子そのものではないが、ジフテリア毒素リセプタ-になんらかの役割を果たしていることが明らかになった。現在このタンパク質のcDNAおよびantisence cDNA種々のを細胞にトランスフェクションして、その役割についてさらに詳しく解析している。また塩基配列から推定されるこのタンパク質の性状およびホモロジ-検索の結果は、DRAP27タンパク質がジフテリア毒素リセプタ-のみならず、広く細胞の機能に関係したものであることを示唆しており、今後このタンパク質の細胞における生理的役割についても解析したい。

The applicant shall submit the application to the court for approval. (1) The protein of Vero cells derived from the kidney was characterized by a molecular weight of 14.5kD.(DTR14.5) DTR14.5: DTR14.5: DTR14 DRAP27 is an antibody that blocks the binding of the toxin to cells. This year, the study was conducted successfully to determine the nucleotide sequence of DRAP27. Isolation of cDNA from Toxin Cell and Its Binding Activity Increase in Toxin Cell The DRAP27 molecule binds to the toxin molecule and the enzyme is activated. Now, the cDNA and antisence cDNA species of this gene are being analyzed in detail in cells. The results of this study indicate that DRP 27 can be used to predict the relationship between cell function and quality, and to analyze the physiological function of cells in the future.